| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-24页 |
| ·问题的提出 | 第11页 |
| ·选题背景及意义 | 第11-12页 |
| ·文献综述 | 第12-23页 |
| ·Wnt 基因的发现及其信号传导通路的概述 | 第12-13页 |
| ·经典Wnt/β-catenin 信号通路及其调控机制 | 第13-15页 |
| ·Wnt 信号通路与肿瘤及肿瘤干细胞的关系 | 第15-17页 |
| ·含有RPR 结构域蛋白的研究进展 | 第17-18页 |
| ·真核生物RNA 聚合酶II 的研究进展 | 第18-19页 |
| ·细胞周期和肿瘤 | 第19-22页 |
| ·3C (Chromosome Conformation Capture) 技术背景及应用概述 | 第22-23页 |
| ·研究方法 | 第23页 |
| ·论文结构安排 | 第23-24页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第24-43页 |
| ·菌种和细胞 | 第24页 |
| ·抗体和试剂 | 第24页 |
| ·质粒来源和质粒构建 | 第24-26页 |
| ·RNA 提取、反转录PCR 和定量PCR | 第26-29页 |
| ·细胞培养 | 第29页 |
| ·细胞转染 | 第29-30页 |
| ·稳定细胞系的建立 | 第30页 |
| ·GST 原核蛋白纯化 | 第30-31页 |
| ·细胞的核质分离实验 | 第31-32页 |
| ·免疫共沉淀实验 | 第32-33页 |
| ·SDS-PAGE 和免疫印记(Western blotting) | 第33-34页 |
| ·荧光素酶报告实验 | 第34-35页 |
| ·免疫荧光实验 | 第35-36页 |
| ·细胞增殖能力测定(MTT 法) | 第36-37页 |
| ·软琼脂克隆形成实验(Colony Formation Assay) | 第37-38页 |
| ·细胞周期实验 | 第38-39页 |
| ·染色质免疫共沉淀实验(ChIP) | 第39-40页 |
| ·染色质构象捕捉实验 3C (Chromosome Conformation Capture) | 第40-43页 |
| 第3章 p15RS 和β-catenin 或TCF4 的相互作用 | 第43-49页 |
| ·结果与讨论 | 第43-48页 |
| ·p15RS 和β-catenin 或 TCF4 在哺乳动物细胞里存在相互作用 | 第43-44页 |
| ·p15RS 和β-catenin 或 TCF4 在体外和生理条件下的相互作用 | 第44-45页 |
| ·p15RS 和β-catenin 或 TCF4 在细胞核里存在共定位 | 第45-46页 |
| ·p15RS 和β-catenin 或 TCF4 相互作用结构域的确定 | 第46-47页 |
| ·β-catenin 或 TCF4 与p15RS 相互作用结构域的确定 | 第47-48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 第4章 p15RS 抑制Wnt/β-catenin 信号通路 | 第49-52页 |
| ·结果与讨论 | 第49-51页 |
| ·过量表达p15RS 抑制 Wnt/β-catenin 信号通路 | 第49-50页 |
| ·降低内源性p15RS 促进 Wnt/β-catenin 信号通路的激活 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 第5章 p15RS 抑制Wnt/β-catenin 信号通路的机制 | 第52-56页 |
| ·结果与讨论 | 第52-55页 |
| ·p15RS 和β-catenin 或 TCF4 相互作用受 Wnt 信号的调节 | 第52页 |
| ·p15RS 抑制β-catenin 和 TCF4 复合物的形成 | 第52-53页 |
| ·p15RS 抑制β-catenin 和 TCF4 复合物结合 Cyclin D1 启动子 | 第53-54页 |
| ·p15RS 不影响 TCF4 结合 DNA 的能力 | 第54-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 第6章 p15RS 抑制细胞增殖和Wnt 靶基因的表达 | 第56-59页 |
| ·结果与讨论 | 第56-58页 |
| ·p15RS 抑制细胞增殖 | 第56页 |
| ·p15RS 抑制 Wnt 靶基因的表达 | 第56-57页 |
| ·p15RS 抑制 Wnt/β-catenin 信号通路的模型 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 第7章 CREPT 基因特征分析 | 第59-61页 |
| ·结果与讨论 | 第59-60页 |
| ·CREPT 同源性分析 | 第59-60页 |
| ·CREPT 与p15RS 的进化树分析 | 第60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| 第8章 CREPT 在肿瘤组织中的表达和病理特征 | 第61-63页 |
| ·结果与讨论 | 第61-62页 |
| ·CREPT 在肿瘤组织中的免疫组化分析 | 第61-62页 |
| ·CREPT 含量与患者预后生存时间的相关性分析 | 第62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 第9章 CREPT 的生物学功能 | 第63-69页 |
| ·结果与讨论 | 第63-68页 |
| ·CREPT 促进细胞增殖 | 第63-64页 |
| ·CREPT 促进软琼脂集落形成 | 第64-65页 |
| ·CREPT 促进肿瘤生长 | 第65-66页 |
| ·CREPT 促进细胞周期G1/S 的转换 | 第66-68页 |
| ·小结 | 第68-69页 |
| 第10章 CREPT 调控Cyclin D1 转录的机理 | 第69-74页 |
| ·结果与讨论 | 第69-73页 |
| ·CREPT 促进 Cyclin D1 的表达 | 第69页 |
| ·CREPT 在转录水平调控基因的转录 | 第69-70页 |
| ·CREPT 结合到 Cyclin D1 的启动子上 | 第70-72页 |
| ·3C 实验证明 CREPT 调控 cyclin D1 的机制 | 第72-73页 |
| ·小结 | 第73-74页 |
| 第11章 CREPT 和RNAP II 的相互作用 | 第74-76页 |
| ·结果与讨论 | 第74-75页 |
| ·CREPT 和 RNAP II 在哺乳动物细胞中的相互作用 | 第74-75页 |
| ·CREPT 和 RNAP II 在体外和生理条件下存在相互作用 | 第75页 |
| ·小结 | 第75-76页 |
| 结论 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-87页 |
| 致谢 | 第87-89页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第89页 |
