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枇杷离体培养及其在遗传转化与种质保存中的应用

摘要第1-13页
Abstract第13-16页
第一章 引言第16-32页
 1 植物遗传转化研究进展第16-19页
   ·植物遗传转化方法简述第16页
   ·农杆菌介导的遗传转化机理第16-17页
   ·影响农杆菌介导遗传转化的因素第17-18页
     ·受体系统第17-18页
     ·农杆菌菌株类型第18页
     ·抗生素的选择第18页
     ·培养方法与培养条件第18页
   ·农杆菌介导的遗传转化在果树中的应用第18-19页
 2 植物离体保存研究进展第19-20页
   ·植物离体保存技术的优点第19页
   ·植物离体保存方法简介第19页
     ·限制生长保存第19页
     ·低温保存第19页
     ·超低温保存第19页
   ·植物离体保存机理研究第19-20页
 3 ACS 和ACO 基因研究进展第20-25页
   ·乙烯的生物合成第20-21页
   ·ACS 基因研究概况第21-22页
     ·ACS 基因的克隆第21页
     ·ACS 基因的表达第21-22页
     ·ACS 基因在植物遗传转化中的应用第22页
   ·ACO 基因研究进展第22-23页
     ·ACO 基因的克隆第22-23页
     ·ACO 基因的表达第23页
   ·乙烯的生理作用第23-25页
     ·乙烯与果实成熟第23页
     ·乙烯与细胞衰老第23-24页
     ·乙烯与植物离体培养第24-25页
 4 枇杷生物技术研究进展第25-31页
   ·枇杷离体培养研究进展第25-26页
     ·茎尖培养第25页
     ·胚培养第25页
     ·胚乳培养第25页
     ·原生质体培养第25-26页
     ·花药培养第26页
   ·枇杷种质资源离体保存研究进展第26页
   ·枇杷分子生物学研究进展第26-30页
     ·核酸提取第26-27页
     ·分子标记第27-28页
     ·基因克隆第28-30页
   ·枇杷遗传转化研究进展第30-31页
 5 本研究的意义和内容第31-32页
   ·本研究的意义第31页
   ·本研究的内容第31-32页
第二章 枇杷离体培养第32-49页
 第一节 枇杷胚性培养物的诱导与继代保持第32-40页
  1 材料与方法第32-33页
   ·材料第32-33页
   ·方法第33页
   ·培养条件第33页
  2 结果与分析第33-39页
   ·枇杷花药培养与愈伤组织诱导第33-38页
   ·不同继代方式对枇杷幼胚胚性培养物的影响第38-39页
  3 讨论第39-40页
   ·正交试验设计筛选出影响枇杷花药愈伤组织诱导的关键因素第39页
   ·影响枇杷幼胚胚性培养物长期继代保持的因素第39-40页
 第二节 枇杷幼胚培养与试管苗获得第40-49页
  1 材料与方法第40-41页
   ·试验材料第40页
   ·方法第40-41页
   ·培养条件第41页
  2 结果与分析第41-48页
   ·影响4 个枇杷品种幼胚萌发的因素第41-45页
   ·4 个枇杷品种试管苗的增殖培养第45-47页
   ·4 个枇杷品种试管苗的生根培养第47-48页
  3 讨论第48-49页
   ·不同枇杷品种幼胚培养具有相似的规律第48页
   ·激素在枇杷幼胚培养中的作用第48-49页
第三章 枇杷胚性培养物 ACS 和 ACO 基因克隆及遗传转化第49-125页
 第一节 枇杷胚性培养物ACS 基因克隆第49-92页
  1 材料与方法第49-56页
   ·材料第49-50页
   ·方法第50-56页
  2 结果与分析第56-90页
   ·枇杷胚性培养物总RNA 和叶片基因组DNA 的提取效果第56-58页
   ·枇杷胚性培养物ACS 基因cDNA 保守区的克隆第58-62页
   ·枇杷胚性培养物ACS 基因cDNA 开放阅读框(ORF)的克隆第62-64页
   ·枇杷 ACS 基因序列分析第64-67页
   ·枇杷两个ACS 基因序列的比较分析第67-71页
   ·枇杷 ACS 基因的生物信息学分析第71-84页
   ·枇杷基因组DNA ACS 基因克隆第84-90页
  3 讨论第90-92页
   ·枇杷两个ACS 基因之间的关系第90-91页
   ·枇杷 ACS 基因的功能第91页
   ·枇杷 ACS 基因内含子的作用第91-92页
 第二节 枇杷胚性培养物ACO 基因克隆第92-118页
  1 材料与方法第92-96页
   ·材料第92页
   ·方法第92-96页
  2 结果与分析第96-117页
   ·枇杷胚性培养物ACO 基因cDNA 保守区的克隆第96-100页
   ·枇杷胚性培养物ACO 基因cDNA 的3’RACE 克隆结果第100-101页
   ·枇杷胚性培养物ACO 基因cDNA 的开放阅读框(ORF)克隆结果第101-102页
   ·枇杷胚性培养物ACO 基因全长序列拼接第102-103页
   ·枇杷 ACO 基因序列分析第103-105页
   ·枇杷 ACO 基因的生物信息学分析第105-112页
   ·枇杷基因组DNA ACO 基因克隆第112-117页
  3 讨论第117-118页
   ·枇杷 ACO 基因cDNA 全长和DNA 全长的获得第117页
   ·枇杷 ACO 基因的功能第117-118页
 第三节 ACS 反义基因转化枇杷胚状体第118-125页
  1 材料与方法第118-120页
   ·材料第118-119页
   ·方法第119-120页
  2 结果与分析第120-123页
   ·GUS 染色结果情况第120页
   ·不同因素对GUS 瞬时表达率的影响第120-123页
  3 讨论第123-125页
   ·枇杷胚状体GUS 瞬时表达率的主要影响因素第123-124页
   ·根癌农杆菌与植物细胞的相互作用是遗传转化的关键第124页
   ·建立枇杷胚状体遗传转化体系的意义第124-125页
第四章 枇杷试管苗离体种质保存研究第125-134页
 第一节 枇杷试管苗离体种质保存方法探讨第125-128页
  1 材料与方法第125-126页
  2 结果与分析第126-128页
  3 讨论第128页
 第二节 枇杷试管苗离体种质保存第128-134页
  1 材料与方法第128-129页
   ·试验材料第128-129页
   ·方法第129页
   ·培养条件第129页
  2 结果与分析第129-133页
   ·22 份枇杷种质资源的幼胚萌发第129页
   ·22 份枇杷种质资源的离体保存第129-131页
   ·长期保存的枇杷种质资源生长情况第131-133页
  3 讨论第133-134页
第五章 小结第134-137页
 1 枇杷胚性培养物的诱导与继代保持第134页
 2 枇杷幼胚培养与试管苗获得第134-135页
 3 枇杷胚性培养物中ACS 基因的克隆第135页
 4 枇杷胚性培养物中ACO 基因的克隆第135-136页
 5 ACS 反义基因转化枇杷胚状体第136页
 6 枇杷试管苗离体种质保存研究第136-137页
参考文献第137-147页
附录 1 图版及图版说明第147-156页
附录 2 枇杷 EjACS-1 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息第156-159页
附录 3 枇杷 EjACS-2 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息第159-161页
附录 4 枇杷 ACS 基因(DNA)序列登录 GenBank 信息第161-164页
附录 5 枇杷 EjACO-1 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息第164-166页
附录 6 枇杷 EjACO-2 基因(cDNA)序列登录 GenBank 信息第166-168页
附录 7 枇杷 ACO 基因(DNA)序列登录 GenBank 信息第168-170页
致谢第170页

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