| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第1章 绪论 | 第9-14页 |
| ·课题背景 | 第9页 |
| ·国内外研究现状 | 第9-11页 |
| ·MARVEL结构域蛋白的研究进展 | 第9-10页 |
| ·微管相关蛋白的细胞周期依赖性定位 | 第10-11页 |
| ·PKC调控的蛋白质核转位 | 第11-12页 |
| ·蛋白质与蛋白质的相互作用研究 | 第12-13页 |
| ·课题目的和意义 | 第13页 |
| ·研究内容 | 第13-14页 |
| 第2章 材料和方法 | 第14-26页 |
| ·实验材料 | 第14-17页 |
| ·细胞系 | 第14页 |
| ·载体及重组体 | 第14页 |
| ·主要试剂及配制 | 第14-16页 |
| ·主要仪器及耗材 | 第16-17页 |
| ·分析软件及生物信息学网站 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-25页 |
| ·mP19 表达载体的构建及转染 | 第17-19页 |
| ·GST-pull down技术 | 第19-20页 |
| ·免疫共沉淀 | 第20页 |
| ·mP19 与微管骨架的共定位分析 | 第20-22页 |
| ·mP19 对微丝骨架的影响 | 第22页 |
| ·迁移小室实验检测mP19 对细胞运动的影响 | 第22-23页 |
| ·siRNA载体构建及稳定转染 | 第23-25页 |
| ·过表达mP19 对细胞增殖的影响 | 第25页 |
| ·细胞流式术分析细胞周期 | 第25页 |
| ·本章小结 | 第25-26页 |
| 第3章 mP19 蛋白质及其相互作用蛋白分析 | 第26-35页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·mP19 与人源MARVELD1 的同源分析 | 第26-30页 |
| ·mP19 蛋白保守性分析 | 第26-28页 |
| ·磷酸化位点比对分析及其生物学意义 | 第28-30页 |
| ·mP19 的相互作用蛋白质 | 第30-33页 |
| ·GST-pull down技术分析mP19 相互作用蛋白 | 第30-32页 |
| ·Co-IP分析m P19 相互作用蛋白 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 第4章 mP19 与细胞骨架及细胞运动的关系 | 第35-42页 |
| ·引言 | 第35页 |
| ·mP19 与微管骨架的共定位分析 | 第35-38页 |
| ·mP19 与纺锤体微管的周期依赖性共定位 | 第35-37页 |
| ·秋水仙素对mP19 定位的影响 | 第37-38页 |
| ·mP19 对微丝骨架的影响 | 第38-40页 |
| ·免疫染色法检测mP19 对F-actin的影响 | 第38-39页 |
| ·扫描电镜观察mP19 对细胞表面微绒毛的影响 | 第39-40页 |
| ·mP19 对细胞运动的影响 | 第40-42页 |
| ·运动细胞中mP19 的定位情况 | 第40-41页 |
| ·迁移小室实验检测mP19 对细胞运动的影响 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42页 |
| ·本章小结 | 第42-43页 |
| 第5章 mP19 对细胞增殖和周期的影响 | 第43-50页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·shRNA重组体构建及其干扰效果分析 | 第43-45页 |
| ·shRNA重组体构建 | 第43-44页 |
| ·干扰效果分析 | 第44-45页 |
| ·过表达mP19 对细胞增殖的影响 | 第45-46页 |
| ·流式细胞术检测过表达mP19 对细胞周期的影响 | 第46-47页 |
| ·Western blot检测cyclin D1 及ki-67 表达量变化 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·本章小结 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50页 |
| 展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 附录1 测序结果 | 第55-56页 |
| 附录2 增殖曲线数据 | 第56-57页 |
| 附录3 细胞周期分布数据 | 第57-58页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60页 |