丧失顶端优势的樟子松突变体蛋白质组学研究及Rad23基因克隆
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 绪论 | 第8-18页 |
| ·植物顶端优势研究现状 | 第8-9页 |
| ·直接抑制学说 | 第8页 |
| ·第二信使假说 | 第8-9页 |
| ·新植物激素假说 | 第9页 |
| ·蛋白质组学概况 | 第9-12页 |
| ·双向凝胶电泳技术 | 第11页 |
| ·质谱鉴定技术 | 第11-12页 |
| ·植物蛋白组学研究及技术进展 | 第12-16页 |
| ·基于凝胶的定量蛋白质组学技术 | 第12-13页 |
| ·基于质谱的定量蛋白质组学策略 | 第13-14页 |
| ·标记定量技术 | 第13-14页 |
| ·非标记定量技术 | 第14页 |
| ·多维蛋白质鉴定蛋白质组学 | 第14页 |
| ·翻译后修饰蛋白质组学 | 第14-16页 |
| ·磷酸化蛋白质组学 | 第15页 |
| ·氧化还原蛋白质组学 | 第15页 |
| ·其他翻译后修饰 | 第15-16页 |
| ·Rad23研究现状 | 第16页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
| ·本研究的技术路线 | 第17-18页 |
| 2 樟子松突变体的蛋白质组学研究 | 第18-37页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·实验试剂 | 第18页 |
| ·主要实验仪器 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-23页 |
| ·植物材料的处理 | 第19页 |
| ·蛋白质的样品制备 | 第19页 |
| ·蛋白质双向电泳 | 第19-22页 |
| ·准备工作 | 第19页 |
| ·溶液的配制 | 第19-20页 |
| ·12.5%SDS-聚丙烯酰胺凝胶的制备 | 第20页 |
| ·等电聚焦电泳 | 第20页 |
| ·平衡胶条 | 第20页 |
| ·SDS-PAGE分离 | 第20-21页 |
| ·考马斯亮蓝染色 | 第21页 |
| ·凝胶扫描和图像分析 | 第21页 |
| ·蛋白质的胶内酶解 | 第21页 |
| ·质谱鉴定与数据库检索 | 第21-22页 |
| ·整体染色石蜡制片实验流程 | 第22-23页 |
| ·实验结果与分析 | 第23-37页 |
| ·野生型与突变体的形态学比较 | 第23页 |
| ·突变体与野生植株顶芽萌发时期的蛋白组学分析 | 第23-35页 |
| ·散点检验 | 第26-27页 |
| ·差异蛋白点分析 | 第27页 |
| ·质谱鉴定以及数据检索 | 第27-31页 |
| ·差异蛋白质的功能分类 | 第31-34页 |
| ·三种可能参与植物顶端优势调控的差异蛋白 | 第34-35页 |
| ·结论与讨论 | 第35-37页 |
| 3 Rad23基因的克隆与序列分析 | 第37-48页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·植物材料 | 第37页 |
| ·菌株和载体 | 第37页 |
| ·试剂和药品 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-40页 |
| ·RNA提取 | 第37页 |
| ·提取溶液 | 第37页 |
| ·RNA提取方法 | 第37页 |
| ·反转录(第一链cDNA合成) | 第37-38页 |
| ·基因克隆 | 第38页 |
| ·PCR反应 | 第38页 |
| ·DNA收、测序 | 第38页 |
| ·LIC载体构建 | 第38-39页 |
| ·RAD23蛋白的表达及纯化 | 第39-40页 |
| ·蛋白的表达检测 | 第39页 |
| ·蛋白可溶性检测 | 第39-40页 |
| ·蛋白的纯化 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-46页 |
| ·Rad23基因的克隆 | 第40-41页 |
| ·Rad23蛋白的原核表达与纯化 | 第41-46页 |
| ·结论与讨论 | 第46-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 讨论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 附录 | 第56-59页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
