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涡虫头部再生过程中眼点形态发生及相关基因的表达分析

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-7页
目录第7-10页
缩略语第10-12页
1 前言第12-30页
   ·研究意义第12-13页
   ·眼点的起源及演化第13-16页
   ·涡虫眼点的基本结构及进化地位第16-20页
   ·涡虫眼点和神经系统再生国内外研究现状第20-30页
     ·涡虫再生国内外研究概况第20-24页
     ·涡虫中枢神经系统(CNS)再生相关基因及其国内外研究现状第24-25页
     ·涡虫眼点再生相关基因及其国内外研究现状第25-30页
2 材料与方法第30-56页
   ·材料第30-36页
     ·淡水涡虫的野外采集第30页
     ·实验用涡虫的来源第30页
     ·实验所用引物第30-32页
     ·主要技术路线第32-33页
     ·药品、试剂与仪器第33-36页
   ·方法第36-56页
     ·涡虫再生最适条件优化第36-37页
     ·石蜡切片制备第37页
     ·避光性及光谱实验第37-38页
     ·总RNA提取与检测第38页
     ·cDNA克隆第38-39页
     ·PCR扩增,测序及分析第39-47页
     ·眼点再生相关基因的实时荧光定量PCR(Real-time PCR)第47-49页
     ·整体原位杂交第49-56页
3 结果第56-94页
   ·日本三角涡虫和阳城多目涡虫的形态学特征第56-57页
     ·日本三角涡虫(D.japonica)的形态学特征第56页
     ·阳城多目涡虫(P.yangchengensis)的形态学特征第56-57页
   ·多目涡虫眼点数目和体长的关系第57-58页
   ·两种涡虫再生的最适条件第58-61页
     ·日本三角涡虫再生的最适条件第58-59页
     ·阳城多目涡虫(P.yangchengensis)再生的最适条件第59-61页
   ·两种涡虫头部再生过程中眼点的形态发生第61-63页
     ·形态学变化特征第61-62页
     ·组织学变化特征第62-63页
   ·日本三角涡虫眼点再生过程中避光性及光谱敏感性变化第63-65页
   ·涡虫头部再生过程中RNA提取与检测结果第65-66页
   ·cDNA克隆结果第66页
   ·Djopsin、Psix-1、Pβ-actin三基因全长cDNA克隆第66-78页
     ·日本三角涡虫Djopsin基因全长cDNA克隆及序列分析第66-69页
     ·阳城多目涡虫Psix-1基因全长cDNA克隆及序列分析第69-74页
     ·阳城多目涡虫Pβ-actin基因全长cDNA克隆及序列分析第74-78页
   ·涡虫眼点再生相关基因的cDNA克隆第78-79页
   ·涡虫头部再生过程中眼点再生相关基因的实时表达第79-87页
     ·最佳内参基因选择第79-81页
     ·与涡虫眼点再生相关的十个基因实时荧光定量PCR扩增结果第81-87页
   ·Psix-1在阳城多目涡虫整体及头部再生过程中的原位杂交第87-94页
     ·Psix-1 cDNA合成探针扩增结果第88页
     ·Pspt18DNA质粒检测结果第88-89页
     ·PstP18DNA-Psix-1连接载体的双酶切第89-90页
     ·阳性质粒线性化第90-91页
     ·Psix-1 cDNA探针合成和标记效率检测第91页
     ·Psix-1在阳城多目涡虫整体及再生个体中的原位杂交结果第91-94页
4 讨论第94-112页
   ·日本三角涡虫眼点形态发生过程第94-95页
   ·涡虫眼点再生相关基因表达与眼点形态发生之间的关系第95-112页
     ·实时荧光定量PCR技术及内参基因的选择第95-97页
     ·与日本三角涡虫视觉系统再生相关基因的表达分析第97-108页
     ·多目涡虫眼点形态发生及眼点数目和体长的关系第108-109页
     ·阳城多目涡虫Psix-1基因在成体及再生过程中的表达及其与眼点形态发生之间的关系第109-112页
5 结论第112-114页
参考文献(References)第114-142页
致谢第142-144页
攻读博士学位期间参加的科研项目和取得的研究成果清单第144-146页

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