摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
目录 | 第7-10页 |
缩略语 | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-30页 |
·研究意义 | 第12-13页 |
·眼点的起源及演化 | 第13-16页 |
·涡虫眼点的基本结构及进化地位 | 第16-20页 |
·涡虫眼点和神经系统再生国内外研究现状 | 第20-30页 |
·涡虫再生国内外研究概况 | 第20-24页 |
·涡虫中枢神经系统(CNS)再生相关基因及其国内外研究现状 | 第24-25页 |
·涡虫眼点再生相关基因及其国内外研究现状 | 第25-30页 |
2 材料与方法 | 第30-56页 |
·材料 | 第30-36页 |
·淡水涡虫的野外采集 | 第30页 |
·实验用涡虫的来源 | 第30页 |
·实验所用引物 | 第30-32页 |
·主要技术路线 | 第32-33页 |
·药品、试剂与仪器 | 第33-36页 |
·方法 | 第36-56页 |
·涡虫再生最适条件优化 | 第36-37页 |
·石蜡切片制备 | 第37页 |
·避光性及光谱实验 | 第37-38页 |
·总RNA提取与检测 | 第38页 |
·cDNA克隆 | 第38-39页 |
·PCR扩增,测序及分析 | 第39-47页 |
·眼点再生相关基因的实时荧光定量PCR(Real-time PCR) | 第47-49页 |
·整体原位杂交 | 第49-56页 |
3 结果 | 第56-94页 |
·日本三角涡虫和阳城多目涡虫的形态学特征 | 第56-57页 |
·日本三角涡虫(D.japonica)的形态学特征 | 第56页 |
·阳城多目涡虫(P.yangchengensis)的形态学特征 | 第56-57页 |
·多目涡虫眼点数目和体长的关系 | 第57-58页 |
·两种涡虫再生的最适条件 | 第58-61页 |
·日本三角涡虫再生的最适条件 | 第58-59页 |
·阳城多目涡虫(P.yangchengensis)再生的最适条件 | 第59-61页 |
·两种涡虫头部再生过程中眼点的形态发生 | 第61-63页 |
·形态学变化特征 | 第61-62页 |
·组织学变化特征 | 第62-63页 |
·日本三角涡虫眼点再生过程中避光性及光谱敏感性变化 | 第63-65页 |
·涡虫头部再生过程中RNA提取与检测结果 | 第65-66页 |
·cDNA克隆结果 | 第66页 |
·Djopsin、Psix-1、Pβ-actin三基因全长cDNA克隆 | 第66-78页 |
·日本三角涡虫Djopsin基因全长cDNA克隆及序列分析 | 第66-69页 |
·阳城多目涡虫Psix-1基因全长cDNA克隆及序列分析 | 第69-74页 |
·阳城多目涡虫Pβ-actin基因全长cDNA克隆及序列分析 | 第74-78页 |
·涡虫眼点再生相关基因的cDNA克隆 | 第78-79页 |
·涡虫头部再生过程中眼点再生相关基因的实时表达 | 第79-87页 |
·最佳内参基因选择 | 第79-81页 |
·与涡虫眼点再生相关的十个基因实时荧光定量PCR扩增结果 | 第81-87页 |
·Psix-1在阳城多目涡虫整体及头部再生过程中的原位杂交 | 第87-94页 |
·Psix-1 cDNA合成探针扩增结果 | 第88页 |
·Pspt18DNA质粒检测结果 | 第88-89页 |
·PstP18DNA-Psix-1连接载体的双酶切 | 第89-90页 |
·阳性质粒线性化 | 第90-91页 |
·Psix-1 cDNA探针合成和标记效率检测 | 第91页 |
·Psix-1在阳城多目涡虫整体及再生个体中的原位杂交结果 | 第91-94页 |
4 讨论 | 第94-112页 |
·日本三角涡虫眼点形态发生过程 | 第94-95页 |
·涡虫眼点再生相关基因表达与眼点形态发生之间的关系 | 第95-112页 |
·实时荧光定量PCR技术及内参基因的选择 | 第95-97页 |
·与日本三角涡虫视觉系统再生相关基因的表达分析 | 第97-108页 |
·多目涡虫眼点形态发生及眼点数目和体长的关系 | 第108-109页 |
·阳城多目涡虫Psix-1基因在成体及再生过程中的表达及其与眼点形态发生之间的关系 | 第109-112页 |
5 结论 | 第112-114页 |
参考文献(References) | 第114-142页 |
致谢 | 第142-144页 |
攻读博士学位期间参加的科研项目和取得的研究成果清单 | 第144-146页 |