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miR-145靶向PXN调控奶牛乳腺炎发病分子机制初探

缩略语表第8-9页
摘要第9-11页
ABSTRACT第11-13页
第一章 文献综述第14-24页
    1 奶牛乳腺炎研究进展第14-18页
        1.1 奶牛乳腺炎的病因第14-15页
        1.2 奶牛乳腺炎的危害第15页
        1.3 奶牛乳腺炎的分类及诊断方法第15-16页
        1.4 奶牛乳腺炎致病的表观遗传调控机制第16-18页
        1.5 奶牛乳腺炎的预防第18页
    2 miRNA的研究进展第18-20页
        2.1 miRNA的发现与形成过程第19-20页
        2.2 miRNA生物学功能第20页
        2.3 miRNA在奶牛乳腺炎中的作用第20页
    3 miRNA-145 的研究进展第20-21页
    4 PXN基因研究进展第21页
    5 本研究的目的和意义第21-24页
第二章 miR-145的生物信息学分析第24-36页
    1 材料与方法第24-26页
        1.1 材料第24页
        1.2 试验方法第24-26页
    2 结果与分析第26-32页
        2.1 miR-145基因在染色体上的定位第26-27页
        2.2 miR-145保守性及序列相似的分析第27-28页
        2.3 miR-145序列进化分析第28-29页
        2.4 miR-145差异表达分析第29页
        2.5 miR-145目标靶基因的预测第29-30页
        2.6 miR-145预测靶基因的GO分析第30-31页
        2.7 miR-145预测靶基因的Pathway分析第31页
        2.8 miR-145转录因子的预测以及TF-miRNA-靶基因调控网络图的构建第31-32页
    3 讨论第32-34页
        3.1 miR-145的进化第32-33页
        3.2 miR-145在乳腺中的差异表达第33页
        3.3 miR-145的功能预测分析第33页
        3.4 TFs-miR-145-靶基因的调控网络构建第33-34页
    4 小结第34-36页
第三章 LTA诱导型奶牛乳腺炎上皮细胞模型构建第36-44页
    1 材料与方法第36-39页
        1.1 材料第36-37页
        1.2 试验方法第37-39页
    2 结果与分析第39-41页
        2.1 LTA诱导MAC-T细胞炎症反应的最佳处理浓度和处理时间探究第39页
        2.2 细胞实时无标记法(RTCA)检测细胞第39-41页
    3 讨论第41-42页
    4 小结第42-44页
第四章 miR-145靶向调控PXN分子机制研究第44-62页
    1 材料和方法第44-54页
        1.1 材料第44-47页
        1.2 试验方法第47-54页
    2 结果与分析第54-59页
        2.1 miR-145与PXN基因3'UTR结合位点分析第54页
        2.2 目的片段的扩增第54-55页
        2.3 双荧光素酶报告载体构建与鉴定第55-56页
        2.4 双荧光素酶活性分析第56-57页
        2.5 miR-145过表达和抑制表达对预测靶基因PXN mRNA表达的影响第57-58页
        2.6 BCA法测定蛋白浓度标准曲线的绘制第58页
        2.7 转染后MAC-T细胞中PXN蛋白表达的变化第58-59页
    3 讨论第59-60页
    4 小结第60-62页
第五章 炎症条件下miR-145在乳腺炎发病过程中的功能研究第62-72页
    1 材料与方法第62-64页
        1.1 材料第62页
        1.2 试验方法第62-64页
    2 结果与分析第64-69页
        2.1 转染miR-145模拟物后奶牛乳腺上皮细胞总RNA质量检测第64-65页
        2.2 RT-qPCR检测MAC-T细胞中miR-145过表达和抑制表达效果第65页
        2.3 miR-145对MAC-T细胞因子分泌量的影响第65-66页
        2.4 miR-145对MAC-T细胞凋亡的影响第66-67页
        2.5 miR-145对MAC-T细胞增殖的影响第67-68页
        2.6 miR-145对MAC-T细胞骨架形态的变化第68-69页
    3 讨论第69-70页
    4 小结第70-72页
全文总结第72-74页
参考文献第74-84页
附录第84-88页
致谢第88-90页
作者简介第90-92页
攻读学位期间取得的研究成果第92页

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