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17α-Methyltestosterone和Letrozole对尼罗罗非鱼性转化影响及其性别决定机制的初步研究

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
1 引言第12-23页
   ·罗非鱼单雄性养殖及其性别遗传决定第12-13页
     ·罗非鱼简介第12页
     ·研究罗非鱼性别控制的意义第12页
     ·获得单雄性罗非鱼的方法第12-13页
   ·罗非鱼的性别决定第13-15页
     ·性别决定的环境因素第13页
     ·遗传连锁图谱与性别决定位点的定位第13-14页
     ·与性别决定相关的基因第14-15页
     ·鱼类性类固醇激素的作用第15页
   ·类固醇酶基因(11β-HSD2,P450arom,P450Scc)的研究进展第15-19页
   ·本论文的实验方法、研究意义以及技术路线第19-23页
     ·微卫星DNA 技术和荧光定量技术第19-21页
     ·本论文的研究意义第21页
     ·本论文的技术路线第21-23页
2 17α-甲基睾酮(17α-Methyltestosterone,MT)诱导尼罗罗非鱼雄性化后在鱼肌肉内残留研究第23-30页
   ·材料与方法第23-25页
     ·实验鱼第23页
     ·试验试剂和仪器第23页
     ·试验饲料的配制第23页
     ·试验分组及投喂管理第23页
     ·样品的处理第23-25页
     ·数据处理及参数计算第25页
   ·结果第25-27页
     ·不同MT 浓度对生长的影响第25页
     ·不同MT 浓度对雄性率的影响第25-26页
     ·不同MT 浓度对激素残留的影响第26-27页
   ·讨论第27-30页
     ·MT 处理对罗非鱼鱼苗性逆转与生长速度的影响第27-28页
     ·MT 在鱼体内的代谢第28-30页
3 17α-甲基睾酮(17α-Methyltestosterone, MT)和来曲唑(Letrozole)对类固醇酶基因的表达影响第30-45页
   ·材料第30-31页
     ·实验动物第30页
     ·实验试剂与主要仪器第30-31页
     ·培养基及缓冲液第31页
   ·方法第31-36页
     ·组织取样第31页
     ·荧光定量RT-PCR 引物的设计与合成第31-32页
     ·尼罗罗非鱼卵巢组织总RNA 的提取第32-33页
     ·尼罗罗非鱼总RNA 的反转录第33-34页
     ·PCR 产物的分离、回收和纯化第34页
     ·连接反应第34页
     ·转化第34-35页
     ·质粒DNA 提取第35-36页
     ·标准曲线的建立第36页
     ·目的基因的定量第36页
     ·数据分析第36页
   ·结果第36-42页
     ·尼罗罗非鱼卵巢组织总RNA 的检测第36-37页
     ·目的基因和内参基因标准曲线第37-38页
     ·内参基因和目标基因的溶解曲线第38-39页
     ·内参基因和目标基因的扩增曲线第39页
     ·基因的定量表达第39-40页
     ·MT 对P450arom、11β-HSD_2、P450Scc 基因的表达影响第40页
     ·Letrozole 对P450arom、11β-HSD_2、P450Scc 基因的表达影响第40页
     ·MT 和Letrozole 对P450arom、11β-HSD_2、P450Scc 基因的表达影响比较第40-42页
   ·讨论第42-45页
4 性别相关位点在尼罗罗罗非鱼中的检验第45-55页
   ·材料第45-46页
     ·试验鱼第45页
     ·试剂配制与仪器第45页
     ·常用溶液及缓冲液第45-46页
   ·实验方法第46-48页
     ·尼罗罗非鱼吉富品系基因组DNA 的提取第46页
     ·微卫星序列的获得与PCR 扩增第46-47页
     ·电泳与银染第47-48页
   ·统计分析第48-49页
   ·结果第49-50页
     ·基因组DNA 提取结果第49页
     ·微卫星PCR 结果第49-50页
     ·各微卫星位点的等位基因、多态信息含量和基因杂合度第50页
   ·讨论第50-55页
     ·雌雄尼罗罗非鱼群体的遗传多样性第50-52页
     ·性别相关标记的检验第52-55页
参考文献第55-64页
致谢第64-65页
附录缩略词表第65-66页
作者简介第66-67页
导师简介第67页

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