摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第11-28页 |
1.1 植物病原菌的概述 | 第11-13页 |
1.1.1 植物病原细菌与寄主互作的分子机理 | 第11-12页 |
1.1.2 植物病原细菌的分泌系统 | 第12-13页 |
1.2 黄单胞菌属 | 第13-14页 |
1.2.1 黄单胞菌属概况 | 第13页 |
1.2.2 十字花科黑腐病菌的概况 | 第13-14页 |
1.2.3 十字花科黑腐病菌Xcc 8004 | 第14页 |
1.3 Ⅲ分泌系统 | 第14-18页 |
1.3.1 Ⅲ分泌系统概括 | 第14-15页 |
1.3.2 植物病原菌Ⅲ型分泌系统概况 | 第15-16页 |
1.3.3 动物病原菌Ⅲ型分泌系统概况 | 第16-17页 |
1.3.4 Xcc 8004 Ⅲ分泌系统的装置 | 第17-18页 |
1.4 Ⅲ分泌系统的调控机理 | 第18-19页 |
1.5 致病的生化因子 | 第19-20页 |
1.6 小分子化合物对原核生物Ⅲ分泌系统的影响 | 第20-23页 |
1.6.1 小分子化合物在原核生物T3SS中的诱导作用 | 第20-21页 |
1.6.2 小分子化合物在原核生物T3SS中的抑制作用 | 第21-23页 |
1.7 高通量筛选控制Ⅲ分泌系统小分子化合物的方法 | 第23-24页 |
1.7.1 高通量筛选 | 第23页 |
1.7.2 细菌荧光素酶报告系统 | 第23-24页 |
1.8 小分子化合物与蛋白的互作方法 | 第24-26页 |
1.8.1 紫外光谱法 | 第24页 |
1.8.2 荧光光谱法 | 第24-25页 |
1.8.3 BIAcore技术 | 第25-26页 |
1.8.4 ITC技术 | 第26页 |
1.9 研究的义和目的 | 第26-28页 |
1.9.1 研究意义 | 第26-27页 |
1.9.2 研究目的 | 第27-28页 |
第二章 材料与方法 | 第28-43页 |
2.1 实验材料 | 第28-30页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第28-29页 |
2.1.2 培养基 | 第29-30页 |
2.1.3 植物材料 | 第30页 |
2.2 菌体培养及菌种保藏 | 第30-31页 |
2.2.1 菌体培养 | 第30-31页 |
2.2.2 菌种保藏 | 第31页 |
2.3 常用抗生素的使用 | 第31-32页 |
2.4 国家小分子化合物的使用 | 第32页 |
2.5 缓冲液和溶液的配制及使用浓度 | 第32页 |
2.6 RT引物 | 第32-33页 |
2.7 RT验证 | 第33-36页 |
2.7.1 提取总RNA | 第33-34页 |
2.7.2 RNA的消化反应 | 第34页 |
2.7.3 RNA反转cDNA | 第34-35页 |
2.7.4 RNA凝胶电泳 | 第35页 |
2.7.5 RT-PCR | 第35页 |
2.7.6 qRT-PCR | 第35-36页 |
2.8 DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第36-37页 |
2.9 生防检测 | 第37-38页 |
2.9.1 致病性检测(喷雾法) | 第37-38页 |
2.9.2 过敏反应(HR)试验 | 第38页 |
2.10 定量β-葡糖醛酸酶(GUS)的活性 | 第38-39页 |
2.11 细菌荧光素酶的检测 | 第39-40页 |
2.12 感受蛋白的提取与纯化 | 第40-43页 |
第三章 结果与分析 | 第43-57页 |
3.1 国家小分子化合物库筛选 | 第43-44页 |
3.2 初筛小分子化合物的Lux值 | 第44-45页 |
3.3 小分子化合物复筛结果 | 第45-48页 |
3.3.1 小分子化合物复筛的Lux值 | 第45-46页 |
3.3.2 小分子化合物GUS值 | 第46-48页 |
3.4 小分子化合物对Xcc 8004菌体生长的影响 | 第48-49页 |
3.5 小分子化合物的RT-PCR验证 | 第49-50页 |
3.6 小分子化合物的q-RT验证 | 第50-54页 |
3.7 小分子化合物的生防检测 | 第54-55页 |
3.8 过敏反应(HR) | 第55页 |
3.9 小结 | 第55-57页 |
第四章 讨论与展望 | 第57-61页 |
4.1 关于Splitomycin和SB204741对Xcc 8004 Ⅲ分泌系统的影响 | 第57-58页 |
4.2 关于Splitomycin和SB204741对T2SS、T3SS以及看家基因的影响 | 第58-59页 |
4.3 关于Splitomycin和SB204741与蛋白的互作 | 第59页 |
4.4 关于Splitomycin和SB204741致病力和HR的影响 | 第59-60页 |
4.5 后续工作 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第71页 |