| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第12-29页 |
| 1.1 肿瘤耐药性 | 第12-20页 |
| 1.1.1 肿瘤耐药性简介 | 第12-13页 |
| 1.1.2 肿瘤耐药性的机制 | 第13-17页 |
| 1.1.3 多样性耐药机制的应用 | 第17-18页 |
| 1.1.4 肿瘤耐药性的应对对策 | 第18-20页 |
| 1.2 AGR2的功能及机制 | 第20-27页 |
| 1.2.1 AGR2结构与生物学功能 | 第20-24页 |
| 1.2.2 AGR2与肿瘤及肿瘤耐药性 | 第24-27页 |
| 1.3 本课题研究的意义 | 第27-29页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第29-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-37页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第29页 |
| 2.1.2 菌种及质粒 | 第29页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第29-31页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第31-33页 |
| 2.1.5 试剂盒 | 第33页 |
| 2.1.6 主要溶液及配制 | 第33-37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-43页 |
| 2.2.1 慢病毒过表达AGR2核心质粒的构建 | 第37页 |
| 2.2.2 转化Stb13菌株 | 第37页 |
| 2.2.3 慢病毒包装 | 第37-38页 |
| 2.2.4 慢病毒感染BL-7402细胞 | 第38页 |
| 2.2.5 AGR2过表达稳转细胞系的筛选 | 第38页 |
| 2.2.6 乳腺癌细胞培养 | 第38-39页 |
| 2.2.7 肝癌细胞及其耐药细胞的培养 | 第39页 |
| 2.2.8 MTT法检测BL-7402细胞和BL-7402/FU细胞的生存率 | 第39页 |
| 2.2.9 Western Blot实验 | 第39-40页 |
| 2.2.10 细胞免疫荧光 | 第40-41页 |
| 2.2.11 siRNA敲降BL-7402/FU细胞中的AGR2 | 第41页 |
| 2.2.12 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第41页 |
| 2.2.13 TUNEL法检测细胞凋亡 | 第41-43页 |
| 第三章 结果分析 | 第43-54页 |
| 3.1 耐药细胞株的鉴定 | 第44-45页 |
| 3.2 AGR2在不同细胞中的表达检测 | 第45-47页 |
| 3.3 慢病毒构建AGR2过表达的BL-7402细胞系 | 第47-48页 |
| 3.4 过表达AGR2蛋白能提高BL-7402细胞的耐药性 | 第48-49页 |
| 3.5 敲降AGR2蛋白可以降低对BL-7402/FU细胞凋亡能力和增殖的影响 | 第49-51页 |
| 3.6 敲除AGR2对MCF-7细胞药物刺激下凋亡和增殖的影响 | 第51-53页 |
| 3.7 相关信号蛋白的检测 | 第53-54页 |
| 第四章 讨论 | 第54-58页 |
| 4.1 AGR2蛋白在乳腺癌和肝癌细胞中的表达 | 第55页 |
| 4.2 AGR2可以提高药物刺激下细胞的抗凋亡能力和增殖能力 | 第55-56页 |
| 4.3 相关机制的分析及预测 | 第56-58页 |
| 第五章 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
