摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 序言 | 第9-26页 |
1.1 概述 | 第9-10页 |
1.2 甜味感知的生物学基础 | 第10-17页 |
1.2.1 味觉概述 | 第10页 |
1.2.2 甜味感知 | 第10-11页 |
1.2.3 甜味信号关键分子 | 第11-15页 |
1.2.4 甜味识别的信号转导机制 | 第15-17页 |
1.3 肠道中的味觉 | 第17-18页 |
1.4 17β-雌二醇(E2)与甜味感知 | 第18-23页 |
1.4.1 雌激素受体 | 第18-20页 |
1.4.2 雌激素信号转导途径 | 第20-22页 |
1.4.3 雌激素对甜味感知的影响 | 第22-23页 |
1.5 本课题技术路线、研究内容及意义 | 第23-26页 |
1.5.1 实验技术路线 | 第23-24页 |
1.5.2 本课题拟研究的内容 | 第24-25页 |
1.5.3 研究意义 | 第25-26页 |
第二章 17β-雌二醇干预NCI-H716细胞甜味反应的功能性研究 | 第26-42页 |
2.1 引言 | 第26-27页 |
2.2 实验材料 | 第27-28页 |
2.2.1 细胞 | 第27页 |
2.2.2 实验主要试剂、溶液及仪器设备 | 第27-28页 |
2.3 实验设计与方法 | 第28-33页 |
2.3.1 实验设计路线 | 第28页 |
2.3.2 NCI-H716细胞的培养 | 第28-30页 |
2.3.3 NCI-H716细胞胞外ATP及胞内Ca~(2+)的检测 | 第30-32页 |
2.3.4 统计学处理 | 第32-33页 |
2.4 实验结果 | 第33-39页 |
2.4.1 NCI-H716细胞胞外ATP检测 | 第33-35页 |
2.4.2 不同浓度甜味剂刺激对胞外ATP和胞内Ca~(2+)释放的影响 | 第35-36页 |
2.4.3 不同浓度E2对胞外AIP释放的影响 | 第36-37页 |
2.4.4 E2对甜味剂诱导的胞外ATP及胞内Ca~(2+)释放的影响 | 第37-39页 |
2.5 讨论 | 第39-42页 |
第三章 17β-雌二醇干预NCI-H716细胞甜味反应的分子机理研究 | 第42-59页 |
3.1 引言 | 第42页 |
3.2 实验材料 | 第42-45页 |
3.2.1 细胞 | 第42-43页 |
3.2.2 实验主要试剂、溶液及仪器设备 | 第43-45页 |
3.3 实验设计与方法 | 第45-52页 |
3.3.1 实验设计路线 | 第45页 |
3.3.2 NCI-H716细胞的培养 | 第45页 |
3.3.3 实验分组 | 第45-47页 |
3.3.4 qRT-PCR法检测目的基因的表达 | 第47-49页 |
3.3.5 蛋白免疫印迹(Western Blot)检测目的蛋白的表达 | 第49-52页 |
3.3.6 统计学处理 | 第52页 |
3.4 实验结果 | 第52-57页 |
3.4.1 E2干预细胞对甜味信号转导分子mRNA表达的影响 | 第52-54页 |
3.4.2 10nM E2对甜味剂诱导甜味信号转导分子mRNA表达的影响 | 第54-55页 |
3.4.3 10nM E2对甜味剂诱导细胞甜味信号转导分子蛋白表达的影响 | 第55-56页 |
3.4.4 功能验证: 10nM E2对甜味剂诱导细胞胞外ATP释放的影响 | 第56-57页 |
3.5 讨论 | 第57-59页 |
第四章 结论与展望 | 第59-60页 |
4.1 结论 | 第59页 |
4.2 展望 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-71页 |
附录一 缩略词表 | 第71-72页 |
附录二 主要试剂配制 | 第72-75页 |
附录三 qRT-PCR引物序列 | 第75-76页 |
附录四 实时荧光定量PCR扩增和溶解曲线图 | 第76-81页 |
附录五 Western Blot所用抗体 | 第81-82页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第82页 |