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β-桐酸对人绒毛膜癌JEG-3细胞凋亡及迁移的影响

摘要第4-5页
Abstract第5页
第一章 文献综述第9-25页
    1.1 引言第9页
    1.2 共轭亚麻酸第9-13页
        1.2.1 多不饱和脂肪酸第9-10页
        1.2.2 亚麻酸的来源及药用研究第10-11页
        1.2.3 共扼亚麻酸的种类及功能第11页
        1.2.4 共轭亚麻酸的生理活性研究第11-12页
        1.2.5 共轭亚麻酸的应用前景第12-13页
    1.3 细胞凋亡第13-19页
        1.3.1 凋亡途径第13-15页
            1.3.1.1 线粒体途径及调控第13-14页
            1.3.1.2 内质网信号途径及调控第14页
            1.3.1.3 死亡受体途径及调控第14页
            1.3.1.4 其他因素与细胞凋亡的关系第14-15页
        1.3.2 凋亡相关的基因和蛋白第15-17页
        1.3.3 凋亡的检测方法第17-19页
            1.3.3.1 形态学检测第17页
            1.3.3.2 TUNEL法第17-18页
            1.3.3.3 DNA断裂检测第18页
            1.3.3.4 酶联免疫吸附法(ELISA)核小体测定第18页
            1.3.3.5 流式细胞仪定量分析检测第18-19页
            1.3.3.6 线粒体膜势能的检测第19页
    1.4 细胞迁移第19-23页
        1.4.1 细胞迁移的检测方法第20-21页
            1.4.1.1 划痕实验第20页
            1.4.1.2 Transwell实验第20-21页
            1.4.1.3 免疫荧光标记实验第21页
            1.4.1.4 其它检测方法第21页
        1.4.2 细胞迁移相关蛋白第21-22页
        1.4.3 迁移机制的分析方法第22-23页
            1.4.3.1 明胶酶谱实验第23页
            1.4.3.2 迁移相关蛋白检测第23页
    1.5 选题意义第23页
    1.6 研究内容第23-25页
第二章 材料与方法第25-39页
    2.1 实验材料第25-27页
        2.1.1 材料第25-27页
        2.1.2 仪器设备第27页
    2.2 试剂配制第27-29页
        2.2.1 磷酸盐缓冲溶液(PBS)第27-28页
        2.2.2 DMEM高糖细胞培养基第28页
        2.2.3 胰蛋白酶第28页
        2.2.4 Hoechst33342溶液第28页
        2.2.5 蛋白免疫印迹用试剂第28-29页
        2.2.6 Transwell所用试剂第29页
        2.2.7 明胶酶谱法所用试剂第29页
    2.3 实验方法第29-39页
        2.3.1 绒毛膜癌JEG-3细胞的培养第29-30页
        2.3.2 MTT比色法检测细胞活力第30-31页
        2.3.3 Hoechst 33342染色第31-32页
        2.3.4 流式细胞术检测细胞凋亡(Annexin V/PI双染法)第32页
        2.3.5 用LDH(乳酸脱氢酶)释放法检测细胞活力第32-33页
        2.3.6 细胞内ROS水平检测第33-34页
        2.3.7 蛋白免疫印迹第34-36页
        2.3.8 划痕实验第36-37页
        2.3.9 Transwell实验第37页
        2.3.10 明胶酶谱实验第37-38页
        2.3.11 统计分析第38-39页
第三章 结果与讨论第39-50页
    3.1 β-桐酸对人绒毛膜癌JEG-3细胞相对活力的影响第39-41页
        3.1.1 β-桐酸对JEG-3细胞相对活力的抑制作用呈剂量依赖性第39页
        3.1.2 β-桐酸对JEG-3细胞相对活力的抑制作用呈时间依赖性第39-40页
        3.1.3 β-桐酸能促进JEG-3细胞中LDH的释放第40-41页
    3.2 β-桐酸对人绒毛膜癌JEG-3细胞凋亡的影响第41-43页
        3.2.1 β-桐酸作用后JEG-3细胞形态的变化第41-42页
        3.2.2 β-桐酸作用后JEG-3细胞凋亡率的变化第42页
        3.2.3 β-桐酸对JEG-3细胞内凋亡相关蛋白表达的影响第42-43页
    3.3 β-桐酸对人绒毛膜癌JEG-3细胞的凋亡诱导作用机制探讨第43-47页
        3.3.1 β-桐酸上调JEG-3细胞内P-p38MAPK及PPARγ的表达水平第43-44页
        3.3.2 抑制剂SB203580及T0070907拮抗β-桐酸引起的JEG-3细胞内LDH的释放第44页
        3.3.3 抑制剂SB203580及T0070907拮抗β-桐酸引起的JEG-3细胞形态学变化第44-45页
        3.3.4 抑制剂SB203580和T0070907拮抗β-桐酸诱导的JEG-3细胞内Caspase-3/9、Bax、Bcl-2表达的上调第45-46页
        3.3.5 p38MAPK的磷酸化调控PPARy和p53的活化第46-47页
    3.4 β-桐酸对绒毛膜癌JEG-3细胞迁移的影响第47-49页
        3.4.1 β-桐酸影响JEG-3细胞划痕愈合第47-48页
        3.4.2 β-桐酸影响JEG-3细胞的迁移作用第48页
        3.4.3 β-桐酸抑制JEG-3细胞分泌基质金属蛋白酶第48-49页
    3.5 讨论第49-50页
第四章 结论第50-51页
参考文献第51-55页
致谢第55页

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