摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第一章 文献综述 | 第9-25页 |
1.1 引言 | 第9页 |
1.2 共轭亚麻酸 | 第9-13页 |
1.2.1 多不饱和脂肪酸 | 第9-10页 |
1.2.2 亚麻酸的来源及药用研究 | 第10-11页 |
1.2.3 共扼亚麻酸的种类及功能 | 第11页 |
1.2.4 共轭亚麻酸的生理活性研究 | 第11-12页 |
1.2.5 共轭亚麻酸的应用前景 | 第12-13页 |
1.3 细胞凋亡 | 第13-19页 |
1.3.1 凋亡途径 | 第13-15页 |
1.3.1.1 线粒体途径及调控 | 第13-14页 |
1.3.1.2 内质网信号途径及调控 | 第14页 |
1.3.1.3 死亡受体途径及调控 | 第14页 |
1.3.1.4 其他因素与细胞凋亡的关系 | 第14-15页 |
1.3.2 凋亡相关的基因和蛋白 | 第15-17页 |
1.3.3 凋亡的检测方法 | 第17-19页 |
1.3.3.1 形态学检测 | 第17页 |
1.3.3.2 TUNEL法 | 第17-18页 |
1.3.3.3 DNA断裂检测 | 第18页 |
1.3.3.4 酶联免疫吸附法(ELISA)核小体测定 | 第18页 |
1.3.3.5 流式细胞仪定量分析检测 | 第18-19页 |
1.3.3.6 线粒体膜势能的检测 | 第19页 |
1.4 细胞迁移 | 第19-23页 |
1.4.1 细胞迁移的检测方法 | 第20-21页 |
1.4.1.1 划痕实验 | 第20页 |
1.4.1.2 Transwell实验 | 第20-21页 |
1.4.1.3 免疫荧光标记实验 | 第21页 |
1.4.1.4 其它检测方法 | 第21页 |
1.4.2 细胞迁移相关蛋白 | 第21-22页 |
1.4.3 迁移机制的分析方法 | 第22-23页 |
1.4.3.1 明胶酶谱实验 | 第23页 |
1.4.3.2 迁移相关蛋白检测 | 第23页 |
1.5 选题意义 | 第23页 |
1.6 研究内容 | 第23-25页 |
第二章 材料与方法 | 第25-39页 |
2.1 实验材料 | 第25-27页 |
2.1.1 材料 | 第25-27页 |
2.1.2 仪器设备 | 第27页 |
2.2 试剂配制 | 第27-29页 |
2.2.1 磷酸盐缓冲溶液(PBS) | 第27-28页 |
2.2.2 DMEM高糖细胞培养基 | 第28页 |
2.2.3 胰蛋白酶 | 第28页 |
2.2.4 Hoechst33342溶液 | 第28页 |
2.2.5 蛋白免疫印迹用试剂 | 第28-29页 |
2.2.6 Transwell所用试剂 | 第29页 |
2.2.7 明胶酶谱法所用试剂 | 第29页 |
2.3 实验方法 | 第29-39页 |
2.3.1 绒毛膜癌JEG-3细胞的培养 | 第29-30页 |
2.3.2 MTT比色法检测细胞活力 | 第30-31页 |
2.3.3 Hoechst 33342染色 | 第31-32页 |
2.3.4 流式细胞术检测细胞凋亡(Annexin V/PI双染法) | 第32页 |
2.3.5 用LDH(乳酸脱氢酶)释放法检测细胞活力 | 第32-33页 |
2.3.6 细胞内ROS水平检测 | 第33-34页 |
2.3.7 蛋白免疫印迹 | 第34-36页 |
2.3.8 划痕实验 | 第36-37页 |
2.3.9 Transwell实验 | 第37页 |
2.3.10 明胶酶谱实验 | 第37-38页 |
2.3.11 统计分析 | 第38-39页 |
第三章 结果与讨论 | 第39-50页 |
3.1 β-桐酸对人绒毛膜癌JEG-3细胞相对活力的影响 | 第39-41页 |
3.1.1 β-桐酸对JEG-3细胞相对活力的抑制作用呈剂量依赖性 | 第39页 |
3.1.2 β-桐酸对JEG-3细胞相对活力的抑制作用呈时间依赖性 | 第39-40页 |
3.1.3 β-桐酸能促进JEG-3细胞中LDH的释放 | 第40-41页 |
3.2 β-桐酸对人绒毛膜癌JEG-3细胞凋亡的影响 | 第41-43页 |
3.2.1 β-桐酸作用后JEG-3细胞形态的变化 | 第41-42页 |
3.2.2 β-桐酸作用后JEG-3细胞凋亡率的变化 | 第42页 |
3.2.3 β-桐酸对JEG-3细胞内凋亡相关蛋白表达的影响 | 第42-43页 |
3.3 β-桐酸对人绒毛膜癌JEG-3细胞的凋亡诱导作用机制探讨 | 第43-47页 |
3.3.1 β-桐酸上调JEG-3细胞内P-p38MAPK及PPARγ的表达水平 | 第43-44页 |
3.3.2 抑制剂SB203580及T0070907拮抗β-桐酸引起的JEG-3细胞内LDH的释放 | 第44页 |
3.3.3 抑制剂SB203580及T0070907拮抗β-桐酸引起的JEG-3细胞形态学变化 | 第44-45页 |
3.3.4 抑制剂SB203580和T0070907拮抗β-桐酸诱导的JEG-3细胞内Caspase-3/9、Bax、Bcl-2表达的上调 | 第45-46页 |
3.3.5 p38MAPK的磷酸化调控PPARy和p53的活化 | 第46-47页 |
3.4 β-桐酸对绒毛膜癌JEG-3细胞迁移的影响 | 第47-49页 |
3.4.1 β-桐酸影响JEG-3细胞划痕愈合 | 第47-48页 |
3.4.2 β-桐酸影响JEG-3细胞的迁移作用 | 第48页 |
3.4.3 β-桐酸抑制JEG-3细胞分泌基质金属蛋白酶 | 第48-49页 |
3.5 讨论 | 第49-50页 |
第四章 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
致谢 | 第55页 |