| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 微藻简介 | 第10-15页 |
| 1.1.1 微藻生物质应用广泛 | 第10-11页 |
| 1.1.2 微藻作为生物能源的优势 | 第11页 |
| 1.1.3 微藻光合固碳途径 | 第11-12页 |
| 1.1.4 微藻TAG合成途径 | 第12-14页 |
| 1.1.5 提高微藻TAG合成的方法 | 第14-15页 |
| 1.2 莱茵衣藻简介 | 第15-16页 |
| 1.2.1 莱茵衣藻 | 第15页 |
| 1.2.2 莱茵衣藻表达载体 | 第15-16页 |
| 1.3 PDAT研究简介 | 第16-17页 |
| 1.4 论文目标与研究思路 | 第17-18页 |
| 第二章 不同表达系统的莱茵衣藻转化株构建 | 第18-28页 |
| 2.1 引言 | 第18页 |
| 2.2 实验材料 | 第18-21页 |
| 2.2.1 藻株及质粒介绍 | 第18-19页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.2.3 引物 | 第20页 |
| 2.2.4 实验试剂及溶液配制 | 第20-21页 |
| 2.2.4.1 试剂 | 第20页 |
| 2.2.4.2 溶液配制 | 第20-21页 |
| 2.3 实验方法 | 第21-24页 |
| 2.3.1 重组质粒的构建 | 第21-22页 |
| 2.3.2 pChlamy_1-ScPDAT重组质粒构建 | 第22页 |
| 2.3.3 pChlamy_3系列重组质粒构建 | 第22-23页 |
| 2.3.4 重组质粒转化及转化藻株筛选 | 第23页 |
| 2.3.5 转化藻株平板培养 | 第23页 |
| 2.3.6 Westernblot验证 | 第23-24页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第24-27页 |
| 2.4.1 质粒构建PCR结果 | 第24页 |
| 2.4.2 转化藻株的初步筛选 | 第24-25页 |
| 2.4.3 转化藻株的PCR验证 | 第25-26页 |
| 2.4.4 转化藻株平板培养结果 | 第26页 |
| 2.4.5 转化藻株的Westernblot验证 | 第26-27页 |
| 2.5 讨论 | 第27页 |
| 2.6 本章小结 | 第27-28页 |
| 第三章 GAP3对莱茵衣藻储能物质积累的影响 | 第28-44页 |
| 3.1 前言 | 第28页 |
| 3.2 实验材料 | 第28-29页 |
| 3.2.1 藻株 | 第28页 |
| 3.2.2 试剂 | 第28-29页 |
| 3.3 实验方法 | 第29-31页 |
| 3.3.1 藻株的培养 | 第29-30页 |
| 3.3.1.1 正常TAP摇瓶培养 | 第29页 |
| 3.3.1.2 正常TAP反应器培养 | 第29页 |
| 3.3.1.3 HS培养基摇瓶培养 | 第29-30页 |
| 3.3.2 细胞生长的测定 | 第30页 |
| 3.3.3 叶绿素荧光的测定 | 第30页 |
| 3.3.4 Westernblot验证 | 第30页 |
| 3.3.5 碳水化合物含量测定 | 第30页 |
| 3.3.6 蛋白含量测定 | 第30-31页 |
| 3.3.7 脂肪酸含量测定 | 第31页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第31-42页 |
| 3.4.1 正常TAP摇瓶培养结果与分析 | 第31-40页 |
| 3.4.1.1 GAP3过表达对莱茵衣藻生长的影响 | 第31-32页 |
| 3.4.1.2 GAP3过表达对莱茵衣藻光合效率的影响 | 第32-33页 |
| 3.4.1.3 pChlamy_1-GAP3中的GAP3蛋白表达 | 第33页 |
| 3.4.1.4 GAP3过表达对莱茵衣藻碳水化合物含量的影响 | 第33-34页 |
| 3.4.1.5 GAP3过表达对莱茵衣藻脂肪酸含量的影响 | 第34-36页 |
| 3.4.1.6 GAP3过表达对莱茵衣藻储能物质生产的影响 | 第36-40页 |
| 3.4.2 正常TAP反应器培养结果与分析 | 第40-41页 |
| 3.4.2.1 GAP3和WT的生长的测定 | 第40页 |
| 3.4.2.2 GAP3和WT的叶绿素荧光和总蛋白含量 | 第40-41页 |
| 3.4.3 HS培养基摇瓶培养结果与分析 | 第41-42页 |
| 3.5 讨论 | 第42-43页 |
| 3.6 本章小结 | 第43-44页 |
| 第四章 ScPDAT对莱茵衣藻的生长与脂类代谢影响 | 第44-54页 |
| 4.1 前言 | 第44页 |
| 4.2 实验材料 | 第44页 |
| 4.2.1 藻株 | 第44页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第44页 |
| 4.3 实验方法 | 第44-46页 |
| 4.3.1 藻株的培养 | 第44-45页 |
| 4.3.2 细胞生长测定 | 第45页 |
| 4.3.3 叶绿素荧光测定 | 第45页 |
| 4.3.4 Westernblot蛋白表达验证 | 第45页 |
| 4.3.5 脂肪酸测定 | 第45页 |
| 4.3.6 脂质的提取 | 第45-46页 |
| 4.4 实验结果与分析 | 第46-52页 |
| 4.4.1 Scpdat和WT生长曲线与ScPDAT蛋白表达 | 第46页 |
| 4.4.2 Scpdat和WT的叶绿素荧光 | 第46-47页 |
| 4.4.3 脂肪酸和脂质含量分析 | 第47-52页 |
| 4.5 讨论 | 第52-53页 |
| 4.6 本章小结 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 附录 | 第60-63页 |
