| 中文摘要 | 第20-24页 |
| ABSTRACT | 第24-29页 |
| 第一章 综述 | 第30-44页 |
| 1 中心蛋白的发现 | 第30-31页 |
| 2 中心蛋白的生物功能 | 第31-33页 |
| 3 中心蛋白的结构及Ca~(2+)结合性质 | 第33-36页 |
| 3.1 中心蛋白的结构 | 第33页 |
| 3.2 Ca~(2+)结合性质 | 第33-36页 |
| 4 靶肽的结合 | 第36-42页 |
| 4.1 中心蛋白的靶肽 | 第36-41页 |
| 4.2 结合模式 | 第41页 |
| 4.3 靶肽结合的表征手段 | 第41-42页 |
| 5 中心蛋白的聚集 | 第42-43页 |
| 6 本课题研究的意义 | 第43-44页 |
| 第二章 中心蛋白与XPC的结合性质 | 第44-64页 |
| 1 引言 | 第44页 |
| 2 材料 | 第44-45页 |
| 2.1 主要试剂 | 第44-45页 |
| 2.2 主要仪器 | 第45页 |
| 3 方法 | 第45-48页 |
| 3.1 蛋白的表达纯化与鉴定 | 第45页 |
| 3.2 XPC多肽的合成 | 第45页 |
| 3.3 蛋白浓度的测定 | 第45-46页 |
| 3.4 紫外可见吸收的测定 | 第46页 |
| 3.5 荧光发射光谱的测定 | 第46页 |
| 3.6 中心蛋白与XPC肽结合常数的计算 | 第46-47页 |
| 3.7 非变性凝胶电泳 | 第47页 |
| 3.8 等温滴定量热法 | 第47-48页 |
| 3.9 远紫外圆二色谱 | 第48页 |
| 4 实验结果 | 第48-60页 |
| 4.1 靶肽中色氨酸微环境的变化 | 第48-52页 |
| 4.2 复合物新带的产生 | 第52-56页 |
| 4.3 XPC肽对中心蛋白的高亲和性 | 第56-58页 |
| 4.4 XPC肽的构象变化 | 第58-60页 |
| 4.5 C端loop区是不参与反应的区域 | 第60页 |
| 5 讨论 | 第60-63页 |
| 6 结论 | 第63-64页 |
| 第三章 XPC肽调控EoCen的Tb~(3+)结合性质 | 第64-84页 |
| 1 引言 | 第64-65页 |
| 2 材料 | 第65页 |
| 2.1 主要试剂 | 第65页 |
| 2.2 主要仪器 | 第65页 |
| 3 方法 | 第65-69页 |
| 3.1 蛋白的表达纯化与鉴定 | 第65-66页 |
| 3.2 XPC多肽的合成 | 第66页 |
| 3.3 蛋白浓度的测定 | 第66页 |
| 3.4 Tb~(3+)储备液的配制 | 第66页 |
| 3.5 Ca~(2+)储备液的配制 | 第66页 |
| 3.6 荧光发射光谱的测定 | 第66页 |
| 3.7 中心蛋白与XPC肽结合常数的计算 | 第66-67页 |
| 3.8 非变性凝胶电泳 | 第67页 |
| 3.9 等温滴定量热法 | 第67页 |
| 3.10 共振光散射 | 第67页 |
| 3.11 芳香氨基酸敏化Tb~(3+)发射 | 第67页 |
| 3.12 Tb~(3+)结合常数的计算 | 第67-69页 |
| 4 实验结果 | 第69-79页 |
| 4.1 金属离子对靶肽结合的弱增强作用 | 第69-77页 |
| 4.2 靶肽对Tb~(3+)结合的调控 | 第77-79页 |
| 5 讨论 | 第79-82页 |
| 6 结论 | 第82-84页 |
| 第四章 EoCen的聚集与靶肽识别 | 第84-110页 |
| 第一节 EoCen与Δ23EoCen性质比较 | 第84-94页 |
| 1 引言 | 第84页 |
| 2 材料 | 第84-85页 |
| 2.1 主要试剂 | 第84-85页 |
| 2.2 主要仪器 | 第85页 |
| 3 方法 | 第85-86页 |
| 3.1 蛋白的表达纯化与鉴定 | 第85页 |
| 3.2 XPC多肽的合成 | 第85页 |
| 3.3 蛋白浓度的测定 | 第85-86页 |
| 3.4 Tb~(3+)储备液的配制 | 第86页 |
| 3.5 Ca~(2+)储备液的配制 | 第86页 |
| 3.6 荧光发射光谱的测定 | 第86页 |
| 3.7 非变性凝胶电泳 | 第86页 |
| 3.9 等温滴定量热法 | 第86页 |
| 3.10 共振光散射 | 第86页 |
| 3.11 芳香氨基酸敏化Tb~(3+)发射 | 第86页 |
| 4 实验结果 | 第86-92页 |
| 4.1 XPC肽结合性质的相似性 | 第86-89页 |
| 4.2 聚集性质的差异 | 第89-91页 |
| 4.3 Tb~(3+)结合性质的比较 | 第91-92页 |
| 4.4 尿素诱导蛋白稳定性的比较 | 第92页 |
| 5 讨论 | 第92-93页 |
| 6 结论 | 第93-94页 |
| 第二节 中心蛋白的聚集与靶识别 | 第94-110页 |
| 1 引言 | 第94页 |
| 2 材料 | 第94-95页 |
| 2.1 主要试剂 | 第94-95页 |
| 2.2 主要仪器 | 第95页 |
| 3 方法 | 第95-97页 |
| 3.1 蛋白的表达纯化与鉴定 | 第95-96页 |
| 3.2 N-23肽的合成及溶液配制 | 第96页 |
| 3.3 Tb~(3+)储备液的配制 | 第96页 |
| 3.5 荧光发射光谱的测定 | 第96页 |
| 3.6 非变性凝胶电泳 | 第96页 |
| 3.7 蛋白化学交联分析 | 第96页 |
| 3.8 等温滴定量热法 | 第96-97页 |
| 3.9 共振光散射 | 第97页 |
| 3.10 芳香氨基酸敏化Tb~(3+)发射 | 第97页 |
| 4 实验结果 | 第97-107页 |
| 4.1 RLS检测蛋白的聚集 | 第97-99页 |
| 4.2 native PAGE检测蛋白与N-23的关系 | 第99-100页 |
| 4.3 化学交联分析 | 第100-103页 |
| 4.4 ITC | 第103-104页 |
| 4.5 交联后与靶肽结合力下降 | 第104页 |
| 4.6 靶肽结合对Tb~(3+)诱导聚集的抑制 | 第104-107页 |
| 5 讨论 | 第107-108页 |
| 6 结论 | 第108-110页 |
| 第五章 蛋白稳定性研究 | 第110-130页 |
| 第一节 尿素诱导EoCen-XPC的解折叠 | 第110-119页 |
| 1 引言 | 第110页 |
| 2 结构基元模型 | 第110-112页 |
| 3 材料 | 第112-113页 |
| 3.1 主要试剂 | 第112页 |
| 3.2 主要仪器 | 第112-113页 |
| 4 方法 | 第113页 |
| 4.1 蛋白与XPC肽的表达纯化与鉴定 | 第113页 |
| 4.2 尿素浓度确定 | 第113页 |
| 4.3 荧光光谱的测定 | 第113页 |
| 4.4 变性数据分析 | 第113页 |
| 5 实验结果 | 第113-117页 |
| 5.1 尿素对复合物荧光光谱的影响 | 第113-115页 |
| 5.2 尿素诱导复合物的解折叠 | 第115-117页 |
| 6 讨论 | 第117-118页 |
| 7 结论 | 第118-119页 |
| 第二节 Tb(Ⅲ)对盐酸胍诱导中心蛋白解折叠的影响 | 第119-130页 |
| 1 引言 | 第119-120页 |
| 2 材料 | 第120页 |
| 2.1 主要试剂 | 第120页 |
| 2.2 主要仪器 | 第120页 |
| 3 实验方法 | 第120-122页 |
| 3.1 蛋白的表达纯化与鉴定 | 第120页 |
| 3.2 Tb~(3+)储备液的配制 | 第120页 |
| 3.3 Tb~(3+)敏化发射 | 第120-121页 |
| 3.4 荧光光谱 | 第121页 |
| 3.5 远紫外圆二色检测 | 第121页 |
| 3.6 荧光寿命检测 | 第121页 |
| 3.7 共振光散射 | 第121页 |
| 3.8 盐酸胍浓度的确定 | 第121-122页 |
| 3.9 化学变性实验 | 第122页 |
| 3.10 变性数据分析 | 第122页 |
| 4 实验结果 | 第122-128页 |
| 4.1 EoCen与G115W的固有荧光与Tb~(3+)结合性质 | 第122-123页 |
| 4.2 盐酸胍对G115W性质的影响 | 第123-126页 |
| 4.3 盐酸胍诱导apoG115W与holoG115W解折叠 | 第126-128页 |
| 5 讨论 | 第128-129页 |
| 6 结论 | 第129-130页 |
| 第六章 总结与展望 | 第130-134页 |
| 1 引言 | 第130页 |
| 2 工作总结 | 第130-133页 |
| 3 工作展望 | 第133-134页 |
| 参考文献 | 第134-154页 |
| 略语表 | 第154-156页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第156-158页 |
| 致谢 | 第158-159页 |
| 个人简况及联系方式 | 第159页 |
