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镉干扰脂代谢转运蛋白表达及其抑制自噬的细胞毒性机制

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第一章 绪论第10-21页
    1.1 镉的概述第10-11页
        1.1.1 镉的性质特征与分布第10页
        1.1.2 镉的工业应用和特点第10-11页
    1.2 镉污染的概况第11-12页
        1.2.1 对大气的污染第11页
        1.2.2 对水体的污染第11页
        1.2.3 对土壤的污染第11-12页
    1.3 镉对人体的危害第12-15页
        1.3.1 对肝脏的危害第12-13页
        1.3.2 对肾脏的危害第13页
        1.3.3 对心血管系统的影响第13-14页
        1.3.4 对脂代谢的影响第14-15页
    1.4 镉生物毒性的作用机制第15-18页
        1.4.1 氧化损伤第15-16页
        1.4.2 钙稳态以及内质网应激第16-17页
        1.4.3 自噬第17-18页
    1.5 ABCA1蛋白第18-19页
        1.5.1 结构第18页
        1.5.2 功能与调节第18-19页
    1.6 研究背景及意义第19-21页
第二章 镉中毒小鼠脂代谢转运蛋白表达的检测第21-38页
    2.1 实验材料第21-22页
    2.2 实验方法和步骤第22-30页
        2.2.1 镉对脂代谢相关基因mRNA表达影响的检测第22-26页
        2.2.2 镉对脂代谢转运蛋白表达影响的检测第26-30页
            2.2.2.1 小鼠肝脏组织中蛋白表达的测定第26-29页
            2.2.2.2 原代小鼠肝细胞中蛋白表达的测定第29-30页
            2.2.2.3 HepG2细胞中蛋白表达的测定第30页
    2.3 实验结果第30-36页
        2.3.1 脂代谢相关基因mRNA表达的结果第30-33页
        2.3.2 脂代谢转运蛋白表达的结果第33-36页
            2.3.2.1 小鼠肝脏组织中蛋白的表达情况第34页
            2.3.2.2 原代小鼠肝细胞中蛋白的表达情况第34-35页
            2.3.2.3 HepG2细胞中蛋白的表达情况第35-36页
    2.4 讨论与小结第36-38页
第三章 镉促进HepG2中ABCA1蛋白增加的分子机制第38-49页
    3.1 实验材料第38-39页
    3.2 实验方法和步骤第39-43页
        3.2.1 镉处理HepG2细胞ABCA1mRNA水平检测第39-41页
        3.2.2 WesternBlotting检测镉处理HepG2细胞ABCA1蛋白表达第41页
        3.2.3 免疫荧光检测镉处理后HepG2细胞ABCA1蛋白表达第41-42页
        3.2.4 镉处理HepG2细胞ABCA1蛋白半衰期检测第42页
        3.2.5 镉处理HepG2细胞ABCA1降解途径的确定第42-43页
        3.2.6 Ca~(2+)对镉处理HepG2细胞ABCA1降解的影响第43页
    3.3 实验结果第43-47页
        3.3.1 镉诱导ABCA1蛋白表达增加第43-44页
        3.3.2 镉诱导ABCA1稳定性增强第44-45页
        3.3.3 镉抑制ABCA1蛋白溶酶体途径的降解第45-46页
        3.3.4 Ca~(2+)对镉抑制ABCA1蛋白降解的影响第46-47页
    3.4 讨论与小结第47-49页
第四章 镉破坏细胞溶酶体酸性抑制其降解功能第49-55页
    4.1 实验材料第49-50页
    4.2 实验方法和步骤第50-51页
        4.2.1 镉和抑制剂共处理HepG2细胞溶酶体酸性的检测第50-51页
        4.2.2 镉和抑制剂共处理HepG2细胞ABCA1蛋白表达的检测第51页
    4.3 实验结果第51-53页
        4.3.1 镉改变溶酶体酸性抑制ABCA1降解第51-53页
    4.4 讨论与小结第53-55页
第五章 镉通过Ca~(2+)和ROS途径抑制溶酶体降解及自噬第55-64页
    5.1 实验材料第55-56页
    5.2 实验方法和步骤第56-59页
        5.2.1 Ca~(2+)和ROS对镉影响HepG2细胞溶酶体功能的检测第56-57页
            5.2.1.1 Ca~(2+)和ROS对HepG2细胞溶酶体酸性影响的检测第56-57页
            5.2.1.2 Ca~(2+)和ROS对HepG2细胞溶酶体降解影响的检测第57页
        5.2.2 镉对HepG2细胞自噬影响的检测第57页
        5.2.3 镉对mRTEC细胞自噬和凋亡影响的检测第57-58页
        5.2.4 ROS对mRTEC细胞凋亡及自噬影响的检测第58页
        5.2.5 镉对mRTEC细胞内钙离子水平影响的检测第58页
        5.2.6 Ca~(2+)对镉诱导mRTEC细胞凋亡影响的检测第58-59页
    5.3 实验结果第59-63页
        5.3.1 镉通过Ca~(2+)和ROS途径抑制HepG2细胞溶酶体降解第59-60页
        5.3.2 镉抑制HepG2细胞自噬第60-61页
        5.3.3 镉抑制mRTEC细胞自噬、诱导凋亡第61-63页
    5.4 讨论与小结第63-64页
第六章 结论与展望第64-66页
    6.1 结论第64-65页
    6.2 展望第65-66页
参考文献第66-72页
致谢第72-73页
在学期间的学术成果第73页
参加课题第73页

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