摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
缩略语表 | 第11-13页 |
第一篇 文献综述 | 第13-39页 |
第一章 猪瘟病毒(CSFV)入胞机制的研究进展 | 第13-19页 |
1 猪瘟病毒 | 第13-14页 |
1.1 病毒结构 | 第13-14页 |
1.2 细胞培养 | 第14页 |
2 配体 | 第14-15页 |
3 受体 | 第15-16页 |
4 病毒入胞机制 | 第16-19页 |
第二章 猪瘟病毒分子流行病学的研究进展 | 第19-29页 |
1 CSFV分型及传播 | 第19-20页 |
1.1 分型 | 第19-20页 |
1.2 宿主及传播 | 第20页 |
2 CSFV流行病学 | 第20-22页 |
2.1 全球流行状况 | 第20-22页 |
2.2 我国流行状况 | 第22页 |
3 CSFV分子流行病学 | 第22-26页 |
3.1 世界主要地区 | 第22页 |
3.2 我国主要地区 | 第22-26页 |
4 CSFV变异进化与疫苗保护 | 第26-29页 |
参考文献 | 第29-39页 |
第二篇 研究内容 | 第39-93页 |
第一章 小分子抑制剂影响CSFV增殖的研究 | 第39-57页 |
1 材料与方法 | 第40-45页 |
1.1 毒株和细胞 | 第40页 |
1.2 主试剂 | 第40页 |
1.3 主要仪器设备 | 第40-41页 |
1.4 细胞培养 | 第41页 |
1.5 药物细胞毒性测定 | 第41-42页 |
1.6 药物对病毒增殖的影响 | 第42页 |
1.7 吖啶橙染色 | 第42-43页 |
1.8 Chlorpromazine或dynasore对细胞摄取Tfn的影响 | 第43页 |
1.9 病毒RNA提取与RT-qPCR | 第43-44页 |
1.10 统计分析 | 第44-45页 |
2 结果与分析 | 第45-51页 |
2.1 CSFV入胞与酸性pH | 第45-47页 |
2.2 CSFV入胞和出芽与细胞膜胆固醇 | 第47-49页 |
2.3 Chlorpromazine和dynasore对病毒入胞的影响 | 第49-51页 |
3 讨论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
第二章 猪瘟病毒通过网格蛋白介导的内吞途径进入PK-15细胞 | 第57-73页 |
1 材料与方法 | 第58-62页 |
1.1 毒株、细胞和质粒 | 第58页 |
1.2 主要试剂、抗体和siRNA | 第58-59页 |
1.3 主要仪器设备 | 第59页 |
1.4 去内毒素提质粒 | 第59页 |
1.5 过表达4个质粒对细胞摄取Tfn的影响 | 第59-60页 |
1.6 IFA | 第60页 |
1.7 RT-qPCR | 第60页 |
1.8 干扰网格蛋白对细胞摄取Tfn的影响 | 第60-61页 |
1.9 免疫印记(Western Blotting) | 第61页 |
1.10 干扰网格蛋白对病毒感染的影响 | 第61页 |
1.11 激光共聚焦 | 第61-62页 |
2 结果与分析 | 第62-67页 |
2.1 CSFV入胞与EPS 15蛋白 | 第62-64页 |
2.2 CSFV入胞与dynamin | 第64-65页 |
2.3 CSFV入胞与网格蛋白 | 第65-67页 |
3 讨论 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-73页 |
第三章 华东部分地区CSFV分子流行病学调查 | 第73-93页 |
1 材料与方法 | 第74-77页 |
1.1 病料、菌种和细胞 | 第74页 |
1.2 主要试剂 | 第74页 |
1.3 主要仪器设备 | 第74页 |
1.4 引物设计与合成 | 第74-75页 |
1.5 病毒RNA提取及RT-PCR | 第75-76页 |
1.6 CSFV流行毒株的分离与培养 | 第76页 |
1.7 基因克隆及测序 | 第76-77页 |
2 结果与分析 | 第77-85页 |
2.1 基于5'-NTR、E2和NS5B部分片段的进化分析 | 第77-80页 |
2.2 基于E2全长基因的系统进化分析 | 第80-82页 |
2.3 流行毒株与疫苗毒株间E2蛋白的变异进化分析 | 第82-85页 |
3 讨论 | 第85-88页 |
参考文献 | 第88-93页 |
全文总结 | 第93-95页 |
致谢 | 第95-97页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第97页 |