摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
符号说明 | 第11-12页 |
第一章 绪论 | 第12-24页 |
1 细胞饥饿 | 第12-14页 |
1.1 血清饥饿 | 第12-13页 |
1.2 氨基酸饥饿 | 第13页 |
1.3 碳源饥饿 | 第13页 |
1.4 动物水平饥饿 | 第13-14页 |
2 碳源饥饿 | 第14-18页 |
2.1 正常细胞的能量代谢特点及意义 | 第14-15页 |
2.2 恶性肿瘤细胞的能量代谢特点及意义 | 第15-17页 |
2.3 碳源饥饿与癌症治疗 | 第17-18页 |
3 细胞凋亡 | 第18-22页 |
3.1 细胞凋亡的概念 | 第18页 |
3.2 细胞凋亡的特征 | 第18-19页 |
3.3 细胞凋亡的信号通路 | 第19-21页 |
3.4 细胞凋亡的检测方法 | 第21-22页 |
3.5 细胞凋亡与癌症的关系 | 第22页 |
4 本课题研究的目的及意义 | 第22-24页 |
第二章 碳源饥饿对HeLa细胞增殖的影响 | 第24-31页 |
1 引言 | 第24页 |
2 实验材料、试剂与仪器 | 第24-25页 |
2.1 材料与试剂 | 第24页 |
2.2 主要仪器 | 第24-25页 |
3 实验方法 | 第25-27页 |
3.1 主要溶液配制 | 第25页 |
3.2 细胞复苏、传代及冻存 | 第25-26页 |
3.3 细胞培养 | 第26页 |
3.4 MTT法筛选碳源饥饿的最适葡萄糖浓度 | 第26页 |
3.5 MTT法检测细胞活力 | 第26页 |
3.6 细胞计数法 | 第26-27页 |
3.7 统计方法 | 第27页 |
4 实验结果 | 第27-30页 |
4.1 碳源饥饿最适葡萄糖浓度的筛选结果 | 第27页 |
4.2 碳源饥饿抑制细胞的活力 | 第27-28页 |
4.3 碳源饥饿对细胞增殖数量的影响 | 第28-30页 |
5 讨论 | 第30-31页 |
第三章 碳源饥饿对HeLa细胞形态与结构的影响 | 第31-41页 |
1 引言 | 第31页 |
2 实验材料、试剂与仪器 | 第31-32页 |
2.1 材料与试剂 | 第31页 |
2.2 主要仪器 | 第31-32页 |
3 实验方法 | 第32页 |
3.1 细胞培养 | 第32页 |
3.2 倒置显微镜观察细胞形态 | 第32页 |
3.3 扫描电子显微镜观察细胞表面超微结构 | 第32页 |
3.4 激光共聚焦扫描显微镜观察细胞骨架 | 第32页 |
4 实验结果 | 第32-39页 |
4.1 碳源饥饿对HeLa细胞形态的影响 | 第32-34页 |
4.2 碳源饥饿对HeLa细胞表面超微结构的影响 | 第34-36页 |
4.3 碳源饥饿对HeLa细胞微管分布的影响 | 第36-37页 |
4.4 碳源饥饿对HeLa细胞微丝分布的影响 | 第37-39页 |
5 讨论 | 第39-41页 |
第四章 碳源饥饿对HeLa细胞核形态与结构的影响 | 第41-48页 |
1 引言 | 第41页 |
2 实验材料、试剂与仪器 | 第41页 |
2.1 材料与试剂 | 第41页 |
2.2 主要仪器 | 第41页 |
3 实验方法 | 第41-43页 |
3.1 主要溶液配制 | 第41-42页 |
3.2 细胞培养 | 第42页 |
3.3 吖啶橙/溴化乙锭双重荧光染色观察核染色质分布 | 第42页 |
3.4 单细胞凝胶电泳检测DNA损伤 | 第42-43页 |
3.5 免疫荧光染色观察核纤层蛋白分布 | 第43页 |
4 结果 | 第43-46页 |
4.1 碳源饥饿对HeLa细胞核染色质分布的影响 | 第43-44页 |
4.2 碳源饥饿对HeLa细胞核DNA损伤的影响 | 第44-45页 |
4.3 碳源饥饿对HeLa细胞核纤层蛋白分布的影响 | 第45-46页 |
5 讨论 | 第46-48页 |
第五章 碳源饥饿诱导HeLa细胞凋亡的分子机制 | 第48-56页 |
1 引言 | 第48页 |
2 实验材料、试剂与仪器 | 第48-49页 |
2.1 材料与试剂 | 第48页 |
2.2 主要仪器 | 第48-49页 |
3 实验方法 | 第49-50页 |
3.1 主要溶液配制 | 第49页 |
3.2 细胞培养 | 第49页 |
3.3 蛋白质的提取 | 第49页 |
3.4 免疫荧光观察细胞凋亡相关蛋白的分布 | 第49页 |
3.5 Western Blot检测细胞凋亡相关蛋白的表达量 | 第49-50页 |
4 结果 | 第50-54页 |
4.1 碳源饥饿对HeLa细胞凋亡相关蛋白分布的影响 | 第50-53页 |
4.2 碳源饥饿对HeLa细胞凋亡相关蛋白表达量的影响 | 第53-54页 |
5 讨论 | 第54-56页 |
第六章 结论与展望 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
附录A | 第62-64页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-67页 |