| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-17页 |
| 1.1 课题来源及研究背景和意义 | 第10-11页 |
| 1.2 国内外在该方向的研究现状及分析 | 第11-15页 |
| 1.2.1 国内外研究现状 | 第11-14页 |
| 1.2.2 国内外文献综述的简析 | 第14-15页 |
| 1.3 主要研究内容 | 第15-16页 |
| 1.3.1 膀胱癌中iASPP蛋白及mRNA表达水平研究 | 第15页 |
| 1.3.2 iASPP对膀胱癌细胞化疗耐药的影响 | 第15页 |
| 1.3.3 iASPP调控膀胱癌耐药分子机制的研究 | 第15-16页 |
| 1.4 技术路线图 | 第16-17页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第17-33页 |
| 2.1 实验材料试剂 | 第17-21页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第17页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第17-20页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法和步骤 | 第21-33页 |
| 2.2.1 载体构建 | 第21-22页 |
| 2.2.2 质粒提取 | 第22-23页 |
| 2.2.3 细胞的复苏 | 第23页 |
| 2.2.4 细胞传代培养 | 第23-24页 |
| 2.2.5 细胞冻存 | 第24页 |
| 2.2.6 细胞瞬时转染 | 第24-25页 |
| 2.2.7 免疫印迹实验 | 第25-27页 |
| 2.2.8 实时荧光定量PCR | 第27-28页 |
| 2.2.9 MTT法测定细胞半致死率 | 第28-29页 |
| 2.2.10 细胞核质分离实验 | 第29-30页 |
| 2.2.11 细胞凋亡检测 | 第30页 |
| 2.2.12 细胞活性氧水平检测 | 第30-31页 |
| 2.2.13 免疫组化 | 第31-33页 |
| 第3章 膀胱癌中iASPP蛋白及mRNA表达水平研究 | 第33-39页 |
| 3.1 膀胱癌组织中iASPP表达水平研究 | 第33-35页 |
| 3.1.1 免疫组化检测iASPP蛋白水平 | 第33-34页 |
| 3.1.2 组织免疫印迹检测iASPP蛋白水平 | 第34-35页 |
| 3.1.3 组织实时荧光定量PCR检测iASPPmRNA水平 | 第35页 |
| 3.2 膀胱癌细胞系中iASPP表达水平 | 第35-37页 |
| 3.2.1 膀胱癌细胞中iASPPmRNA表达水平 | 第36页 |
| 3.2.2 膀胱癌细胞中iASPP蛋白表达水平 | 第36-37页 |
| 3.3 讨论 | 第37-38页 |
| 3.4 本章小结 | 第38-39页 |
| 第4章 iASPP对膀胱癌细胞化疗耐药的影响 | 第39-46页 |
| 4.1 膀胱癌细胞化疗药物的耐受性 | 第39-41页 |
| 4.2 内源iASPP对膀胱癌细胞化疗药物耐受性的影响 | 第41-44页 |
| 4.2.1 iASPP过表达载体的构建 | 第41-42页 |
| 4.2.2 内源iASPP蛋白对5637细胞化疗药物耐受性的影响 | 第42-43页 |
| 4.2.3 内源iASPP蛋白对T24细胞化疗药物耐受性的影响 | 第43页 |
| 4.2.4 外源过表达iASPP蛋白对T24细胞化疗药物耐受性的影响 | 第43-44页 |
| 4.3 讨论 | 第44-45页 |
| 4.4 本章小结 | 第45-46页 |
| 第5章 iASPP调控细胞耐药分子机制的初步研究 | 第46-60页 |
| 5.1 iASPP通过抑制膀胱癌细胞ROS而抑制细胞凋亡 | 第46-53页 |
| 5.1.1 iASPP蛋白下调与外源过表达效率验证 | 第46页 |
| 5.1.2 内源iASPP对膀胱癌细胞凋亡水平的影响 | 第46-49页 |
| 5.1.3 外源过表达iASPP对T24细胞凋亡水平的影响 | 第49-50页 |
| 5.1.4 iASPP对膀胱癌细胞ROS水平的影响 | 第50-51页 |
| 5.1.5 ROS对iASPP调控膀胱癌细胞凋亡的影响 | 第51-53页 |
| 5.2 iASPP可能以p53非依赖方式抑制膀胱癌细胞凋亡 | 第53-54页 |
| 5.2.1 膀胱癌T24、5637细胞p53基因均为突变型 | 第53页 |
| 5.2.2 iASPP蛋白在细胞质中表达较多 | 第53-54页 |
| 5.3 内源iASPP对膀胱癌细胞Nrf2及下游靶基因的影响 | 第54-58页 |
| 5.4 外源过表达iASPP对T24细胞Nrf2及下游靶基因的影响 | 第58页 |
| 5.5 讨论 | 第58-59页 |
| 5.6 本章小结 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60页 |
| 展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
