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iASPP调控膀胱癌耐药性的初步研究

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
第1章 绪论第10-17页
    1.1 课题来源及研究背景和意义第10-11页
    1.2 国内外在该方向的研究现状及分析第11-15页
        1.2.1 国内外研究现状第11-14页
        1.2.2 国内外文献综述的简析第14-15页
    1.3 主要研究内容第15-16页
        1.3.1 膀胱癌中iASPP蛋白及mRNA表达水平研究第15页
        1.3.2 iASPP对膀胱癌细胞化疗耐药的影响第15页
        1.3.3 iASPP调控膀胱癌耐药分子机制的研究第15-16页
    1.4 技术路线图第16-17页
第2章 实验材料与方法第17-33页
    2.1 实验材料试剂第17-21页
        2.1.1 实验材料第17页
        2.1.2 实验试剂第17-20页
        2.1.3 实验仪器第20-21页
    2.2 实验方法和步骤第21-33页
        2.2.1 载体构建第21-22页
        2.2.2 质粒提取第22-23页
        2.2.3 细胞的复苏第23页
        2.2.4 细胞传代培养第23-24页
        2.2.5 细胞冻存第24页
        2.2.6 细胞瞬时转染第24-25页
        2.2.7 免疫印迹实验第25-27页
        2.2.8 实时荧光定量PCR第27-28页
        2.2.9 MTT法测定细胞半致死率第28-29页
        2.2.10 细胞核质分离实验第29-30页
        2.2.11 细胞凋亡检测第30页
        2.2.12 细胞活性氧水平检测第30-31页
        2.2.13 免疫组化第31-33页
第3章 膀胱癌中iASPP蛋白及mRNA表达水平研究第33-39页
    3.1 膀胱癌组织中iASPP表达水平研究第33-35页
        3.1.1 免疫组化检测iASPP蛋白水平第33-34页
        3.1.2 组织免疫印迹检测iASPP蛋白水平第34-35页
        3.1.3 组织实时荧光定量PCR检测iASPPmRNA水平第35页
    3.2 膀胱癌细胞系中iASPP表达水平第35-37页
        3.2.1 膀胱癌细胞中iASPPmRNA表达水平第36页
        3.2.2 膀胱癌细胞中iASPP蛋白表达水平第36-37页
    3.3 讨论第37-38页
    3.4 本章小结第38-39页
第4章 iASPP对膀胱癌细胞化疗耐药的影响第39-46页
    4.1 膀胱癌细胞化疗药物的耐受性第39-41页
    4.2 内源iASPP对膀胱癌细胞化疗药物耐受性的影响第41-44页
        4.2.1 iASPP过表达载体的构建第41-42页
        4.2.2 内源iASPP蛋白对5637细胞化疗药物耐受性的影响第42-43页
        4.2.3 内源iASPP蛋白对T24细胞化疗药物耐受性的影响第43页
        4.2.4 外源过表达iASPP蛋白对T24细胞化疗药物耐受性的影响第43-44页
    4.3 讨论第44-45页
    4.4 本章小结第45-46页
第5章 iASPP调控细胞耐药分子机制的初步研究第46-60页
    5.1 iASPP通过抑制膀胱癌细胞ROS而抑制细胞凋亡第46-53页
        5.1.1 iASPP蛋白下调与外源过表达效率验证第46页
        5.1.2 内源iASPP对膀胱癌细胞凋亡水平的影响第46-49页
        5.1.3 外源过表达iASPP对T24细胞凋亡水平的影响第49-50页
        5.1.4 iASPP对膀胱癌细胞ROS水平的影响第50-51页
        5.1.5 ROS对iASPP调控膀胱癌细胞凋亡的影响第51-53页
    5.2 iASPP可能以p53非依赖方式抑制膀胱癌细胞凋亡第53-54页
        5.2.1 膀胱癌T24、5637细胞p53基因均为突变型第53页
        5.2.2 iASPP蛋白在细胞质中表达较多第53-54页
    5.3 内源iASPP对膀胱癌细胞Nrf2及下游靶基因的影响第54-58页
    5.4 外源过表达iASPP对T24细胞Nrf2及下游靶基因的影响第58页
    5.5 讨论第58-59页
    5.6 本章小结第59-60页
结论第60页
展望第60-61页
参考文献第61-67页
攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果第67-69页
致谢第69页

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