| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 外文缩略词表 | 第14-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-32页 |
| 1.1 黑眶蟾蜍的药用价值 | 第16-17页 |
| 1.2 Cathelicidins抗菌肽研究进展 | 第17-30页 |
| 1.2.1 Cathelicidins抗菌肽的结构 | 第17-19页 |
| 1.2.2 Cathelicidins抗菌肽的分类 | 第19页 |
| 1.2.3 Cathelicidins家族的多样性及组织分布 | 第19-20页 |
| 1.2.4 Cathelicidins家族的活性 | 第20-27页 |
| 1.2.4.1 抵抗病原抗微生物 | 第21-25页 |
| 1.2.4.2 促进创伤修复 | 第25页 |
| 1.2.4.3 细胞趋化作用 | 第25-26页 |
| 1.2.4.4 Cathelicidins溶血性和细胞毒性研究 | 第26页 |
| 1.2.4.5 结合内毒素 | 第26页 |
| 1.2.4.6 抑制组织损伤 | 第26-27页 |
| 1.2.4.7 Cathelicidins抗菌肽的免疫调节作用 | 第27页 |
| 1.2.4.8 Cathelicidins对粘液和炎性结肠病的调控作用 | 第27页 |
| 1.2.5 Cathelicidins抗菌肽的抗菌机制 | 第27-29页 |
| 1.2.6 Cathelicidins与半胱氨酸蛋白酶抑制剂cystatins的相似性 | 第29页 |
| 1.2.7 Cathelicidins应用前景及存在问题 | 第29-30页 |
| 1.3 论文选题意义及研究内容 | 第30-32页 |
| 1.3.1 选题意义 | 第30-31页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第31-32页 |
| 第二章 黑眶蟾蜍cathelicidin-DM抗菌肽基因的克隆、组织表达研究及理化性质分析 | 第32-50页 |
| 2.1 材料和方法 | 第32-43页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第32-36页 |
| 2.1.1.1 实验动物、实验菌株和质粒 | 第32-33页 |
| 2.1.1.2 主要实验试剂 | 第33页 |
| 2.1.1.3 主要试剂的配置 | 第33-35页 |
| 2.1.1.4 主要实验仪器 | 第35-36页 |
| 2.1.2 黑眶蟾蜍皮肤cDNA文库的构建 | 第36-41页 |
| 2.1.2.1 黑眶蟾蜍皮肤总RNA提取 | 第36页 |
| 2.1.2.2 提取RNA的检测 | 第36页 |
| 2.1.2.3 cDNA双链合成 | 第36-38页 |
| 2.1.2.4 Cathelicidin-DM序列扩增 | 第38-39页 |
| 2.1.2.5 PCR产物与克隆载体连接 | 第39-41页 |
| 2.1.3 Cathelicidin-DM组织表达研究(RT-PCR) | 第41-43页 |
| 2.1.3.1 各组织器官总RNA提取 | 第41页 |
| 2.1.3.2 逆转录(RT) | 第41-42页 |
| 2.1.3.3 PCR扩增 | 第42-43页 |
| 2.1.3.4 序列比对 | 第43页 |
| 2.1.3.5 序列分析 | 第43页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第43-47页 |
| 2.2.1 RNA提取质量检测 | 第43页 |
| 2.2.2 Cathelicidin-DM基因克隆 | 第43-46页 |
| 2.2.3 组织表达研究 | 第46页 |
| 2.2.4 理化性质分析 | 第46-47页 |
| 2.3 本章总结 | 第47-50页 |
| 第三章 黑眶蟾蜍cathelicidin-DM抗菌肽的结构、活性及抗药抗体研究 | 第50-66页 |
| 3.1 实验材料 | 第50-58页 |
| 3.1.1 实验材料和方法 | 第50-54页 |
| 3.1.1.1 实验菌株 | 第50页 |
| 3.1.1.2 实验动物 | 第50页 |
| 3.1.1.3 实验细胞 | 第50-51页 |
| 3.1.1.4 实验试剂购买 | 第51页 |
| 3.1.1.5 实验试剂配置 | 第51-52页 |
| 3.1.1.6 主要实验仪器 | 第52-54页 |
| 3.1.2 Cathelicidin-DM的合成 | 第54页 |
| 3.1.3 结构预测 | 第54页 |
| 3.1.3.1 圆二色谱分析(Circular dichroism spectroscopy,CD) | 第54页 |
| 3.1.4 抗菌活性检测 | 第54-55页 |
| 3.1.4.1 抑菌圈分析法 | 第54-55页 |
| 3.1.4.2 最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)：二倍稀释法,方法如下 | 第55页 |
| 3.1.5 血清稳定性分析 | 第55页 |
| 3.1.6 杀菌曲线测定 | 第55-56页 |
| 3.1.7 对肿瘤细胞抑制情况检测 | 第56-57页 |
| 3.1.8 溶血活性分析 | 第57页 |
| 3.1.9 抗药抗体(Antidrug Antibodies,ADAs)实验 | 第57-58页 |
| 3.2 实验结果与讨论 | 第58-64页 |
| 3.2.1 cathelicidin-DM二级结构预测 | 第58-59页 |
| 3.2.2 CD实验结果 | 第59-60页 |
| 3.2.3 三级结构预测 | 第60-61页 |
| 3.2.4 抑菌活性分析 | 第61-63页 |
| 3.2.5 杀菌曲线 | 第63页 |
| 3.2.6 溶血活性、抗肿瘤活性 | 第63-64页 |
| 3.2.7 抗药抗体实验 | 第64页 |
| 3.3 本章总结 | 第64-66页 |
| 第四章 总结与展望 | 第66-70页 |
| 4.1 总结 | 第66-67页 |
| 4.2 展望 | 第67-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-86页 |
| 附录A：攻读硕士期间发表论文及申请专利目录 | 第86页 |
