摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
前言 | 第10-11页 |
第一章 相关背景知识介绍 | 第11-20页 |
第一节 关于PD、路易小体与a-synuclein蛋白 | 第11-14页 |
第二节 关于自噬的一些基础知识 | 第14-16页 |
第三节 自噬溶酶体,路易小体以及细胞死亡的关系探讨 | 第16-18页 |
第四节 多巴胺能神经元细胞死亡、自噬与帕金森病 | 第18-20页 |
第二章 建立理想的帕金森细胞模型 | 第20-24页 |
第一节 如何选择与自噬连接紧密的相关细胞模型 | 第20页 |
第二节 为什么选择鱼藤酮建立PD细胞模型 | 第20-22页 |
第三节 为什么选择SH-SY5Y细胞建立PD细胞模型 | 第22-24页 |
第三章 预试验判断细胞凋亡 | 第24-36页 |
第一节 预试验1 | 第24-25页 |
第二节 预试验2 | 第25-32页 |
第三节 预试验3 | 第32-36页 |
第四章 预试验细胞内自噬情况 | 第36-44页 |
第一节 筛查该模型是否与自噬相关分子相关 | 第36页 |
第二节 预试验4 | 第36-37页 |
第三节 选择适当的自噬抑制剂进行反向验证 | 第37-39页 |
第四节 预实验5 | 第39-42页 |
第五节 实验总结 | 第42-44页 |
第五章 自噬在SH-SY5Y细胞凋亡中扮演的角色 | 第44-51页 |
第一节 自噬抑制细胞凋亡试验 | 第44-47页 |
第二节 自噬激活影响细胞凋亡的试验 | 第47-49页 |
第三节 实验总结 | 第49-51页 |
第六章 关于FOXO3a蛋白的背景知识 | 第51-60页 |
第一节 基本情况介绍 | 第51页 |
第二节 FOXO的磷酸化作用与生物学效应 | 第51-52页 |
第三节 Akt与FOXO3a蛋白 | 第52-54页 |
第四节 FOXO3a蛋白的磷酸化与核内外运输代谢 | 第54-55页 |
第五节 FOXO蛋白的下游转录蛋白 | 第55-57页 |
第六节 神经细胞与FOXO3蛋白 | 第57-59页 |
第七节 帕金森病与FOXO3a | 第59-60页 |
第七章 在SH-SY5Y细胞模型上关于FOXO3a的预试验 | 第60-66页 |
第一节 预试验1 FOXO3a蛋白与诱导药物剂量对比验证 | 第60-61页 |
第二节 预试验2 FOXO3a蛋白表达量与细胞凋亡变化测试 | 第61-63页 |
第三节 预试验3 FOXO3a与相关应激后代谢修复\凋亡蛋白的影响变化 | 第63-65页 |
第四节 前七章试验总结 | 第65-66页 |
第八章 FOXO3a过表达质粒构建及与siRNA质粒的验证 | 第66-86页 |
第一节 细胞培养 | 第67页 |
第二节 siRNA转染SH-SY5Y细胞 | 第67页 |
第三节 实时荧光定量PCR检测 | 第67-71页 |
第四节 在SH-SY5Y细胞系内构建FOXO3a过表达载体 | 第71-78页 |
第四节 过表达质粒转染SH-SY5Y后的蛋白质验证 | 第78-83页 |
第六节 过表达质粒与siRNA共同对照FOXO3a蛋白表达测定 | 第83-84页 |
第七节 实验总结 | 第84-86页 |
第九章 FOXO3a蛋白抑制与过表达对细胞模型凋亡的影响 | 第86-93页 |
第一节 试验分组转染及细胞分组处理 | 第86-87页 |
第二节 细胞增殖检测(CCK-8法) | 第87-91页 |
第三节 实验总结 | 第91-93页 |
第十章 FOXO3a蛋白对细胞模型自噬及凋亡的影响 | 第93-97页 |
第一节 试验分组转染及细胞分组处理 | 第93页 |
第二节 自噬蛋白测定 | 第93-94页 |
第三节 CCK8细胞活性试验测定细胞凋亡 | 第94-95页 |
第四节 本次实验总结 | 第95-97页 |
第十一章 对FOXO3a促凋亡的上游分子的进一步检验 | 第97-108页 |
第一节 对FOXO3a上游分子的筛查试验 | 第97-99页 |
第二节 JNK简介 | 第99-102页 |
第三节 JNK抑制实验与siRNA实验 | 第102-108页 |
第十二章 总结讨论 | 第108-112页 |
参考文献 | 第112-119页 |
附录 | 第119-125页 |
部分缩写简称中英文对照 | 第125-126页 |
攻读学位期间成果 | 第126-127页 |
致谢 | 第127-129页 |