| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 主要符号表 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-24页 |
| 1.1 鱼藤素抗肿瘤作用研究现状 | 第12-15页 |
| 1.2 模式生物斑马鱼 | 第15-18页 |
| 1.2.1 斑马鱼简介 | 第15-16页 |
| 1.2.2 斑马鱼的优势与特点 | 第16页 |
| 1.2.3 斑马鱼在肿瘤研究中的应用 | 第16-18页 |
| 1.3 细胞周期蛋白CYCLIND1 与肿瘤的关系 | 第18-22页 |
| 1.3.1 细胞周期简介 | 第18页 |
| 1.3.2 细胞周期调控机制 | 第18-20页 |
| 1.3.3 细胞周期蛋白CyclinD1 | 第20-22页 |
| 1.4 本课题研究意义及主要研究内容 | 第22-24页 |
| 第二章 鱼藤素抑制肿瘤细胞增殖、调节肿瘤细胞周期、诱导细胞凋亡 | 第24-39页 |
| 2.1 引言 | 第24页 |
| 2.2 材料与设备 | 第24-25页 |
| 2.2.1 实验对象 | 第24页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第24-25页 |
| 2.2.3 实验设备 | 第25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-29页 |
| 2.3.1 细胞的复苏、培养与计数 | 第25-26页 |
| 2.3.2 MTT实验 | 第26页 |
| 2.3.3 PI单染（流式细胞术）实验 | 第26-28页 |
| 2.3.4 Annexinv-FITC/PI双染（流式细胞术）实验 | 第28-29页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第29-38页 |
| 2.4.1 鱼藤素抑制乳腺癌、肺癌细胞的增殖，对人胚胎肾上皮细胞无明显影响 | 第29-30页 |
| 2.4.2 鱼藤素阻滞乳腺癌、肺癌细胞至G2/M期，对人胚胎肾上皮细胞无明显影响192.4.3 鱼藤素诱导乳腺癌、肺癌细胞凋亡 | 第30-33页 |
| 2.4.3 鱼藤素诱导乳腺癌、肺癌细胞凋亡 | 第33-38页 |
| 2.5 本章小结 | 第38-39页 |
| 第三章 鱼藤素延缓斑马鱼胚胎发育 | 第39-44页 |
| 3.1 引言 | 第39页 |
| 3.2 材料与设备 | 第39-40页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第39-40页 |
| 3.2.2 实验设备 | 第40页 |
| 3.3 实验方法 | 第40-42页 |
| 3.3.1 鱼藤素溶液的配制 | 第40页 |
| 3.3.2 胚胎的收集 | 第40-41页 |
| 3.3.3 胚胎的加药处理 | 第41-42页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第42-43页 |
| 3.4.1 不同浓度的鱼藤素对胚胎发育的延缓作用 | 第42页 |
| 3.4.2 鱼藤素对不同时期胚胎的发育延缓作用 | 第42-43页 |
| 3.5 本章小结 | 第43-44页 |
| 第四章 整胚原位杂交检测鱼藤素对斑马鱼胚胎中CyclinD1 的表达影响 | 第44-61页 |
| 4.1 引言 | 第44页 |
| 4.2 材料与设备 | 第44-48页 |
| 4.2.1 实验对象 | 第44页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第44-47页 |
| 4.2.3 实验设备 | 第47-48页 |
| 4.3 实验方法 | 第48-58页 |
| 4.3.1 CyclinD1 探针的制备： | 第48-55页 |
| 4.3.2 胚胎的加药处理 | 第55页 |
| 4.3.3 整胚原位杂交 | 第55-58页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第58-60页 |
| 4.4.1 鱼藤素下调shield期斑马鱼胚胎中CyclinD1 的表达 | 第58-59页 |
| 4.4.2 鱼藤素抑制斑马鱼胚胎发育 | 第59页 |
| 4.4.3 鱼藤素下调 24hpf斑马鱼胚胎中CyclinD1 的表达 | 第59-60页 |
| 4.5 本章小结 | 第60-61页 |
| 第五章 鱼藤素降低肿瘤细胞以及斑马鱼胚胎中CyclinD1 mRNA的表达水平 | 第61-71页 |
| 5.1 引言 | 第61页 |
| 5.2 材料与设备 | 第61-63页 |
| 5.2.1 实验对象 | 第61页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第61-62页 |
| 5.2.3 实验设备 | 第62-63页 |
| 5.3 实验方法 | 第63-66页 |
| 5.3.1 肿瘤细胞以及胚胎的给药处理 | 第63页 |
| 5.3.2 肿瘤细胞及胚胎的总RNA提取 | 第63-64页 |
| 5.3.3 RNA反转录为cDNA | 第64-65页 |
| 5.3.4 Q-PCR引物的合成与设计 | 第65页 |
| 5.3.5 实时荧光定量PCR | 第65-66页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第66-69页 |
| 5.4.1 Q-PCR结果显示鱼藤素对斑马鱼胚胎中CyclinD1 mRNA的表达下调作用 | 第66-68页 |
| 5.4.2 鱼藤素对MCF-7 乳腺癌细胞中CyclinD1 mRNA的表达下调作用 | 第68页 |
| 5.4.3 鱼藤素对H1299 肺癌细胞中CyclinD1 mRNA的表达下调作用 | 第68-69页 |
| 5.4.4 鱼藤素对HEK293 人胚胎肾上皮细胞中CyclinD1 表达无明显影响 | 第69页 |
| 5.5 本章小结 | 第69-71页 |
| 结论与展望 | 第71-72页 |
| 一 结论 | 第71页 |
| 二 创新点 | 第71页 |
| 三 展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 附件 | 第82页 |
