摘要 | 第2-5页 |
abstract | 第5-8页 |
引言 | 第11-13页 |
材料与方法 | 第13-21页 |
1 多巴胺能神经细胞系SH-SY5Y细胞的培养 | 第13-14页 |
1.1 细胞来源及特性 | 第13页 |
1.2 实验试剂 | 第13页 |
1.3 实验仪器 | 第13页 |
1.4 常用液体配制 | 第13-14页 |
1.5 细胞复苏与细胞培养步骤 | 第14页 |
2 实时定量PCR检测Ndfip1,α-synuclein的mRNA水平 | 第14-16页 |
2.1 常用试剂 | 第14页 |
2.2 常用仪器 | 第14页 |
2.3 PCR引物 | 第14-15页 |
2.4 细胞接种与药物处理 | 第15页 |
2.5 操作步骤 | 第15-16页 |
2.5.1 细胞总RNA的提取与定量 | 第15页 |
2.5.2 逆转录反应 | 第15-16页 |
2.5.3 PCR反应 | 第16页 |
2.5.4 PCR产物分析 | 第16页 |
3 重组腺病毒感染SH-SY5Y细胞 | 第16-17页 |
3.1 实验试剂 | 第16页 |
3.2 病毒感染 | 第16-17页 |
4 Westernblots方法检测Ndfip1,α-synuclein,TH,caspase-3的蛋白表达 | 第17-20页 |
4.1 实验试剂 | 第17页 |
4.2 实验仪器 | 第17页 |
4.3 抗体 | 第17-18页 |
4.4 常用液体配制 | 第18页 |
4.5 细胞接种与药物处理 | 第18-19页 |
4.6 蛋白提取和定量检测 | 第19页 |
4.7 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)操作步骤 | 第19-20页 |
5 免疫荧光检测SH-SY5Y细胞内α-synuclein蛋白表达 | 第20-21页 |
5.1 实验试剂 | 第20页 |
5.2 实验仪器 | 第20页 |
5.3 抗体 | 第20页 |
5.4 液体配制 | 第20页 |
5.5 细胞接种与药物处理 | 第20页 |
5.6 实验步骤 | 第20-21页 |
结果 | 第21-28页 |
1 鱼藤酮上调SH-SY5Y细胞中α-突触核蛋白表达 | 第21-22页 |
2 鱼藤酮处理的SH-SY5Y细胞Ndfip1的表达变化 | 第22页 |
3 高表达Ndfip1能够拮抗鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞损伤 | 第22-23页 |
4 高表达Ndfip1能够拮抗鱼藤酮诱导TH表达下降 | 第23-24页 |
5 高表达Ndfip1能够拮抗鱼藤酮诱导caspase-3激活 | 第24-25页 |
6 高表达Ndfip1可以显著抑制鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞中α-突触核蛋白蛋白水平的增加 | 第25-28页 |
讨论 | 第28-31页 |
结论 | 第31-32页 |
参考文献 | 第32-35页 |
综述 | 第35-46页 |
综述参考文献 | 第41-46页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第46-47页 |
缩略词表 | 第47-50页 |
致谢 | 第50-51页 |