| 摘要 | 第2-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第9-11页 |
| 实验材料和方法 | 第11-25页 |
| 一、实验材料 | 第11-14页 |
| 1.实验仪器和试剂 | 第11-13页 |
| 2.目的基因和载体 | 第13-14页 |
| 3.实验动物 | 第14页 |
| 二、实验方法 | 第14-25页 |
| 1.动物模型的建立及转染 | 第14-19页 |
| 1.1 分组 | 第14页 |
| 1.2 术前准备及麻醉方法 | 第14页 |
| 1.3 手术方法 | 第14-19页 |
| 2.影像学检查 | 第19-21页 |
| 3.RT-PCR技术检测FasmRNA和Sox9mRNA表达水平 | 第21-22页 |
| 3.1 Trizol法提取RNA | 第21页 |
| 3.2 逆转录成cDNA | 第21页 |
| 3.3 半定量RT-PCR检测 | 第21-22页 |
| 3.4 实时荧光定量PCR检测 | 第22页 |
| 4.Western-Blot技术检测椎间盘内II型胶原、蛋白多糖水平 | 第22-25页 |
| 4.1 收集髓核蛋白质样本 | 第22页 |
| 4.2 电泳 | 第22-23页 |
| 4.2.1 电泳胶的配制 | 第22页 |
| 4.2.2 样本处理 | 第22-23页 |
| 4.2.3 加样与电泳 | 第23页 |
| 4.3 电转膜仪转膜 | 第23页 |
| 4.4 封闭 | 第23页 |
| 4.5 孵育一抗 | 第23页 |
| 4.6 孵育二抗 | 第23-24页 |
| 4.7 蛋白检测 | 第24-25页 |
| 统计学方法 | 第25-26页 |
| 实验结果 | 第26-36页 |
| 一、影像学检查结果 | 第26-30页 |
| 二、Real-TimePCR技术检测mRNA表达水平 | 第30-32页 |
| 1.FasmRNA表达水平 | 第30-31页 |
| 2.Sox9mRNA表达水平 | 第31-32页 |
| 三、Western-Blot技术检测椎间盘内II型胶原、蛋白多糖水平 | 第32-36页 |
| 1.椎间盘内II型胶原水平检测 | 第32-33页 |
| 2.蛋白多糖水平检测 | 第33-36页 |
| 讨论 | 第36-40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-44页 |
| 综述 椎间盘退变及其基因治疗 | 第44-56页 |
| 综述参考文献 | 第51-56页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第56-57页 |
| 附录一 | 第57-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
