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巨噬细胞缺失Cdc42对雨蛙素诱导的急性胰腺炎的影响及其作用机制

摘要第3-5页
abstract第5-7页
中英文缩写对照表第11-12页
第1章 绪论第12-16页
    1.1 Cdc42、巨噬细胞与急性胰腺炎第12-14页
        1.1.1 Cdc42在炎症反应和巨噬细胞中的作用第12页
        1.1.2 胰腺炎第12-13页
        1.1.3 巨噬细胞在炎症反应中的作用第13-14页
    1.2 研究目的和意义第14页
    1.3 实验设计第14-15页
    1.4 统计学分析第15-16页
第2章 制备巨噬细胞特异性Cdc42敲除小鼠并建立雨蛙素诱导的急性胰腺炎模型第16-25页
    2.1 引言第16页
    2.2 材料与方法第16-21页
        2.2.1 实验动物第16-17页
        2.2.2 巨噬细胞特异性敲除Cdc42小鼠的制备第17-18页
        2.2.3 小鼠基因型鉴定第18-19页
        2.2.4 提取骨髓细胞第19页
        2.2.5 制备小鼠急性胰腺炎模型第19-20页
        2.2.6 检测小鼠血清淀粉酶含量第20页
        2.2.7 检测小鼠血清脂肪酶含量第20-21页
        2.2.8 检测血清中炎症因子第21页
    2.3 实验结果第21-25页
        2.3.1 小鼠基因型鉴定第21-22页
        2.3.2 检测骨髓细胞中Cdc42蛋白水平第22-23页
        2.3.3 检测小鼠血清淀粉酶第23页
        2.3.4 检测小鼠血清脂肪酶第23-24页
        2.3.5 检测小鼠血清中IL-6和TNF-α浓度第24-25页
第3章 巨噬细胞缺失Cdc42对雨蛙素诱导的急性胰腺炎的影响第25-36页
    3.1 引言第25页
    3.2 材料与方法第25-27页
        3.2.1 小鼠血常规检测第25页
        3.2.2 小鼠血糖水平监测第25-26页
        3.2.3 石蜡包埋第26页
        3.2.4 苏木素-伊红(HE)染色第26页
        3.2.5 免疫组化(IHC)染色第26-27页
    3.3 实验结果第27-36页
        3.3.1 小鼠血常规分析第27-28页
        3.3.2 比较急性胰腺炎反复发作过程中血糖水平第28-29页
        3.3.3 巨噬细胞缺失Cdc42明显加重急性胰腺炎组织损伤第29-30页
        3.3.4 巨噬细胞Cdc42缺失明显增加胰腺组织内巨噬细胞的浸润第30-32页
        3.3.5 巨噬细胞Cdc42缺失明显加重急性胰腺炎时的肺组织损伤第32-33页
        3.3.6 肺组织免疫组化染色第33-36页
第4章 Cdc42对巨噬细胞炎性因子表达的调控作用第36-50页
    4.1 引言第36-37页
    4.2 材料与方法第37-42页
        4.2.1 腹腔巨噬细胞的提取与培养第37页
        4.2.2 RAW264.7巨噬细胞的培养与刺激第37-38页
        4.2.3 RNA提取第38页
        4.2.4 RT-qPCR第38-39页
        4.2.5 提取蛋白和蛋白定量第39-40页
        4.2.6 Westernblot第40-42页
        4.2.7 ELISA检测血清MCP-1浓度第42页
    4.3 实验结果第42-50页
        4.3.1 巨噬细胞敲除Cdc42显著增加IL6、TNFα等细胞因子的表达第42-43页
        4.3.2 巨噬细胞敲除Cdc42对雨蛙素诱导的胰腺组织STAT3蛋白磷酸化无显著性差异第43-44页
        4.3.3 巨噬细胞敲除Cdc42对雨蛙素诱导后血清中MCP1增加无明显差异第44-45页
        4.3.4 敲除Cdc42或抑制Cdc42活性,明显增加小鼠腹腔巨噬细胞和RAW264.7细胞的CCR2蛋白表达第45-47页
        4.3.5 抑制Cdc42活性,对LPS刺激下RAW264.7细胞中炎症相关蛋白磷酸化变化的影响第47-48页
        4.3.6 敲除Cdc42,对LPS刺激下腹腔巨噬细胞中炎症相关蛋白磷酸化变化的影响第48-50页
第5章 讨论第50-53页
致谢第53-54页
参考文献第54-56页
攻读学位期间的研究成果第56-57页
综述第57-74页
    参考文献第68-74页

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