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旋毛虫谷胱甘肽S-转移酶的克隆表达及鉴定

摘要第5-9页
Abstract第9-13页
英文缩略词第17-19页
1 前言第19-22页
    1.1 旋毛虫感染引起的免疫应答第19页
    1.2 谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione transferase,GST)的功能第19-20页
    1.3 GST在寄生虫感染中作用的研究第20页
    1.4 研究的内容、目的和意义第20-22页
2 材料第22-29页
    2.1 主要试剂第22页
    2.2 主要仪器第22-23页
    2.3 主要试剂的配制第23-29页
3 方法第29-48页
    3.1 技术路线第29页
    3.2 实验动物、旋毛虫虫种及细胞系第29-30页
    3.3 旋毛虫各个虫期的收集第30页
    3.4 旋毛虫肌幼虫ES抗原与各个虫期可溶性抗原的制备第30-31页
    3.5 总RNA的提取第31页
    3.6 cDNA反转录步骤第31页
    3.7 引物设计第31-32页
    3.8 目的基因PCR扩增第32页
    3.9 重组基因克隆载体的构建与鉴定第32-36页
    3.10 rTsGST的诱导表达第36页
    3.11 rTsGST的SDS-PAGE分析第36-37页
    3.12 rTsGST的可溶性分析第37页
    3.13 rTsGST的纯化第37-38页
    3.14 rTsGST免疫血清的制备第38页
    3.15 rTsGST的ELISA鉴定第38-39页
    3.16 rTsGST的Western blot鉴定第39-40页
    3.17 TsGST基因的转录与蛋白的表达鉴定第40-41页
    3.18 TsGST蛋白在虫体的具体定位第41-43页
    3.19 旋毛虫rTsGST蛋白小鼠体内实验第43-44页
    3.20 rTsGST免疫血清对旋毛虫影响的体外实验第44-45页
    3.21 TsGST与其他寄生虫和模式生物的进化关系第45-46页
    3.22 rTsGST酶性质的鉴定第46-47页
    3.23 统计学处理第47-48页
4 结果第48-70页
    4.1 TsGST生物信息学分析第48-50页
    4.2 引物设计第50-51页
    4.3 旋毛虫总RNA的提取第51页
    4.4 TsGST基因的PCR扩增第51-52页
    4.5 TsGST重组质粒的构建第52-55页
    4.6 rTsGST蛋白的SDS-PAGE分析第55-57页
    4.7 rTsGST在肌幼虫ES和可溶抗原的免疫学分析第57-59页
    4.8 TsGST基因的转录水平及翻译水平鉴定第59-60页
    4.9 rTsGST在裸虫虫体的表达及在组织中具体的定位第60-61页
    4.10 rTsGST蛋白体内实验结果第61-64页
    4.11 rTsGST免疫血清对旋毛虫影响的体外实验第64-65页
    4.12 rTsGST进化树和序列比对分析第65-67页
    4.13 rTsGST的生化性质分析第67-70页
5 讨论第70-73页
    5.1 谷胱甘肽S-转移酶(GST)研究第70页
    5.2 TsGST的生物信息学分析第70页
    5.3 rTsGST的免疫原性和抗原性的鉴定第70-71页
    5.4 rTsGST的体内体外实验第71-73页
6 结论第73-74页
参考文献第74-78页
综述 旋毛虫感染引起的免疫应答及谷胱甘肽S-转移酶的研究第78-90页
    参考文献第86-90页
个人简历及硕士在读期间发表的论文第90-91页
致谢第91页

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