| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第10-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-20页 |
| 第二章 通过慢病毒转染 HIF-1α增强 BMSCs 成骨分化和成血管能力的研究 | 第20-44页 |
| 2.1 前言 | 第20-21页 |
| 2.2 材料和方法 | 第21-30页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第21页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.3 主要溶液配制 | 第22页 |
| 2.2.4 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.2.5 BMSCs 的分离、培养、冻存与复苏 | 第23-24页 |
| 2.2.6 HIF-1α慢病毒载体的构建和转染 | 第24-25页 |
| 2.2.7 qRT-PCR 分析相关基因表达 | 第25-26页 |
| 2.2.8 ELISA 检测 VEGF 表达 | 第26-27页 |
| 2.2.9 茜素红染色和碱性磷酸酶活性检测 | 第27-28页 |
| 2.2.10 动物实验及分组 | 第28页 |
| 2.2.11 显微 CT 检测 | 第28-29页 |
| 2.2.12 组织学检查 | 第29-30页 |
| 2.2.13 统计学分析 | 第30页 |
| 2.3 结果 | 第30-40页 |
| 2.3.1 细胞分离、培养 | 第30页 |
| 2.3.2 慢病毒转染和 HIF-1α过表达 | 第30-31页 |
| 2.3.3 HIF-1α过表达促进相关基因的表达 | 第31-32页 |
| 2.3.4 HIF-1α过表达促进 VEGF 分泌 | 第32-33页 |
| 2.3.5 HIF-1α过表达促进成骨分化 | 第33-35页 |
| 2.3.6 HIF-1α过表达促进骨坏死区域的骨修复 | 第35-38页 |
| 2.3.7 HIF-1α过表达促进骨坏死区域的血管再生 | 第38-40页 |
| 2.4 讨论 | 第40-43页 |
| 2.5 小结 | 第43-44页 |
| 第三章 DMOG 对 ASCs 成骨分化和成血管能力影响的研究 | 第44-70页 |
| 3.1 前言 | 第44-45页 |
| 3.2 材料和方法 | 第45-54页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第45页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第45-46页 |
| 3.2.3 主要溶液配制 | 第46页 |
| 3.2.4 主要仪器 | 第46-47页 |
| 3.2.5 脂肪干细胞（ASCs）的分离、培养和鉴定 | 第47-48页 |
| 3.2.6 HIF-1α shRNA 的构建和转染 | 第48-49页 |
| 3.2.7 ASCs 增殖和生存能力评估 | 第49页 |
| 3.2.8 Western Blotting 检测 HIF-1α和 VEGF 蛋白表达 | 第49页 |
| 3.2.9 DMOG 对 VEGF 分泌的影响 | 第49-50页 |
| 3.2.10 qRT-PCR 分析成骨基因表达 | 第50-51页 |
| 3.2.11 茜素红染色和碱性磷酸酶活性检测 | 第51页 |
| 3.2.12 动物实验和分组 | 第51-52页 |
| 3.2.13 评估骨缺损区域的骨组织再生 | 第52-53页 |
| 3.2.14 评估骨缺损区域的新血管形成 | 第53页 |
| 3.2.15 组织学检查 | 第53-54页 |
| 3.2.16 统计学分析 | 第54页 |
| 3.3 结果 | 第54-66页 |
| 3.3.1 细胞分离、鉴定及转染 | 第54-55页 |
| 3.3.2 DMOG 抑制 ASCs 增殖，促进 ASCs 生存 | 第55-58页 |
| 3.3.3 DMOG 促进 VEGF 蛋白表达和分泌 | 第58-59页 |
| 3.3.4 DMOG 促进相关成骨基因的表达 | 第59-60页 |
| 3.3.5 茜素红染色和碱性磷酸酶活性检测 | 第60-62页 |
| 3.3.6 DMOG 促进骨缺损区域的骨修复 | 第62-64页 |
| 3.3.7 DMOG 促进骨缺损区域的血管再生 | 第64-66页 |
| 3.3.8 免疫组化分析 | 第66页 |
| 3.4 讨论 | 第66-69页 |
| 3.5 小结 | 第69-70页 |
| 第四章 DMOG 增强组织工程骨中 BMSCs 的成血管能力的研究 | 第70-86页 |
| 4.1 前言 | 第70-71页 |
| 4.2 材料和方法 | 第71-77页 |
| 4.2.1 实验动物 | 第71页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第71-72页 |
| 4.2.3 主要溶液配制 | 第72页 |
| 4.2.4 主要仪器 | 第72页 |
| 4.2.5 大鼠 BMSCs 的分离与培养 | 第72-73页 |
| 4.2.6 shHIF-1α转染 BMSCs | 第73页 |
| 4.2.7 Western Blotting 检测 HIF-1α在 BMSCs 中的表达 | 第73页 |
| 4.2.8 qRT-PCR 分析成血管相关基因的表达 | 第73-74页 |
| 4.2.9 ELISA 检测成血管相关生长因子的分泌 | 第74-75页 |
| 4.2.10 动物实验和分组 | 第75页 |
| 4.2.11 显微 CT 检测 | 第75-76页 |
| 4.2.12 硬组织切片检测 | 第76页 |
| 4.2.13 免疫组化检查 | 第76-77页 |
| 4.2.14 统计学分析 | 第77页 |
| 4.3 结果 | 第77-84页 |
| 4.3.1 细胞培养及病毒转染 | 第77页 |
| 4.3.2 DMOG 促进 HIF-1α在 BMSCs 中的表达 | 第77-79页 |
| 4.3.3 DMOG 促进成血管相关基因的表达 | 第79-80页 |
| 4.3.4 DMOG 促进成血管相关因子的分泌 | 第80页 |
| 4.3.5 DMOG 促进骨缺损区域的骨修复 | 第80-82页 |
| 4.3.6 DMOG 促进 BMSCs 的成血管能力 | 第82-84页 |
| 4.4 讨论 | 第84-85页 |
| 4.5 小结 | 第85-86页 |
| 第五章 结论 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-101页 |
| 致谢 | 第101-103页 |
| 博士在读期间发表论文和科研成果 | 第103页 |
