| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 中英文缩略词表 | 第8-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-26页 |
| 1.1 前言 | 第13页 |
| 1.2 重组蛋白复性与同时纯化的高效液相色谱技术 | 第13-17页 |
| 1.2.1 高效疏水相互作用色谱法对蛋白质复性与同时纯化 | 第14-15页 |
| 1.2.2 高效离子交换色谱法对蛋白质复性与同时纯化 | 第15-16页 |
| 1.2.3 混合模式色谱对蛋白质复性与同时纯化 | 第16-17页 |
| 1.3 制备级HPLC对蛋白质的复性与同时纯化 | 第17-18页 |
| 1.4 本论文的研究工作 | 第18-20页 |
| 参考文献 | 第20-26页 |
| 第二章 色氨酸配基的高效液相色谱固定相的制备及其分离性能 | 第26-39页 |
| 2.1 引言 | 第26-27页 |
| 2.2 仪器与试剂 | 第27-28页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第27-28页 |
| 2.2.2 主要材料与试剂 | 第28页 |
| 2.3 实验部分 | 第28-30页 |
| 2.3.1 硅胶的酸化处理 | 第28-29页 |
| 2.3.2 硅胶的环氧化 | 第29页 |
| 2.3.3 色氨酸配基的偶联与表征 | 第29页 |
| 2.3.4 色谱柱的装填 | 第29页 |
| 2.3.5 色谱柱分离性能测试 | 第29-30页 |
| 2.3.6 在HPHIC模式下分离鸡蛋清 | 第30页 |
| 2.3.7 色谱馏分样品的处理与理化性能分析 | 第30页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第30-36页 |
| 2.4.1 固定相元素分析 | 第30-31页 |
| 2.4.2 固定相荧光光谱分析 | 第31页 |
| 2.4.3 在WCX模式下对蛋白质的分离 | 第31-32页 |
| 2.4.4 在HPHIC模式下对蛋白质的分离 | 第32-33页 |
| 2.4.5 HPHIC模式下影响蛋白质分离因素的考察 | 第33-34页 |
| 2.4.6 HPHIC模式下对鸡蛋清的分离 | 第34-36页 |
| 2.5 小结 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-39页 |
| 第三章 色氨酸配基的HPLC固定相对RGD-rhDll1的复性与纯化 | 第39-54页 |
| 3.1 绪论 | 第39-40页 |
| 3.2 仪器与试剂 | 第40-41页 |
| 3.2.1 主要仪器 | 第40页 |
| 3.2.2 主要材料与试剂 | 第40-41页 |
| 3.3 实验方法 | 第41-44页 |
| 3.3.1 摇瓶发酵中所用试剂的配制 | 第41页 |
| 3.3.2 种子液的制备 | 第41页 |
| 3.3.3 摇瓶发酵培养 | 第41页 |
| 3.3.4 包涵体的回收与溶解 | 第41-42页 |
| 3.3.5 在WCX模式下对RGD-rhDll1的复性与纯化 | 第42页 |
| 3.3.6 在HPHIC模式下对rhDll1-RGD的复性与纯化 | 第42-43页 |
| 3.3.7 复性与纯化RGD-rhDll1的理化性能分析 | 第43页 |
| 3.3.8 Western blot检测Notch下游Hes1表达 | 第43-44页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第44-52页 |
| 3.4.1 摇瓶中表达 | 第44页 |
| 3.4.2 在WCX模式下对RGD-rhDll1的复性与纯化 | 第44-46页 |
| 3.4.3 HPHIC模式下对RGD-rhDll1的复性与纯化 | 第46-51页 |
| 3.4.3.1 梯度对RGD-rhDll1复性与纯化的影响 | 第46-48页 |
| 3.4.3.2 pH对RGD-rhDll1复性与纯化的影响 | 第48-49页 |
| 3.4.3.3 复性与纯化RGD-rhDll1的理化性能分析 | 第49-50页 |
| 3.4.3.4 不同固定相对RGD-rhDll1的复性与纯化的影响 | 第50-51页 |
| 3.4.4 RGD-rhDll1生物学活性检测 | 第51-52页 |
| 3.5 小结 | 第52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
| 第四章 HPHIC色谱饼对RGD-rhDll1的复性与纯化 | 第54-67页 |
| 4.1 绪论 | 第54-55页 |
| 4.2 仪器与试剂 | 第55-56页 |
| 4.2.1 仪器 | 第55页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第55-56页 |
| 4.3 实验方法 | 第56页 |
| 4.3.1 发酵罐中补料批式发酵 | 第56页 |
| 4.3.2 在HPHIC模式下对RGD-rhDll1的复性与纯化 | 第56页 |
| 4.3.3 复性与纯化RGD-rhDll1的理化性能分析 | 第56页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第56-64页 |
| 4.4.1 发酵罐中重组菌的生长曲线 | 第56-58页 |
| 4.4.2 HPHIC色谱饼对RGD-rhDll1的复性与纯化 | 第58-61页 |
| 4.4.2.1 流速 | 第58-59页 |
| 4.4.2.2 脲浓度 | 第59-60页 |
| 4.4.2.3 进样量 | 第60-61页 |
| 4.4.3 优化条件下USRPP对RGD-rhDll1的复性与纯化 | 第61-62页 |
| 4.4.4 理化性质的分析 | 第62-63页 |
| 4.4.5 报告基因实验检测融合蛋白质生物学活性 | 第63-64页 |
| 4.5 小结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-67页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
