| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1.1 棉籽糖家族寡糖(RFOs)简介 | 第11-12页 |
| 1.1.1 RFOs的生物合成 | 第11-12页 |
| 1.1.2 RFOs的代谢途径 | 第12页 |
| 1.2 水苏糖合成酶研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2.1 水苏糖合成酶与逆境胁迫反应 | 第13页 |
| 1.3 选择性剪切 | 第13-16页 |
| 1.3.1 选择性剪切研究进展 | 第13-14页 |
| 1.3.2 黄瓜水苏糖合成酶基因选择性剪切 | 第14-15页 |
| 1.3.3 选择性剪切与非生物胁迫 | 第15-16页 |
| 1.4 α-半乳糖苷酶细胞定位 | 第16-18页 |
| 第二章 特异鉴定3种STS转录本方法的建立 | 第18-27页 |
| 2.1 材料与方法 | 第18-23页 |
| 2.1.1 3种STS转录本模板RNA的制备 | 第18-20页 |
| 2.1.2.1 质粒的活化与提取 | 第18-19页 |
| 2.1.2.2 线性化质粒DNA | 第19页 |
| 2.1.2.3 体外转录 | 第19-20页 |
| 2.1.2 锚定引物RT-PCR方法的建立 | 第20-23页 |
| 2.1.2.1 实时定量PCR引物设计 | 第21-22页 |
| 2.1.2.2 针对STSⅠ的锚定引物的特异性鉴定 | 第22页 |
| 2.1.2.3 针对STSⅡ的锚定引物的特异性鉴定 | 第22-23页 |
| 2.1.2.4 RT-PCR条件 | 第23页 |
| 2.2 结果与分析 | 第23-26页 |
| 2.2.1 3种STS转录本模板RNA的制备 | 第23-25页 |
| 2.2.1.1 水苏糖合成酶质粒DNA提取 | 第23-24页 |
| 2.2.1.2 水苏糖合成酶质粒DNA线性化 | 第24页 |
| 2.2.1.3 体外转录 | 第24-25页 |
| 2.2.2 实时定量锚定引物特异性验证 | 第25-26页 |
| 2.2.2.1 STSⅠ反转录引物的特异性验证 | 第25页 |
| 2.2.2.2 STSⅡ反转录引物特异性验证 | 第25-26页 |
| 2.3 讨论 | 第26-27页 |
| 第三章 3种STS转录本基本特性研究 | 第27-35页 |
| 3.1 材料与方法 | 第27-30页 |
| 3.1.1 材料 | 第27-28页 |
| 3.1.2 糖处理及取样方法 | 第28页 |
| 3.1.3 荧光定量RT-PCR方法(绝对定量) | 第28-29页 |
| 3.1.3.1 总RNA的提取 | 第28页 |
| 3.1.3.2 荧光定量序列引物设计 | 第28-29页 |
| 3.1.3.3 绝对定量标准曲线的制作 | 第29页 |
| 3.1.3.4 反转录及实时荧光定量PCR | 第29页 |
| 3.1.4 STS的提取与测定 | 第29-30页 |
| 3.2 结果与分析 | 第30-33页 |
| 3.2.1 产物与底物对STS表达和活性的影响 | 第30-32页 |
| 3.2.1.1 无糖培养对STS表达和活性的影响 | 第30页 |
| 3.2.1.2 各种糖培养对STS表达和活性的影响 | 第30-32页 |
| 3.2.1.3 甘露醇培养对STS表达和活性的影响 | 第32页 |
| 3.2.2 3种STS转录本的稳定性研究 | 第32-33页 |
| 3.3 讨论 | 第33-35页 |
| 第四章 低温胁迫下STS与α-半乳糖苷酶各种转录本的表达 | 第35-47页 |
| 4.1 材料与方法 | 第35-39页 |
| 4.1.1 试验材料及栽培管理 | 第35-36页 |
| 4.1.2 方法 | 第36-39页 |
| 4.1.2.1 处理及取样方法 | 第36页 |
| 4.1.2.2 叶片中可溶性糖的提取和测定 | 第36-37页 |
| 4.1.2.3 STS与α-半乳糖苷酶各转录本的表达的测定 | 第37页 |
| 4.1.2.4 STS与α-半乳糖苷酶的提取和测定 | 第37-38页 |
| 4.1.2.5 α-半乳糖苷酶亚细胞定位研究 | 第38-39页 |
| 4.1.2.5.1 农杆菌悬浮液的制备 | 第38页 |
| 4.1.2.5.2 农杆菌侵染洋葱表皮 | 第38页 |
| 4.1.2.5.3 烟草注射 | 第38-39页 |
| 4.2 结果与分析 | 第39-45页 |
| 4.2.1 STS在低温胁迫中的作用 | 第39-40页 |
| 4.2.1.1 低温胁迫对黄瓜幼苗RFOs合成相关糖含量的影响 | 第39-40页 |
| 4.2.2.2 低温胁迫对STS表达及活性的影响 | 第40页 |
| 4.2.2 低温胁迫与恢复过程中α-半乳糖苷酶的作用 | 第40-44页 |
| 4.2.2.1 低温胁迫与恢复过程中黄瓜叶片中糖含量测定 | 第40-41页 |
| 4.2.1.2 低温胁迫与恢复过程中黄瓜叶片中α-半乳糖苷酶表达及活性 | 第41-44页 |
| 4.2.3 α-半乳糖苷酶亚细胞定位 | 第44-45页 |
| 4.3 讨论 | 第45-47页 |
| 全文结论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
