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枯草芽孢杆菌S-16抑制核盘菌形成活性物质的鉴定及其相关功能基因的克隆

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
1 引言第9-17页
    1.1 向日葵及菌核病简介第9-10页
        1.1.1 向日葵及其病害概况第9页
        1.1.2 向日葵菌核病的分布危害第9页
        1.1.3 向日葵菌核病的病原菌及症状第9-10页
    1.2 核盘菌的致病机理第10-11页
    1.3 菌核病的防治措施第11-13页
        1.3.1 化学防治第11页
        1.3.2 农业防治第11页
        1.3.3 向日葵抗性品种选育第11-12页
        1.3.4 生物防治第12-13页
    1.4 枯草芽孢杆菌作为生防菌株的应用第13-15页
        1.4.1 枯草芽孢杆菌的抑菌机制第14页
        1.4.2 枯草芽孢杆菌产生的抑菌物质第14-15页
        1.1.3 枯草芽孢杆菌产生的挥发性气体抑菌物质第15页
    1.5 TN10转座子第15-17页
    1.6 研究的目的和意义第17页
2 菌株S-16突变子库的构建及相关基因定位第17-26页
    2.1 实验材料第17-20页
        2.1.1 菌株和质粒第17页
        2.1.2 抗生素的配制及其浓度第17页
        2.1.3 培养基第17-18页
        2.1.4 主要药品及主要仪器第18页
        2.1.5 PCR引物第18页
        2.1.6 溶液、缓冲液及试剂第18-19页
        2.1.7 碱裂解提取质粒所需试剂第19-20页
        2.1.8 DNA提取试剂第20页
    2.2 实验方法第20-22页
        2.2.1 碱裂解法提取质粒第20页
        2.2.2 细菌总DNA的提取第20-21页
        2.2.3 S-16菌株突变体库的构建第21页
        2.2.4 抑菌缺失突变子的筛选第21页
        2.2.5 抑菌突变株中转座子插入位点侧翼序列的克隆第21-22页
        2.2.6 突变子生物膜的定量测定及生物膜缺失突变子的筛选第22页
        2.2.7 抑制菌核形成气体物质缺失突变子筛选第22页
    2.3 结果与分析第22-25页
        2.3.1 S-16菌株突变体库的构建第22页
        2.3.2 抑菌缺失突变子的筛选第22-23页
        2.3.3 抑菌突变株中转座子插入位点侧翼序列的克隆第23-24页
        2.3.4 突变子生物膜的定量测定及生物膜形成能力缺失突变子的筛选第24-25页
        2.3.5 抑制菌核形成气体物质缺失突变子筛选第25页
    2.4 结论与讨论第25-26页
3 S-16 抑菌活性物质的研究第26-32页
    3.1 实验材料第26页
        3.1.1 供试菌株第26页
        3.1.2 培养基第26页
    3.2 实验方法第26-27页
        3.2.1 抑菌物质粗提液的制备第26页
        3.2.2 抑菌粗提液对核盘菌的拮抗作用第26页
        3.2.3 抑菌物质的热稳定性测定第26-27页
        3.2.4 不同pH对抑菌活性物质的影响第27页
        3.2.5 紫外线对抑菌活性物质的影响第27页
        3.2.6 不同酶处理对抑菌活性物质的影响第27页
        3.2.7 不同通气量对抑菌物质产生的影响第27页
        3.2.8 不同碳、氮源对抑菌物质的影响第27页
    3.3 结果与分析第27-31页
        3.3.1 抑菌粗提液对核盘菌的拮抗作用第27-28页
        3.3.2 抑菌物质的热稳定性研究第28页
        3.3.3 不同pH对抑菌活性物质的影响第28-29页
        3.3.4 紫外线对抑菌活性物质的影响第29页
        3.3.5 不同酶处理对抑菌活性物质的影响第29-30页
        3.3.6 不同通气量对抑菌物质产生的影响第30页
        3.3.7 不同碳、氮源对抑菌物质的影响第30-31页
    3.4 结论与讨论第31-32页
4 菌株S-16抑菌气体的测定第32-35页
    4.1 实验材料第32页
        4.1.1 培养基第32页
        4.1.2 供试菌株第32页
    4.2 实验步骤第32页
        4.2.1 S-16产生的气体对核盘菌的抑制效果第32页
        4.2.2 挥发物质的收集与GC-MS测定第32页
        4.2.3 挥发性物质具体组分对核盘菌抑制作用第32页
    4.3 结果与分析第32-34页
        4.3.1 S-16产生气体对核盘菌的抑制效果第32-33页
        4.3.2 挥发性物质的收集与GC-MS测定第33-34页
        4.3.3 挥发性气体各组分物质对核盘菌抑制作用第34页
    4.4 结论与讨论第34-35页
5 不同培养条件对核盘菌菌核形成及生长情况的影响第35-42页
    5.1 实验材料第35页
        5.1.1 培养基第35页
        5.1.2 供试菌株第35页
    5.2 实验方法第35-36页
        5.2.1 不同培养基种类对核盘菌生长情况的影响第35-36页
        5.2.2 不同碳源对核盘菌生长情况的影响第36页
        5.2.3 不同氮源对核盘菌生长情况的影响第36页
        5.2.4 不同PDA培养基厚度对核盘菌生长情况的影响第36页
        5.2.5 PDA培养基中不同葡萄糖含量对核盘菌生长情况的影响第36页
        5.2.6 不同pH对核盘菌生长情况的影响第36页
    5.3 结果与分析第36-42页
        5.3.1 不同培养基种类对核盘菌生长情况的影响第36-37页
        5.3.2 不同碳源对核盘菌生长情况的影响第37-38页
        5.3.3 不同氮源对核盘菌生长情况的影响第38-39页
        5.3.4 不同PDA培养基体积对核盘菌生长情况的影响第39-40页
        5.3.5 PDA培养基中不同葡萄糖含量对核盘菌菌核形成及生长情况的影响第40页
        5.3.6 不同pH对核盘菌菌核形成及生长情况的影响第40-42页
    5.4 结果与分析第42页
6 结论第42-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-53页
作者简介第53页

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