| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-26页 |
| 1.1 赤潮及其危害 | 第11-12页 |
| 1.2 主要研究对象 | 第12-14页 |
| 1.2.1 东海原甲藻 | 第12-13页 |
| 1.2.2 中肋骨条藻 | 第13-14页 |
| 1.3 现阶段鉴别和计量赤潮藻的主要技术和方法 | 第14-17页 |
| 1.3.1 在形态学基础上的检测分析方法 | 第14-15页 |
| 1.3.2 在核酸基础上建立的检测方法 | 第15页 |
| 1.3.3 抗体基础上建立的免疫学检测方法 | 第15-16页 |
| 1.3.4 多糖基础上建立的赤潮藻检测技术 | 第16页 |
| 1.3.5 在流式细胞术的基础上建立的检测方法 | 第16-17页 |
| 1.4 免疫学检测方法在赤潮藻检测中的应用 | 第17-24页 |
| 1.4.1 免疫荧光检测技术 | 第17-18页 |
| 1.4.2 免疫磁性微粒技术 | 第18页 |
| 1.4.3 免疫传感技术 | 第18-19页 |
| 1.4.4 酶联免疫分析技术 | 第19-24页 |
| 1.5 小结 | 第24-26页 |
| 第二章 抗体的制备和纯化 | 第26-38页 |
| 2.1 多克隆抗体的制备和纯化 | 第26-30页 |
| 2.1.1 抗原制备 | 第26-27页 |
| 2.1.2 实验动物免疫 | 第27页 |
| 2.1.3 血清分离 | 第27-28页 |
| 2.1.4 抗血清的亲和纯化 | 第28-29页 |
| 2.1.5 间接 ELISA 测定效价实验方法和步骤 | 第29-30页 |
| 2.2 单克隆抗体的制备和纯化 | 第30-34页 |
| 2.2.1 免疫原的制备和纯化 | 第31页 |
| 2.2.2 实验动物免疫 | 第31-32页 |
| 2.2.3 单克隆抗体的 ELISA 试验检测 | 第32页 |
| 2.2.4 细胞融合 | 第32-33页 |
| 2.2.5 筛选杂交瘤细胞 | 第33页 |
| 2.2.6 杂交瘤细胞的特异性筛选 | 第33-34页 |
| 2.2.7 单克隆抗体的生产 | 第34页 |
| 2.2.8 单克隆抗体的纯化 | 第34页 |
| 2.3 抗体效价结果 | 第34-37页 |
| 2.3.1 多克隆抗体效价检测结果 | 第34-36页 |
| 2.3.2 单克隆抗体效价检测结果 | 第36-37页 |
| 2.4 小结 | 第37-38页 |
| 第三章 赤潮藻 ELISA 检测方法的建立和应用 | 第38-56页 |
| 3.1 材料与方法 | 第38-40页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第39页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第39-40页 |
| 3.2 现场样品采集及处理 | 第40-41页 |
| 3.3 ELISA 实验条件的选择和优化 | 第41-43页 |
| 3.3.1 酶标抗体工作浓度的选择 | 第41-42页 |
| 3.3.2 抗原、抗体工作浓度的选择 | 第42-43页 |
| 3.3.3 封闭液和封闭时间的选择 | 第43页 |
| 3.4 双抗体夹心 ELISA 检测标准曲线的绘制及精确度的确定 | 第43-45页 |
| 3.4.1 标准曲线的绘制 | 第43-45页 |
| 3.4.2 稳定性检测 | 第45页 |
| 3.5 实验干扰因素分析 | 第45-46页 |
| 3.5.1 双抗体夹心 ELISA 检测特异性分析 | 第45页 |
| 3.5.2 海水中悬浮物质对检测的干扰 | 第45-46页 |
| 3.6 室内实验检测 | 第46页 |
| 3.6.1 单一藻种的检测 | 第46页 |
| 3.6.2 模拟样品的检测 | 第46页 |
| 3.7 实验结果 | 第46-56页 |
| 3.7.1 酶标抗体工作浓度的确定 | 第46-47页 |
| 3.7.2 单抗最佳包被稀释度和多克隆抗体的最适工作浓度 | 第47-48页 |
| 3.7.3 封闭液和封闭时间的确定 | 第48-49页 |
| 3.7.4 标准曲线拟合结果 | 第49-51页 |
| 3.7.5 稳定性检测结果 | 第51页 |
| 3.7.6 双抗体夹心 ELISA 检测特异性分析结果 | 第51-52页 |
| 3.7.7 海水中悬浮物质对检测的干扰结果分析 | 第52-54页 |
| 3.7.8 单一藻种的检测结果 | 第54-55页 |
| 3.7.9 模拟混合藻种的检测结果及分析 | 第55-56页 |
| 第四章 现场海水样品抗体定量法检测 | 第56-66页 |
| 4.1 材料方法 | 第56页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第56页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第56页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第56页 |
| 4.1.4 样品采集和处理 | 第56页 |
| 4.1.5 双抗体夹心 ELISA 检测方法步骤 | 第56页 |
| 4.2 显微镜计数和抗体定量检测计数结果 | 第56-59页 |
| 4.3 东海 863 示范海区中肋骨条藻和东海原甲藻浓度变化趋势 | 第59-61页 |
| 4.4 嵊泗海水浴场中肋骨条藻和东海原甲藻浓度变化趋势 | 第61-65页 |
| 4.5 小结 | 第65-66页 |
| 第五章 结论与展望 | 第66-69页 |
| 5.1 结论 | 第66-67页 |
| 5.2 前景展望 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 发表论文及申请专利 | 第77-78页 |
