| 致谢 | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 目录 | 第11-15页 |
| 中文摘要 | 第15-17页 |
| Abstract | 第17页 |
| 第一章 文献综述及研究进展 | 第18-41页 |
| 1 小菜蛾和寄生蜂研究的意义 | 第18-21页 |
| 1.1 小菜蛾及其危害 | 第18-19页 |
| 1.2 寄生蜂及其生物防治的作用 | 第19-21页 |
| 2 寄生蜂对寄主的生理调控 | 第21-24页 |
| 2.1 寄生蜂对寄主的免疫抑制和发育调控策略 | 第21-22页 |
| 2.1.1 寄生蜂对寄主的免疫抑制 | 第21-22页 |
| 2.1.2 寄生蜂对寄主发育调控策略 | 第22页 |
| 2.2 寄生蜂的三种主要寄生因子 | 第22-24页 |
| 2.2.1 寄生蜂毒液蛋白及其功能 | 第22-23页 |
| 2.2.3 寄生蜂畸形细胞及其功能 | 第23-24页 |
| 3 多分DNA病毒(PDV)概述 | 第24-34页 |
| 3.1 多分DNA病毒(PDVs) | 第24-27页 |
| 3.1.1 PDVs的生物学特性 | 第24-26页 |
| 3.1.2 PDV病毒粒子的形态结构 | 第26页 |
| 3.1.3 PDV的病毒起源 | 第26-27页 |
| 3.2 多分DNA病毒对寄主昆虫的作用 | 第27-29页 |
| 3.2.1 多分DNA病毒对寄主昆虫的免疫抑制作用 | 第27-28页 |
| 3.2.2 多分DNA病毒对寄主昆虫的发育调控影响 | 第28-29页 |
| 3.2.3 多分DNA病毒对寄主昆虫营养水平的影响 | 第29页 |
| 3.3 多分DNA病毒基因组、主要基因家族及其研究现状 | 第29-34页 |
| 3.3.1 PDV的基因组结构特点及其研究现状 | 第29-31页 |
| 3.3.2 PDV的主要基因家族及其表达功能 | 第31-34页 |
| 4 Ankyrin基因和PTP基因家族的功能和研究进展 | 第34-39页 |
| 4.1 Ankyrin基因蛋白 | 第34-37页 |
| 4.1.1 Ankyrin基因蛋白结构特点 | 第34-35页 |
| 4.1.2 Ankyrin基因蛋白功能 | 第35-36页 |
| 4.1.3 PDV中Ankyrin基因及其蛋白功能 | 第36-37页 |
| 4.2 蛋白酪氨酸磷酸酶(protein tyrosine phosphatases,PTPs) | 第37-39页 |
| 5 CvBV中Ankyrin家族基因启动子及其研究进展 | 第39-40页 |
| 6 本实验研究的目的和意义 | 第40-41页 |
| 第二章 基本材料与方法 | 第41-57页 |
| 1 养虫设备 | 第41-42页 |
| 1.1 全自动人工气候室 | 第41页 |
| 1.2 智能人工气候箱 | 第41页 |
| 1.3 养虫笼 | 第41页 |
| 1.4 产卵笼 | 第41页 |
| 1.5 保蜂盒及寄生盒 | 第41-42页 |
| 1.6 吸虫管 | 第42页 |
| 2 供试材料 | 第42页 |
| 2.1 供试蔬菜 | 第42页 |
| 2.2 虫源 | 第42页 |
| 3 供试昆虫的人工饲养 | 第42-44页 |
| 3.1 小菜蛾的饲养 | 第42-43页 |
| 3.2 寄生蜂的饲养 | 第43-44页 |
| 4 实验仪器及软件系统 | 第44-45页 |
| 4.1 实验仪器 | 第44页 |
| 4.2 软件系统 | 第44-45页 |
| 5 常用实验试剂及配制 | 第45-46页 |
| 5.1 工具酶及试剂盒 | 第45页 |
| 5.2 其它试剂 | 第45页 |
| 5.3 一般试剂的配制 | 第45-46页 |
| 6 常规实验方法 | 第46-57页 |
| 6.1 PDV病毒颗粒的收集及其DNA的提取 | 第46-47页 |
| 6.2 小菜蛾幼虫PDV病毒RNA的提取 | 第47-49页 |
| 6.3 cDNA第一链的合成 | 第49-50页 |
| 6.4 PCR反应 | 第50页 |
| 6.5 感受态细胞的制备 | 第50-51页 |
| 6.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第51页 |
| 6.7 凝胶回收目的片段 | 第51页 |
| 6.8 连接反应 | 第51-52页 |
| 6.9 转化与活化 | 第52页 |
| 6.10 质粒提取 | 第52-53页 |
| 6.11 3'、5'末端快速扩增(RACE) | 第53页 |
| 6.12 目的片段的双酶切 | 第53-54页 |
| 6.13 含报告基因的表达载体的重新构建 | 第54页 |
| 6.14 细胞传代培养 | 第54-55页 |
| 6.15 HEK-293细胞系转染 | 第55页 |
| 6.16 转染细胞后报告基因的检测 | 第55-57页 |
| 第三章 CvBV锚蛋白和蛋白酪氨酸磷酸酶基因的克隆及序列分析 | 第57-73页 |
| 1 材料与方法 | 第57-60页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第57页 |
| 1.2 菜蛾盘绒茧蜂寄生后小菜蛾血淋巴的收集 | 第57-58页 |
| 1.3 菜蛾盘绒茧蜂寄生后小菜蛾血淋巴RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第58页 |
| 1.4 引物设计 | 第58页 |
| 1.5 RACE | 第58页 |
| 1.6 生物信息学分析 | 第58-60页 |
| 2 结果与分析 | 第60-71页 |
| 2.1 CvBV-C2-2全长cDNA及DNA序列分析 | 第60-61页 |
| 2.2 CvBV-C12-2全长cDNA及DNA序列分析 | 第61-62页 |
| 2.3 CvBV-C12-5全长cDNA及DNA序列分析 | 第62页 |
| 2.4 CvBV-C12-11全长cDNA及DNA序列分析 | 第62页 |
| 2.5 CvBV-C14-5全长cDNA及DNA序列分析 | 第62页 |
| 2.6 CvBV-C14-6全长cDNA及DNA序列分析 | 第62-67页 |
| 2.7 CvBV-C28-1全长cDNA及DNA序列分析 | 第67-68页 |
| 2.8 蛋白序列同源相似性分析 | 第68-71页 |
| 2.8.1 Ankyrin家族CvBV-C2-2基因蛋白序列同源性分析 | 第68-69页 |
| 2.8.2 PTP家族CvBV-C12-2等基因蛋白序列同源性分析 | 第69-71页 |
| 3 结论 | 第71-73页 |
| 第四章 CvBV中Ankyrin基因CvBV-C17-4启动子序列初步鉴定 | 第73-80页 |
| 1 材料与方法 | 第73-75页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第73页 |
| 1.2 供试细胞 | 第73页 |
| 1.3 菜蛾盘绒茧蜂病毒粒子的收集及其DNA的提取 | 第73页 |
| 1.4 基因启动子序列的引物设计 | 第73-74页 |
| 1.5 目的条带的克隆、产物纯化 | 第74-75页 |
| 1.6 目的启动子条带和pGL3 Vector载体进行表达载体重构建 | 第75页 |
| 1.7 重构建载体转染HEK293细胞 | 第75页 |
| 1.8 荧光素酶活性检测 | 第75页 |
| 2 结果与分析 | 第75-79页 |
| 2.1 测序结果得到的目的启动子条带结构分析 | 第75-77页 |
| 2.2 获得目的启动子条带及其与pGL3 Vector载体进行表达载体重构建 | 第77-78页 |
| 2.3 荧光素酶活性检测 | 第78-79页 |
| 3 讨论 | 第79-80页 |
| 第五章 总讨论 | 第80-81页 |
| 本实验的创新之处 | 第81页 |
| 本实验的不足之处 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-91页 |
