中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语/符号说明 | 第11-12页 |
前言 | 第12-15页 |
研究现状、成果 | 第12-14页 |
研究目的、方法 | 第14-15页 |
一、CNTF基因修饰的大鼠BMSCs的构建 | 第15-29页 |
1.1 对象和方法 | 第15-17页 |
1.1.1 细胞、菌种与质粒 | 第15页 |
1.1.2 主要试剂 | 第15-16页 |
1.1.3 主要仪器、耗材 | 第16页 |
1.1.4 主要溶液及缓冲液 | 第16-17页 |
1.2 实验方法及流程 | 第17-23页 |
1.2.1 大鼠BMSCs培养 | 第17-18页 |
1.2.2 慢病毒穿梭质粒CNTF-dTomato的构建 | 第18-19页 |
1.2.3 慢病毒的包装 | 第19-20页 |
1.2.4 病毒原液的收获和浓缩 | 第20页 |
1.2.5 重组慢病毒感染BMSCs | 第20-21页 |
1.2.6 CNTF蛋白表达检测 | 第21-22页 |
1.2.7 CNTF-BMSCs诱导分化 | 第22页 |
1.2.8 CNTF-BMSCs分化潜能的鉴定 | 第22页 |
1.2.9 统计学分析方法 | 第22-23页 |
1.3 实验结果 | 第23-27页 |
1.3.1 慢病毒穿梭质粒CNTF-dTomato测序结果 | 第23-24页 |
1.3.2 重组慢病毒感染BMSCs的荧光鉴定 | 第24页 |
1.3.3 各组BMSCs不同时间细胞上清液中目的蛋白CNTF质量浓度 | 第24-26页 |
1.3.4 CNTF-BMSCs分化为成骨细胞和脂肪细胞的鉴定 | 第26-27页 |
1.4 讨论 | 第27-28页 |
1.4.1 中枢神经系统疾病干细胞及神经营养因子治疗 | 第27页 |
1.4.2 分泌型CNTF的表达 | 第27-28页 |
1.5 小结 | 第28-29页 |
二、CNTF基因修饰的BMSCs对大鼠RGCs的保护作用 | 第29-47页 |
2.1 对象和方法 | 第29-33页 |
2.1.1 实验动物及分组 | 第29页 |
2.1.2 主要试剂 | 第29-30页 |
2.1.3 主要仪器、耗材 | 第30-31页 |
2.1.4 主要溶液及缓冲液 | 第31-33页 |
2.2 实验方法 | 第33-39页 |
2.2.1 ONC动物模型建立及玻璃体腔内给药 | 第33-34页 |
2.2.2 注射细胞在眼内定位情况的观察 | 第34页 |
2.2.3 视网膜组织病理学观察 | 第34-35页 |
2.2.4 视网膜内CNTF表达检测 | 第35-36页 |
2.2.5 视网膜组织蛋白提取 | 第36页 |
2.2.6 BCA法测定蛋白浓度 | 第36-37页 |
2.2.7 视网膜内Caspase-3、Brn-3a蛋白表达水平检测 | 第37-39页 |
2.3 实验结果 | 第39-44页 |
2.3.1 注射细胞眼内定位 | 第39页 |
2.3.2 视网膜节细胞层细胞数变化 | 第39-40页 |
2.3.3 视网膜形态学改变 | 第40-41页 |
2.3.4 CNTF蛋白在视网膜的定位及表达 | 第41-43页 |
2.3.5 视网膜Caspase-3、Brn3a蛋白表达 | 第43-44页 |
2.4 讨论 | 第44-46页 |
2.4.1 RGCs损伤模型 | 第44-45页 |
2.4.2 CNTF-BMSCs对RGCs的保护作用 | 第45-46页 |
2.4.3 CNTF-BMSCs抑制Caspase-3活化 | 第46页 |
2.5 小结 | 第46-47页 |
结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第53-54页 |
综述 CNTF治疗视网膜损伤研究进展 | 第54-64页 |
综述参考文献 | 第60-64页 |
致谢 | 第64页 |