| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 前言 | 第10-25页 |
| 1.1 番木瓜畸形花叶病毒 | 第10-14页 |
| 1.1.1 PLDMV的分类地位与寄主范围 | 第11页 |
| 1.1.2 PLDMV在番木瓜上的症状及危害 | 第11-12页 |
| 1.1.3 PLDMV基因组研究 | 第12-14页 |
| 1.2 P1蛋白 | 第14页 |
| 1.2.1 P1的主要功能 | 第14页 |
| 1.2.2 P1的致病力基序 | 第14页 |
| 1.3 HC-Pro蛋白 | 第14-17页 |
| 1.3.1 HC-Pro的主要功能 | 第14-15页 |
| 1.3.2 HC-Pro的蚜传基序 | 第15页 |
| 1.3.3 HC-Pro的致病力基序 | 第15-17页 |
| 1.3.4 其他区域的致病力基因 | 第17页 |
| 1.4 交叉保护作用及其应用 | 第17-23页 |
| 1.4.1 交叉保护现象及作用机制 | 第17-18页 |
| 1.4.2 弱毒株系的获得 | 第18-20页 |
| 1.4.2.1 从自然环境中筛选获得 | 第18页 |
| 1.4.2.2 通过低温或高温诱变获得 | 第18-19页 |
| 1.4.2.3 使用物理或化学诱变获得 | 第19页 |
| 1.4.2.4 用现代分子生物技术获得 | 第19-20页 |
| 1.4.3 交叉保护在植物病毒病防治中的应用 | 第20-22页 |
| 1.4.3.1 交叉保护在柑橘衰退病毒(CTV)防治中的应用 | 第20-21页 |
| 1.4.3.2 交叉保护在西葫芦黄花叶病毒(ZYMV)防治中的应用 | 第21-22页 |
| 1.4.3.3 交叉保护在番木瓜环斑病毒(PRSV)防治中的应用 | 第22页 |
| 1.4.4 交叉保护存在的问题 | 第22-23页 |
| 1.4.4.1 株系专化性问题 | 第22-23页 |
| 1.4.4.2 作物和品种问题 | 第23页 |
| 1.4.4.3 温度问题 | 第23页 |
| 1.4.4.4 交叉保护作用崩溃问题 | 第23页 |
| 1.5 本研究目的意义及技术路线 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-33页 |
| 2.1 试验材料 | 第25-27页 |
| 2.1.1 病毒毒源和供试植物 | 第25页 |
| 2.1.2 菌株、载体及血清 | 第25-26页 |
| 2.1.3 酶与各种生化试剂 | 第26页 |
| 2.1.4 主要实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-33页 |
| 2.2.1 获得PLDMV弱毒突变体 | 第27-31页 |
| 2.2.1.1 马铃薯Y病毒属病毒强弱毒株氨基酸序列的多重比对分析 | 第27页 |
| 2.2.1.2 设计引物 | 第27-28页 |
| 2.2.1.3 PLDMV-DF突变体的构建 | 第28-29页 |
| 2.2.1.4 制备和转化农杆菌电转化感受态细胞 | 第29页 |
| 2.2.1.5 阳性克隆的鉴定、胶回收、质粒提取以及农杆菌注射接种 | 第29-30页 |
| 2.2.1.6 突变体克隆侵染性检测和接种后的症状观察 | 第30页 |
| 2.2.1.7 RT-PCR检测病毒 | 第30页 |
| 2.2.1.8 检测病毒积累量 | 第30-31页 |
| 2.2.2 初步的交叉保护实验 | 第31-33页 |
| 2.2.2.1 强毒株p35S-PLDMV-RFP的初步攻毒实验 | 第31-32页 |
| 2.2.2.2 p35S-PLDMV-RFP攻毒后的荧光检测 | 第32-33页 |
| 3 结果 | 第33-46页 |
| 3.1 马铃薯Y病毒属病毒氨基酸序列比对分析及突变位点筛选 | 第33-35页 |
| 3.2 PLDMV-DF弱毒突变体克隆的构建 | 第35-37页 |
| 3.3 弱毒突变体农杆菌注射接种番木瓜的病症观察和鉴定 | 第37-44页 |
| 3.3.1 症状相关内容 | 第37-42页 |
| 3.3.2 RT-PCR和ELISA检测 | 第42-43页 |
| 3.3.3 侵染性分析 | 第43-44页 |
| 3.4 弱毒突变体的交叉保护效果初步评估 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-49页 |
| 4.1 PLDMV-DF致病力分析 | 第46-48页 |
| 4.2 交叉保护作用初步效果比较 | 第48-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-59页 |
| 附录 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
