| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略语词汇表 | 第8-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-22页 |
| 1.1 布氏田鼠简介 | 第14-15页 |
| 1.2 植物次生代谢物与6-MBOA | 第15-18页 |
| 1.2.1 植物的次生代谢物 | 第15-16页 |
| 1.2.2 植物次生代谢物对植食性动物的影响 | 第16-17页 |
| 1.2.3 6MBOA及其作用 | 第17-18页 |
| 1.3 动植物协同进化 | 第18-19页 |
| 1.4 KissllGpr54 信号系统 | 第19-21页 |
| 1.4.1 Kiss1基因与kisspeptins | 第19页 |
| 1.4.2 Gpr54 概述 | 第19-20页 |
| 1.4.3 KissllGpr54系统在生殖中的作用 | 第20-21页 |
| 1.5 类固醇激素合成相关蛋白 | 第21-22页 |
| 1.5.1 类固醇激素合成急性调节蛋白 | 第21-22页 |
| 1.5.2 细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶 | 第22页 |
| 1.5.3 细胞色素P450芳香化酶 | 第22页 |
| 2 研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 3 材料与方法 | 第23-42页 |
| 3.1 实验仪器 | 第23-24页 |
| 3.2 主要试剂 | 第24-25页 |
| 3.3 主要试剂配制 | 第25-27页 |
| 3.4 实验动物 | 第27页 |
| 3.4.1 动物繁殖系的建立 | 第27页 |
| 3.4.2 动物分组与处理 | 第27页 |
| 3.5 方法 | 第27-42页 |
| 3.5.1 血清激素含量测定 | 第27-31页 |
| 3.5.1.1 血清激素含量测定方法 | 第27-28页 |
| 3.5.1.2 标准曲线的制作 | 第28-31页 |
| 3.5.2 布氏田鼠下丘脑Kiss1、Gpr54和Gnrh以及性腺Star、Cyp11al和Cyp19基因cDNA片段的克隆 | 第31-35页 |
| 3.5.2.1 总RNA的抽提 | 第31-32页 |
| 3.5.2.2 RNA质量检测 | 第32-33页 |
| 3.5.2.3 RNA反转录 | 第33-34页 |
| 3.5.2.4 引物设计与合成 | 第34页 |
| 3.5.2.5 PCR反应 | 第34-35页 |
| 3.5.2.6 序列比对与分析 | 第35页 |
| 3.5.3 实时荧光定量PCR检测基因的mRNA表达水平 | 第35-37页 |
| 3.5.3.1 实时荧光定量引物的设计及鉴定 | 第35-36页 |
| 3.5.3.2 实时荧光定量PCR检测 | 第36-37页 |
| 3.5.4 Western blot检测布氏田鼠睾丸和卵巢中StAR、P450scc和P450arom含量的变化 | 第37-42页 |
| 3.5.4.1 蛋白样品制备 | 第37页 |
| 3.5.4.2 蛋白质含量测定 | 第37-39页 |
| 3.5.4.3 SDS-PAGE电泳 | 第39-40页 |
| 3.5.4.4 转膜 | 第40-41页 |
| 3.5.4.5 封闭 | 第41页 |
| 3.5.4.6 抗体反应 | 第41页 |
| 3.5.4.7 化学发光,显影,定影 | 第41-42页 |
| 3.6 数据处理 | 第42页 |
| 4 结果 | 第42-60页 |
| 4.1 6-MBOA对布氏田鼠体重、性腺指数及生殖相关激素水平的影响 | 第42-46页 |
| 4.1.1 6-MBOA对雄性布氏田鼠体重及性腺指数的影响 | 第42-43页 |
| 4.1.2 6-MBOA对雄性布氏田鼠血清激素水平的影响 | 第43-44页 |
| 4.1.3 6-MBOA对雌性布氏田鼠体重及性腺指数的影响 | 第44-45页 |
| 4.1.4 6-MBOA对雌性布氏田鼠血清激素水平的影响 | 第45-46页 |
| 4.2 下丘脑Kiss1、Gpr54和Gnrh基因mRNA表达量的变化 | 第46-53页 |
| 4.2.1 下丘脑总RNA的提取 | 第46-47页 |
| 4.2.2 布氏田鼠下丘脑Kiss1、Gpr54和Gnrh基因cDNA片段的TA克隆及测序 | 第47-48页 |
| 4.2.3 目的基因与内参基因实时荧光定量PCR引物的鉴定 | 第48-50页 |
| 4.2.4 6-MBOA对布氏田鼠下丘脑Kiss1、Gpr54和Gnrh基因mRNA表达量的影响 | 第50-53页 |
| 4.2.4.1 6-MBOA对雄性布氏田鼠下丘脑AVPV Kiss1基因mRNA表达量的影响 | 第50页 |
| 4.2.4.2 6-MBOA对雄性布氏田鼠下丘脑ARC中Kiss1、Gpr54和Gnrh基因mRNA表达量的影响 | 第50-51页 |
| 4.2.4.3 6-MBOA对雌性布氏田鼠下丘脑AVPV Kiss1基因mRNA表达量的影响 | 第51-52页 |
| 4.2.4.4 6-MBOA对雌性布氏田鼠下丘脑ARC中Kiss1、Gpr54和Gnrh基因mRNA表达量的影响 | 第52-53页 |
| 4.3 布氏田鼠卵巢和睾丸Star、Cyp11al和Cyp19 mRNA表达量的变化 | 第53-58页 |
| 4.3.1 卵巢和睾丸总RNA的提取 | 第53-54页 |
| 4.3.2 布氏田鼠卵巢和睾丸Star、Cyp11al和Cyp19基因cDNA片段的TA克隆及测序 | 第54-55页 |
| 4.3.3 目的基因与内参基因实时荧光定量PCR引物的鉴定 | 第55-57页 |
| 4.3.4 6-MBOA对布氏田鼠卵巢和睾丸Star,Cyp11al和Cyp19 mRNA表达量的影响 | 第57-58页 |
| 4.3.4.1 6-MBOA对雄性布氏田鼠睾丸Star、Cyp11al和Cyp19 mRNA表达量的影响 | 第57页 |
| 4.3.4.2 6-MBOA对雌性布氏田鼠卵巢Star、Cyp11al和Cyp19 mRNA表达量的影响 | 第57-58页 |
| 4.4 布氏田鼠卵巢和睾丸StAR、P450scc和P450arom含量的变化 | 第58-60页 |
| 4.4.1 6-MBOA对雄性布氏田鼠睾丸StAR、P450scc和P450arom含量的影响 | 第58-59页 |
| 4.4.2 6-MBOA对雌性布氏田鼠卵巢StAR、P450scc和P450arom含量的影响 | 第59-60页 |
| 5 讨论 | 第60-64页 |
| 5.1 6-MBOA对布氏田鼠体重和性腺指数的影响 | 第60-61页 |
| 5.2 6-MBOA对布氏田鼠相关激素水平的影响 | 第61-62页 |
| 5.3 6-MBOA对布氏田鼠下丘脑Kiss1、Gpr54和Gnrh基因表达的影响 | 第62页 |
| 5.4 6-MBOA对布氏田鼠卵巢和睾丸StAR、P450scc和P450arom mRNA水平和蛋白水平的影响 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读学位期间论文发表和参加课题情况 | 第75-76页 |
