| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-6页 |
| 0 引言 | 第6-8页 |
| 1 材料 | 第8-9页 |
| ·质粒和菌株 | 第8页 |
| ·试剂 | 第8页 |
| ·仪器 | 第8-9页 |
| ·培养基 | 第9页 |
| 2 方法 | 第9-20页 |
| ·D2株碱性磷酸酶的SDS-PAGE电泳和氨基酸序列的测定 | 第9-10页 |
| ·D2株碱性磷酸酶基因组的提取 | 第10-11页 |
| ·D2株碱性磷酸酶基因的测定 | 第11-15页 |
| ·D2株碱性磷酸酶基因表达载体的构建 | 第15-17页 |
| ·目的基因的诱导表达 | 第17-18页 |
| ·重组蛋白的Western Blot鉴定 | 第18页 |
| ·D2株碱性磷酸酶活性的测定 | 第18-20页 |
| 3 结果 | 第20-27页 |
| ·D2株碱性磷酸酶的SDS-PAGE和氨基酸序列的测定 | 第20-21页 |
| ·D2株碱性磷酸酶的克隆PCR扩增 | 第21-22页 |
| ·D2株碱性磷酸酶的PCR扩增 | 第21页 |
| ·重组质粒的筛选与酶切鉴定 | 第21-22页 |
| ·PCR测序结果及分析 | 第22-24页 |
| ·D2株碱性磷酸酶基因的测序结果 | 第22页 |
| ·嗜麦芽寡养单胞菌D2株AKP的氨基酸序列 | 第22-23页 |
| ·D2株碱性磷酸酶基因序列中的信号肽序列 | 第23页 |
| ·D2株碱性磷酸酶氨基酸序列与K279a与R551-3碱性磷酸酶蛋白比对 | 第23页 |
| ·D2株碱性磷酸酶氨基酸序列与ESI-MS/MS测序所得肽段比对 | 第23页 |
| ·D2株碱性磷酸酶氨基酸序列与其它菌株相关蛋白的比对 | 第23-24页 |
| ·D2株碱性磷酸酶表达PCR结果 | 第24-25页 |
| ·D2株碱性磷酸酶ORF的PCR扩增 | 第24-25页 |
| ·表达重组质粒的酶切鉴定结果 | 第25页 |
| ·目的基因在大肠杆菌中的诱导表达和Western Blot鉴定 | 第25-26页 |
| ·目的基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第25-26页 |
| ·Western Blot鉴定重组蛋白 | 第26页 |
| ·D2株蛋白碱性磷酸酶活性的测定 | 第26-27页 |
| 4 讨论 | 第27-31页 |
| 5 结论 | 第31-32页 |
| 附图 | 第32-35页 |
| 参考文献 | 第35-37页 |
| 综述:基因工程原核高效表达系统的研究进展 | 第37-52页 |
| 攻读学位期间成果 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-55页 |
