摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
缩略语表 | 第8-9页 |
1. 前言 | 第9-16页 |
1.1. 课题的提出 | 第9页 |
1.2. 柑橘黄龙病的病原研究 | 第9-10页 |
1.3. 黄龙病的检测 | 第10-11页 |
1.4. 柑橘黄龙病的防治 | 第11-12页 |
1.5. 柑橘黄龙病致病机理的研究进展 | 第12-14页 |
1.6. β-酮脂酰-ACP还原酶的特性与相关研究 | 第14-15页 |
1.7. 研究的目的和意义 | 第15-16页 |
2. 材料和方法 | 第16-27页 |
2.1. 材料 | 第16页 |
2.1.1. 柑橘材料 | 第16页 |
2.1.2. 细菌菌株和质粒 | 第16页 |
2.1.3. 主要试剂 | 第16页 |
2.1.4. 主要设备和仪器 | 第16页 |
2.2. 方法 | 第16-27页 |
2.2.1. 主要溶液的配制(参见TaKaRa商品目录) | 第16-18页 |
2.2.2. 对柑橘进行生理指标的测定 | 第18-21页 |
2.2.3. FabG的克隆 | 第21-23页 |
2.2.4. 建立原核表达载体 | 第23-25页 |
2.2.5. 目的蛋白的诱导表达及最佳条件筛选 | 第25-27页 |
3. 结果与分析 | 第27-41页 |
3.1. 感染柑橘黄龙病植株的生理指标测定 | 第27-33页 |
3.1.1. 蒽酮比色法测定可溶性糖 | 第27-28页 |
3.1.2. 碘显色法测定总淀粉含量 | 第28-29页 |
3.1.3. 双波长法测定直链淀粉、支链淀粉的含量 | 第29-31页 |
3.1.4. 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量 | 第31-32页 |
3.1.5. 气相色谱分析分析糖酸含量 | 第32-33页 |
3.2. FabG基因的克隆 | 第33-35页 |
3.2.1. FabG基因的PCR扩增 | 第33页 |
3.2.2. 目的基因片段连接pMD19-T载体 | 第33-34页 |
3.2.3. 目的片段测序 | 第34-35页 |
3.3. 构建表达载体 | 第35页 |
3.3.1. 连接表达载体PET-28a | 第35页 |
3.4. 蛋白的诱导表达及最佳筛选条件 | 第35-41页 |
3.4.1. 小量表达目标蛋白 | 第35-36页 |
3.4.2. 筛选IPTG的浓度 | 第36-37页 |
3.4.3. 筛选诱导温度 | 第37页 |
3.4.4. 影响目标蛋白可溶性的条件 | 第37-41页 |
4. 讨论 | 第41-44页 |
4.1. 淀粉的积累与柑橘黄龙病 | 第41页 |
4.2. 代谢紊乱与柑橘黄龙病 | 第41-42页 |
4.3. FabG蛋白的溶解性 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-51页 |
附录 | 第51-52页 |
致谢 | 第52页 |