摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-8页 |
第1章 引言 | 第15-25页 |
1.1 微生物降解石油研究进展 | 第15-17页 |
1.1.1 石油污染的生物修复 | 第15-16页 |
1.1.2 微生物修复的影响因素 | 第16-17页 |
1.2 绿色荧光蛋白 | 第17-19页 |
1.2.1 绿色荧光蛋白在微生物示踪中的作用 | 第18-19页 |
1.3 微宇宙系统 | 第19-21页 |
1.3.1 微宇宙系统在研究降解中的应用 | 第20-21页 |
1.4 创新性 | 第21-22页 |
1.5 研究基础 | 第22-23页 |
1.6 研究目的与意义 | 第23-24页 |
1.7 技术路线 | 第24-25页 |
第2章 增强型绿色荧光蛋白菌株构建 | 第25-37页 |
2.1 材料与仪器 | 第25-26页 |
2.1.1 实验材料 | 第25-26页 |
2.1.2 实验仪器 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-31页 |
2.2.1 质粒构建 | 第26-29页 |
2.2.2 荧光标记 | 第29-30页 |
2.2.3 荧光检测 | 第30页 |
2.2.4 插入位点检测 | 第30-31页 |
2.3 实验结果 | 第31-35页 |
2.3.1 质粒构建 | 第31-32页 |
2.3.2 荧光检测 | 第32-33页 |
2.3.3 插入位点检测 | 第33-35页 |
2.4 本章小结 | 第35-37页 |
第3章 微宇宙体系构建及Acinetobactersp.HC8-3S-9的石油降解实验 | 第37-55页 |
3.1 材料与仪器 | 第37-38页 |
3.1.1 实验材料 | 第37页 |
3.1.2 实验仪器 | 第37-38页 |
3.2 实验方法 | 第38-41页 |
3.2.1 微宇宙体系构建 | 第38-39页 |
3.2.2 YSI多参数水质分析仪环境数据采集 | 第39页 |
3.2.3 萃取微宇宙体系中石油烃组分 | 第39-40页 |
3.2.3.1 海水中石油烃萃取 | 第39页 |
3.2.3.2 沉积物中石油烃的萃取 | 第39-40页 |
3.2.4 层析分离 | 第40页 |
3.2.5 紫外分光光度法检测石油烃 | 第40页 |
3.2.6 沉积物样品总碳氮、有机碳氮的测定 | 第40-41页 |
3.2.6.1 沉积物样品中总碳氮处理方法 | 第40页 |
3.2.6.2 沉积物样品中有机碳氮处理方法 | 第40-41页 |
3.2.7 微宇宙体系中荧光检测 | 第41页 |
3.2.8 微宇宙体系中水体营养盐测定 | 第41页 |
3.3 实验结果 | 第41-53页 |
3.3.1 YSI水质分析仪数据 | 第41-42页 |
3.3.2 石油烃降解曲线 | 第42-44页 |
3.3.3 沉积物样品中总碳氮、有机碳氮含量 | 第44-47页 |
3.3.4 水体营养盐检测数据 | 第47-51页 |
3.3.5 荧光显微检测 | 第51页 |
3.3.6 环境因子相关性分析 | 第51-53页 |
3.4 本章小结 | 第53-55页 |
第4章 工程菌对土著菌群落结构的影响研究 | 第55-81页 |
4.1 材料与仪器 | 第55页 |
4.1.1 实验材料 | 第55页 |
4.1.2 实验仪器 | 第55页 |
4.1.3 分析软件 | 第55页 |
4.2 实验方法 | 第55-57页 |
4.2.1 提取微宇宙环境样品DNA | 第55页 |
4.2.2 Nanodrop测定DNA浓度 | 第55页 |
4.2.3 实时荧光定量PCR检测egfp基因拷贝数 | 第55-56页 |
4.2.3.1 绘制标准曲线 | 第56页 |
4.2.3.2 微宇宙环境样品PCR检测 | 第56页 |
4.2.4 分析微生物群落结构 | 第56-57页 |
4.3 实验结果 | 第57-80页 |
4.3.1 Nanodrop实验结果 | 第57-58页 |
4.3.2 标准曲线绘制 | 第58-59页 |
4.3.3 环境样品荧光定量PCR结果 | 第59-60页 |
4.3.4 测序结果概况 | 第60-63页 |
4.3.5 Alpha多样性指数分析 | 第63-66页 |
4.3.6 稀释曲线分析 | 第66页 |
4.3.7 微宇宙体系各组别微生物群落组成分析 | 第66-71页 |
4.3.8 样本比较分析 | 第71-72页 |
4.3.9 组间显著性差异检验 | 第72-80页 |
4.3.9.1 多组检验 | 第73-78页 |
4.3.9.2 两样本显著性差异检验 | 第78-80页 |
4.4 本章小结 | 第80-81页 |
第5章 结论与展望 | 第81-85页 |
5.1 实验结论 | 第81-82页 |
5.2 不足与展望 | 第82-85页 |
参考文献 | 第85-93页 |
附录 | 第93-101页 |
致谢 | 第101-103页 |
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第103页 |