摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第11-23页 |
1.1 毛蕊异黄酮(calycosin) | 第11-12页 |
1.2 线虫(Caenorkabditiselegans) | 第12-18页 |
1.2.1 自然史 | 第12-13页 |
1.2.2 生命周期 | 第13页 |
1.2.3 选择线虫作为模式生物的优势 | 第13-14页 |
1.2.4 线虫生命周期的调节 | 第14-18页 |
1.3 DAF-16 | 第18-21页 |
1.3.1 DAF-16的结构 | 第18页 |
1.3.2 DAF-16/FOXO的上游信号通路 | 第18-19页 |
1.3.3 DAF-16的活性调节 | 第19-20页 |
1.3.4 DAF-16的下游基因 | 第20页 |
1.3.5 UNC-43参与的CAMKII信号通路 | 第20-21页 |
1.4 本论文的研究内容 | 第21-23页 |
第2章 秀丽隐杆线虫的一般培养 | 第23-31页 |
2.1 实验材料、试剂和仪器 | 第23-24页 |
2.1.1 线虫、菌株 | 第23页 |
2.1.2 实验试剂 | 第23-24页 |
2.1.3 实验仪器 | 第24页 |
2.2 培养基及所用缓冲液配方 | 第24-27页 |
2.2.1 线虫生长固体培养基(NematodeGrowthMedium,NGM). | 第24-25页 |
2.2.2 线虫生长液体培养基(S-Medium) | 第25-26页 |
2.2.3 LB液体培养基 | 第26页 |
2.2.4 LB固体培养基 | 第26-27页 |
2.2.5 缓冲液 | 第27页 |
2.3 秀丽隐杆线虫的一般培养方法 | 第27-30页 |
2.3.1 E.coliOP50的培养和接种 | 第27-28页 |
2.3.2 线虫的转移/传代方法 | 第28页 |
2.3.3 线虫的同期化 | 第28-29页 |
2.3.4 线虫的冻存与复苏 | 第29页 |
2.3.5 线虫培养过程中的杂菌去除方法 | 第29-30页 |
2.4 小结 | 第30-31页 |
第3章 毛蕊异黄酮对秀丽隐杆线虫寿命的延长作用 | 第31-43页 |
3.1 实验材料、试剂和仪器 | 第31-32页 |
3.1.1 线虫、菌株 | 第31页 |
3.1.2 实验试剂 | 第31页 |
3.1.3 实验仪器 | 第31-32页 |
3.2 实验方法 | 第32-36页 |
3.2.1 毛蕊异黄酮贮液的配制和保存 | 第32页 |
3.2.2 E.coliOP50的灭活 | 第32页 |
3.2.3 线虫培养基(NGM)的配制 | 第32-33页 |
3.2.4 E.coliOP50菌液的配制 | 第33页 |
3.2.5 线虫寿命实验 | 第33-34页 |
3.2.6 线虫压力应激实验 | 第34页 |
3.2.7 急性氧化应激实验 | 第34-35页 |
3.2.8 急性热应激实验 | 第35页 |
3.2.9 线虫体内活性氧簇(ROS)检测 | 第35页 |
3.2.10 线虫生殖能力检测 | 第35-36页 |
3.2.11 线虫咽泵实验 | 第36页 |
3.2.12 统计学方法 | 第36页 |
3.3 实验结果 | 第36-42页 |
3.3.1 线虫寿命实验结果 | 第36-38页 |
3.3.2 线虫压力应激实验结果 | 第38页 |
3.3.3 急性氧应激实验结果 | 第38-39页 |
3.3.4 急性热应激实验结果 | 第39-40页 |
3.3.5 线虫体内ROS检测实验结果 | 第40页 |
3.3.6 线虫限食途径实验结果 | 第40-42页 |
3.4 小结 | 第42-43页 |
第4章 毛蕊异黄酮对线虫延寿作用的分子机制研究 | 第43-55页 |
4.1 实验材料、试剂和仪器 | 第43页 |
4.1.1 线虫、菌株 | 第43页 |
4.1.2 实验试剂 | 第43页 |
4.1.3 实验仪器 | 第43页 |
4.2 实验方法 | 第43-47页 |
4.2.1 daf-2(e1370),daf-16(mgDf50),age-1(hx546)突变株寿命实验 | 第43-44页 |
4.2.2 daf-16的基因表达 | 第44-46页 |
4.2.3 DAF-16与SKN-1的亚细胞定位实验 | 第46页 |
4.2.4 实时定量RT-PCR实验 | 第46-47页 |
4.2.5 统计学方法 | 第47页 |
4.3 实验结果 | 第47-54页 |
4.3.1 毛蕊异黄酮对胰岛素信号通路的影响 | 第47-51页 |
4.3.2 受毛蕊异黄酮调控的转录因子 | 第51-53页 |
4.3.3 UNC-43在毛蕊异黄酮延长线虫寿命中的作用 | 第53-54页 |
4.4 小结 | 第54-55页 |
第5章 讨论与展望 | 第55-59页 |
5.1 讨论 | 第55-57页 |
5.1.1 讨论 | 第55-56页 |
5.1.2 结论 | 第56-57页 |
5.2 展望 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
发表论文和科研情况说明 | 第67-69页 |
致谢 | 第69-70页 |