| CONTENTS | 第8-12页 |
| 摘要 | 第12-14页 |
| ABSTRACT | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第16-28页 |
| 1.1 植物miRNA概述 | 第16-22页 |
| 1.1.1 miRNA的简介 | 第16页 |
| 1.1.2 植物中miRNA的生物学特性 | 第16-17页 |
| 1.1.3 miRNA的生物合成与作用机制 | 第17-18页 |
| 1.1.4 植物miRNA的起源与进化 | 第18-19页 |
| 1.1.5 植物miRNA的生物学功能 | 第19-22页 |
| 1.1.5.1 miRNAs调控植物器官发育 | 第19-20页 |
| 1.1.5.2 miRNAs参与植物信号转导 | 第20-21页 |
| 1.1.5.3 miRNAs参与植物胁迫应答 | 第21-22页 |
| 1.2 植物miRNA的鉴定与研究 | 第22-26页 |
| 1.2.1 发现植物miRNA的方法 | 第23页 |
| 1.2.2 生物信息学法预测miRNAs | 第23-24页 |
| 1.2.3 植物miRNA的预测策略 | 第24-25页 |
| 1.2.4 植物miRNA靶基因的研究策略 | 第25-26页 |
| 1.3 本研究的目的、意义与内容 | 第26-28页 |
| 1.3.1 研究目的与意义 | 第26-27页 |
| 1.3.2 研究的主要内容 | 第27-28页 |
| 第二章 花生miRNA的预测和靶基因的生物信息学分析 | 第28-40页 |
| 2.1 花生miRNAs的生物信息学预测 | 第28-30页 |
| 2.1.1 候选序列的数据来源 | 第28页 |
| 2.1.2 花生的EST序列和GSS序列 | 第28页 |
| 2.1.3 花生miRNAs的生物信息学预测 | 第28-29页 |
| 2.1.4 花生miRNAs的特性分析 | 第29-30页 |
| 2.2 花生miRNA靶基因的预测 | 第30页 |
| 2.2.1 花生miRNA靶基因的预测 | 第30页 |
| 2.2.2 花生miRNA靶基因的功能分析 | 第30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-37页 |
| 2.3.1 花生miRNAs的预测结果 | 第30-31页 |
| 2.3.2 花生miRNAs的特性分析 | 第31-36页 |
| 2.3.3 花生miRNAs的靶基因 | 第36页 |
| 2.3.4 花生miRNAs靶基因的功能分析 | 第36-37页 |
| 2.4 讨论 | 第37-40页 |
| 第三章 花生miRNA的实验验证 | 第40-50页 |
| 3.1 材料、试剂和仪器 | 第40页 |
| 3.1.1 材料 | 第40页 |
| 3.1.2 试剂与药品 | 第40页 |
| 3.2 花生miRNAs RT-PCR检验方法与步骤 | 第40-47页 |
| 3.2.1 花生miRNAs RT-PCR检测原理 | 第40-41页 |
| 3.2.2 引物设计 | 第41-44页 |
| 3.2.3 花生miRNA的提取 | 第44-45页 |
| 3.2.3.1 miRNA提取准备工作 | 第44页 |
| 3.2.3.2 miRNA的提取 | 第44-45页 |
| 3.2.3.3 miRNA检测 | 第45页 |
| 3.2.4 miRNAs poly(A)加尾 | 第45页 |
| 3.2.5 反转录反应 | 第45-46页 |
| 3.2.6 PCR反应 | 第46页 |
| 3.2.7 凝胶电泳检测 | 第46-47页 |
| 3.3 结果与分析 | 第47-48页 |
| 3.4 讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 花生miRNA靶基因的实验验证 | 第50-60页 |
| 4.1 材料、试剂和仪器 | 第50页 |
| 4.1.1 材料 | 第50页 |
| 4.1.2 试剂与药品 | 第50页 |
| 4.2 花生miRNA靶基因的实验验证 | 第50-55页 |
| 4.2.1 靶基因实验验证的原理 | 第50-51页 |
| 4.2.2 5’-RACE巢式引物设计 | 第51页 |
| 4.2.3 RNA的提取分离 | 第51页 |
| 4.2.4 5’-RACE反应 | 第51-54页 |
| 4.2.4.1 反转录cDNA | 第51-52页 |
| 4.2.4.2 SAMRT RACE 5’端扩增 | 第52-54页 |
| 4.2.5 PCR产物回收 | 第54-55页 |
| 4.2.6 PCR产物的克隆鉴定 | 第55页 |
| 4.3 结果与分析 | 第55-58页 |
| 4.4 讨论 | 第58-60页 |
| 第五章 花生miRNA及其靶基因胁迫抗性的模式研究 | 第60-72页 |
| 5.1 材料、试剂和仪器 | 第60页 |
| 5.1.1 材料 | 第60页 |
| 5.1.2 试剂与药品 | 第60页 |
| 5.2 花生材料与胁迫处理 | 第60-61页 |
| 5.2.1 黄曲霉侵染 | 第60-61页 |
| 5.2.2 干旱胁迫 | 第61页 |
| 5.3 花生胁迫抗性miRNA及其靶基因的荧光定量分析 | 第61-63页 |
| 5.3.1 miRNA及其靶基因分离提取 | 第61页 |
| 5.3.2 RNA质量鉴定 | 第61页 |
| 5.3.3 miRNA和靶基因的反转录 | 第61-62页 |
| 5.3.4 引物设计 | 第62页 |
| 5.3.5 荧光定量分析 | 第62-63页 |
| 5.4 结果与分析 | 第63-68页 |
| 5.4.1 黄曲霉侵染胁迫对miRNA/靶基因表达量的影响 | 第63-66页 |
| 5.4.2 干旱胁迫对miRNA/靶基因表达量的影响 | 第66-68页 |
| 5.5 讨论 | 第68-72页 |
| 第六章 研究成果和展望 | 第72-74页 |
| 6.1 研究成果 | 第72-73页 |
| 6.2 研究创新 | 第73页 |
| 6.3 研究展望 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 研究生期间发表文章 | 第85-86页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第86页 |
