摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
文献综述 | 第13-35页 |
第一章 毛囊周期变化研究进展 | 第13-23页 |
1.1 毛囊的基本结构 | 第13-15页 |
1.2 毛囊周期 | 第15-17页 |
1.3 毛囊周期相关调控因子 | 第17-23页 |
1.3.1 休止期-生长期转化的分子机制 | 第17-18页 |
1.3.2 生长期 | 第18-19页 |
1.3.3 生长期-退行期转化的分子机制 | 第19-20页 |
1.3.4 休止期 | 第20-23页 |
第二章 FGF5基因研究进展 | 第23-28页 |
2.1 哺乳动物FGF家族 | 第23-25页 |
2.2 FGF5在毛囊周期调控中的研究进展 | 第25-27页 |
2.3 FGF5在胚胎发育中的研究进展 | 第27页 |
2.4 FGF5与癌症 | 第27-28页 |
第三章 动物转基因技术研究进展 | 第28-35页 |
3.1 动物转基因技术研究进展 | 第28-33页 |
3.1.1 动物转基因技术 | 第28-29页 |
3.1.2 逆转录病毒载体技术 | 第29页 |
3.1.3 基因打靶技术 | 第29-32页 |
3.1.4 PiggyBac转座子技术 | 第32-33页 |
3.2 本研究的目的意义 | 第33-35页 |
试验研究 | 第35-76页 |
第四章 陕北白绒山羊FGF5基因及其剪切体FGF5s的克隆、序列信息及表达分析研究 | 第35-45页 |
4.1 材料与方法 | 第35-37页 |
4.1.1 材料 | 第35-37页 |
4.2 结果与分析 | 第37-43页 |
4.2.1 组织总RNA的提取及检测 | 第37-38页 |
4.2.2 陕北白绒山羊FGF5及FGF5s CDS区的克隆 | 第38-39页 |
4.2.3 陕北白绒山羊FGF5和FGF5s基因CDS区序列分析 | 第39-41页 |
4.2.4 绝对定量PCR标准曲线的绘制 | 第41页 |
4.2.5 陕北白绒山羊12种组织中FGF5和FGF5s mRNA的表达 | 第41-42页 |
4.2.6 陕北白绒山羊次级毛囊周期发育过程中FGF5和FGF5s mRNA的表达 | 第42-43页 |
4.3 讨论 | 第43-44页 |
4.4 小结 | 第44-45页 |
第五章 FGF5和FGF5s重组腺病毒的构建与包装 | 第45-51页 |
5.1 材料与方法 | 第45-47页 |
5.1.1 材料 | 第45页 |
5.1.2 方法 | 第45-47页 |
5.2 结果与分析 | 第47-49页 |
5.2.1 穿梭载体pAdTrack-CMV-FGF5和pAdTrack-CMV-FGF5s的构建 | 第47-48页 |
5.2.2 重组腺病毒载体pAd-FGF5、pAd-FGF5s的构建 | 第48页 |
5.2.3 病毒的包装、扩繁和滴度测定 | 第48-49页 |
5.3 讨论 | 第49-50页 |
5.4 小结 | 第50-51页 |
第六章 陕北白绒山羊FGF5和FGF5s作用关系的研究 | 第51-63页 |
6.1 材料与方法 | 第51-54页 |
6.1.1 试验材料 | 第51页 |
6.1.2 方法 | 第51-54页 |
6.2 结果与分析 | 第54-59页 |
6.2.1 绒山羊初级毛囊和次级毛囊毛乳头细胞的原代分离培养与鉴定 | 第54-55页 |
6.2.2 FGFR1在绒山羊初级毛囊和次级毛囊毛乳头细胞中的表达 | 第55-56页 |
6.2.3 Ad-FGF5和Ad-FGF5s感染毛乳头细胞效果的检测 | 第56-57页 |
6.2.4 陕北白绒山羊FGF5和FGF5s作用关系的研究 | 第57-59页 |
6.3 讨论 | 第59-62页 |
6.4 小结 | 第62-63页 |
第七章 PiggyBac转座子介导的转FGF5s基因体细胞核移植陕北白绒山羊的制备 | 第63-76页 |
7.1 材料与方法 | 第63-67页 |
7.1.1 材料 | 第63页 |
7.1.2 方法 | 第63-67页 |
7.2 结果与分析 | 第67-74页 |
7.2.1 PB转座子介导的陕北白绒山羊FGF5s表达载体的构建 | 第67-68页 |
7.2.2 PB转座子系统在陕北白绒山羊胎儿成纤维细胞中的高效转座 | 第68-69页 |
7.2.3 陕北白绒山羊胎儿成纤维细胞嘌呤霉素最佳筛选浓度的测定 | 第69页 |
7.2.4 稳定转染FGF5s基因陕北白绒山羊胎儿成纤维细胞的筛选 | 第69页 |
7.2.5 转基因陕北白绒山羊胎儿成纤维细胞的鉴定 | 第69-70页 |
7.2.6 非毛囊特异表达FGF5s基因陕北白绒山羊的产生与鉴定 | 第70-71页 |
7.2.7 毛囊特异表达载体PB-EGFP-KAP6.1-FGF5s的构建 | 第71-72页 |
7.2.8 毛囊特异表达FGF5s基因陕北白绒山羊的产生 | 第72-73页 |
7.2.9 毛囊特异表达转FGF5s基因陕北白绒山羊的鉴定 | 第73-74页 |
7.3 讨论 | 第74页 |
7.4 小结 | 第74-76页 |
结论 | 第76-77页 |
创新点 | 第77-78页 |
还需进一步深入研究的问题 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-93页 |
附录 | 第93-104页 |
致谢 | 第104-105页 |
作者简介 | 第105页 |