| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 文章中的缩略词 | 第10-13页 |
| 1. 前言 | 第13-22页 |
| 1.1 杆状病毒 | 第13-14页 |
| 1.1.1 杆状病毒简介 | 第13页 |
| 1.1.2 杆状病毒的生活周期 | 第13-14页 |
| 1.2 杆状病毒基因的表达调控 | 第14-16页 |
| 1.3 杆状病毒RNA聚合酶 | 第16页 |
| 1.4 杆状病毒其他晚期表达因子 | 第16-19页 |
| 1.5 λ-Red同源重组技术及其在杆状病毒研究中的应用 | 第19-20页 |
| 1.6 Bac-to-Bac系统 | 第20页 |
| 1.7 瞬时表达系统 | 第20-21页 |
| 1.8 研究目的及意义 | 第21-22页 |
| 2. 实验材料 | 第22-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-26页 |
| 2.1.1 试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.2 常用溶液 | 第23页 |
| 2.1.3 菌株及细菌培养基 | 第23页 |
| 2.1.4 细胞系及细胞培养基 | 第23-24页 |
| 2.1.5 病毒及质粒 | 第24-25页 |
| 2.1.6 引物 | 第25-26页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第26-28页 |
| 3. 实验方法 | 第28-36页 |
| 3.1 基因克隆 | 第28-32页 |
| 3.1.1 重组质粒的构建 | 第28-31页 |
| 3.1.2 pKS-lef9Up-cat-lef9Dn重组质粒的构建 | 第31-32页 |
| 3.1.3 pFBD-vp39-Pgp16-egfp的构建 | 第32页 |
| 3.2 Bacmid的构建 | 第32-34页 |
| 3.2.1 电转化感受态细胞的制备 | 第32页 |
| 3.2.2 基因敲除 | 第32-33页 |
| 3.2.3 敲除Bacmid的验证 | 第33页 |
| 3.2.4 Bacmid转座 | 第33页 |
| 3.2.5 Bacmid纯化 | 第33-34页 |
| 3.3 转染和感染 | 第34-35页 |
| 3.4 荧光素酶活性检测 | 第35-36页 |
| 4. 实验结果 | 第36-51页 |
| 4.1 病毒RNA聚合酶亚基基因缺失Bacmid突变体的构建 | 第36-45页 |
| 4.1.1 lef4敲除突变体的构建 | 第36-38页 |
| 4.1.2 lef8敲除突变体的构建 | 第38-40页 |
| 4.1.3 lef9敲除突变体的构建 | 第40-43页 |
| 4.1.4 p47敲除突变体的构建 | 第43-45页 |
| 4.2 lef4、lef8、lef9、p47基因敲除对病毒复制的影响 | 第45-46页 |
| 4.3 lef4、lef8、lef9和p47基因敲除对晚期基因表达的影响 | 第46-49页 |
| 4.4 阿菲迪霉素和α-鹅膏覃碱对基因缺失突变体晚期基因表达的影响 | 第49-51页 |
| 5. 讨论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 在校期间发表的论文 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
