摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
目录 | 第8-11页 |
Content | 第11-14页 |
第一章 绪论 | 第14-26页 |
1.1 植物吸收氮素的相关背景 | 第14-16页 |
1.2 植物吸收氮素的分子机制 | 第16-19页 |
1.2.1 植物吸收利用硝态氮的分子机制 | 第16页 |
1.2.2 植物吸收利用铵态氮的分子机制 | 第16-19页 |
1.3 植物中其他具有铵转运能力的蛋白质 | 第19-20页 |
1.4 水葫芦概况 | 第20-23页 |
1.4.1 水葫芦概述 | 第20-21页 |
1.4.2 国内外关于水葫芦在水体修复中的研究进展 | 第21-23页 |
1.5 研究目的、意义及研究内容 | 第23-26页 |
1.5.1 研究目的、意义 | 第23-24页 |
1.5.2 研究内容 | 第24-26页 |
第二章 水葫芦铵转运蛋白EcAMT1全长克隆、功能鉴定及定量分析 | 第26-56页 |
2.1 引言 | 第26页 |
2.2 材料与方法 | 第26-43页 |
2.2.1 RNA的提取 | 第28-29页 |
2.2.2 RT-PCR | 第29-31页 |
2.2.3 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第31-32页 |
2.2.4 连接转化、测序 | 第32页 |
2.2.5 5'RACE | 第32-36页 |
2.2.6 3'RACE | 第36-38页 |
2.2.7 cDNA全长克隆 | 第38-39页 |
2.2.8 功能鉴定 | 第39-41页 |
2.2.9 荧光定量PCR | 第41-43页 |
2.3 结果分析 | 第43-53页 |
2.3.1 RNA,5’RACE和3’RACE产物电泳图 | 第43-45页 |
2.3.2 AMT1 cDNA全长 | 第45页 |
2.3.3 蛋白质性质 | 第45-47页 |
2.3.4 系统进化分析 | 第47-49页 |
2.3.5 EcAMT1蛋白结构分析 | 第49-51页 |
2.3.6 功能鉴定结果分析 | 第51-52页 |
2.3.7 荧光定量结果分析 | 第52-53页 |
2.4 讨论 | 第53-56页 |
第三章 AMT1/2/3基因片段克隆及其半定量RT-PCR | 第56-67页 |
3.1 引言 | 第56页 |
3.2 材料与方法 | 第56-59页 |
3.2.1 AMT2/3基因片段的克隆 | 第57-58页 |
3.2.2 半定量RT-PCR | 第58-59页 |
3.3 结果分析 | 第59-65页 |
3.3.1 RNA提取及循环数确定 | 第59-60页 |
3.3.2 AMT2/3系统进化分析 | 第60-62页 |
3.3.3 半定量结果 | 第62-65页 |
3.4 讨论 | 第65-67页 |
结论 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-74页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第74-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
附录 | 第77-82页 |
附录1 EcAMT1保守序列 | 第77-78页 |
附录2 EcAMT1保守序列片段BLAST比对 | 第78-79页 |
附录3 EcAMT1 cDNA全长 | 第79-81页 |
附录4 AMT2及AMT3核苷酸序列 | 第81-82页 |
附录5 AMT2、3保守序列片段BLAST比对 | 第82页 |