| 摘要 | 第8-12页 |
| ABSTRACT | 第12-17页 |
| 英文缩略语 | 第18-20页 |
| 第一部分 文献综述 | 第20-67页 |
| 综述一 腹泻型肠易激综合征肠黏膜屏障损伤的研究进展 | 第20-37页 |
| 参考文献 | 第27-37页 |
| 综述二 肠上皮细胞紧密连接的分子调控机制研究 | 第37-58页 |
| 参考文献 | 第49-58页 |
| 综述三 中医药调控肠黏膜屏障损伤的探索性研究 | 第58-67页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 第二部分 实验研究 | 第67-118页 |
| 前言 | 第67-69页 |
| 研究一 TNF-α诱导肠上皮细胞紧密连接损伤模型的建立与评价 | 第69-80页 |
| 一、材料和方法 | 第69-73页 |
| 1. 材料 | 第69-70页 |
| 1.1 实验细胞 | 第69页 |
| 1.2 主要试剂与耗材 | 第69页 |
| 1.3 实验仪器 | 第69-70页 |
| 2. 方法 | 第70-73页 |
| 2.1 肠上皮细胞紧密连接的建立与评价 | 第70-73页 |
| 2.2 TNF-α诱导肠上皮细胞紧密连接损伤模型的建立 | 第73页 |
| 2.3 统计分析方法 | 第73页 |
| 二、结果 | 第73-76页 |
| 1. 肠上皮细胞紧密连接评价指标 | 第73-75页 |
| 1.1 细胞单层完整性 | 第73-74页 |
| 1.2 碱性磷酸酶活力 | 第74-75页 |
| 1.3 细胞单层通透性 | 第75页 |
| 1.4 透射电镜下细胞形态 | 第75页 |
| 2. 不同浓度TNF-α对肠上皮细胞TER的影响 | 第75-76页 |
| 三、讨论 | 第76-80页 |
| 1. 肠上皮细胞紧密连接的建立与评价 | 第76-78页 |
| 2. TNF-α诱导肠上皮细胞紧密连接损伤模型的建立 | 第78-80页 |
| 研究二 肠安Ⅱ号方对TNF-α诱导肠上皮细胞紧密连接损伤的调控作用 | 第80-93页 |
| 一、材料和方法 | 第80-84页 |
| 1. 材料 | 第80-81页 |
| 1.1 实验动物 | 第80页 |
| 1.2 实验细胞 | 第80页 |
| 1.3 实验药物 | 第80页 |
| 1.4 主要试剂与耗材 | 第80-81页 |
| 1.5 实验仪器 | 第81页 |
| 2. 方法 | 第81-84页 |
| 2.1 含药血清制备与质谱分析 | 第81-82页 |
| 2.2 肠上皮细胞紧密连接建立 | 第82页 |
| 2.3 实验分组与给药 | 第82-83页 |
| 2.4 检测指标 | 第83-84页 |
| 2.5 统计分析 | 第84页 |
| 二、结果 | 第84-89页 |
| 1. 肠安Ⅱ号药物成分初步分析 | 第84-85页 |
| 2. 各组细胞24h内细胞跨膜电阻值的变化 | 第85-87页 |
| 3. 各组细胞大分子物质荧光黄通透率的变化 | 第87-88页 |
| 4. 透射电镜下各组细胞微绒毛形态与紧密连接超微结构变化 | 第88-89页 |
| 4.1 微绒毛形态变化 | 第88页 |
| 4.2 细胞紧密连接结构变化 | 第88-89页 |
| 三、讨论 | 第89-93页 |
| 1. 肠安Ⅱ号方的组方立意及药物组分分析 | 第89-90页 |
| 2. 从整体细胞水平及微观细胞形态研究肠安Ⅱ号方对肠上皮细胞紧密连接的调控作用 | 第90-93页 |
| 研究三 基于MLCK-MLC信号通路研究肠安Ⅱ号方对肠上皮细胞紧密连接的调控机制 | 第93-112页 |
| 一、材料和方法 | 第93-100页 |
| 1. 材料 | 第93-95页 |
| 1.1 实验动物 | 第93页 |
| 1.2 实验细胞 | 第93页 |
| 1.3 实验药物 | 第93页 |
| 1.4 主要试剂与耗材 | 第93-95页 |
| 1.5 实验仪器 | 第95页 |
| 2. 方法 | 第95-100页 |
| 2.1 紧密连接模型建立 | 第95页 |
| 2.2 实验分组与给药 | 第95页 |
| 2.3 检测指标 | 第95-100页 |
| 二、结果 | 第100-107页 |
| 1. 免疫荧光：ZO-1、Claudin-1及细胞骨架微丝在细胞膜的分布 | 第100-102页 |
| 2. Western-bloting：ZO-1、Claudin-1及Occludin | 第102-103页 |
| 3. 免疫荧光：NF-kB p65 | 第103-104页 |
| 4. Real-Time PCR: MLCK mRNA | 第104-105页 |
| 5. Western-bloting：MLCK、MLC及p-MLC | 第105-107页 |
| 三、讨论 | 第107-112页 |
| 1. 肠安Ⅱ号方调控紧密连接蛋白在细胞膜表面的分布与表达 | 第107-108页 |
| 2. 基于MLCK-MLC信号通路研究肠安Ⅱ号方对细胞骨架微丝的分子调控机制 | 第108-112页 |
| 研究四 肠安Ⅱ号方对TNF-α触发的细胞因子失衡的调控作用 | 第112-118页 |
| 一、材料和方法 | 第112-113页 |
| 1. 材料 | 第112-113页 |
| 1.1 实验动物 | 第112页 |
| 1.2 实验细胞 | 第112页 |
| 1.3 实验药物 | 第112页 |
| 1.4 主要试剂与耗材 | 第112-113页 |
| 1.5 实验仪器 | 第113页 |
| 2. 方法 | 第113页 |
| 2.1 肠上皮细胞紧密连接建立 | 第113页 |
| 2.2 实验分组与给药 | 第113页 |
| 2.3 检测指标 | 第113页 |
| 2.4 统计分析方法 | 第113页 |
| 二、结果 | 第113-116页 |
| 1. 促炎因子IFN-γ、IL-6、IL-8含量 | 第113-115页 |
| 2. 抗炎因子IL-4、IL-10含量 | 第115-116页 |
| 三、讨论 | 第116-118页 |
| 肠安Ⅱ号方对TNF-α触发的细胞因子失衡的调控作用 | 第116-118页 |
| 结论与创新点 | 第118-119页 |
| 参考文献 | 第119-125页 |
| 不足与展望 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126-127页 |
| 个人简历 | 第127-129页 |
| 附录---查新报告 | 第129-134页 |
