中文摘要 | 第4-9页 |
英文摘要 | 第9-14页 |
第一章 引言 | 第23-26页 |
第二章 树突状细胞与游离SiO_2粉尘的相互作用与机制体外研究 | 第26-70页 |
1 实验材料和方法 | 第27-46页 |
1.1 实验材料 | 第27-31页 |
1.1.1 实验动物 | 第27页 |
1.1.2 主要实验试剂 | 第27-29页 |
1.1.3 主要试剂的配制 | 第29-31页 |
1.2 主要仪器 | 第31-32页 |
1.3 实验方法 | 第32-46页 |
1.3.1 DC的细胞体外诱导培养和鉴定 | 第32-33页 |
1.3.2 DC的电镜观察 | 第33-34页 |
1.3.3 流式细胞术检测DC细胞表面分子 | 第34页 |
1.3.4 流式细胞术检测Th1、Th2细胞分型 | 第34-35页 |
1.3.5 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第35页 |
1.3.6 大鼠AM的提取和纯化 | 第35-36页 |
1.3.7 CCK8法检测SiO_2粉尘对DC和AM活性的影响 | 第36页 |
1.3.8 Transwell细胞共培养模型的建立和SiO_2粉尘暴露 | 第36-37页 |
1.3.9 qRT-PCR 法检测DC中IL-12、IL-18、TLR2、TLR4、Myd88和NFκBmRNA的表达 | 第37-41页 |
1.3.10 Western blot检测DC中IL-12、IL-18、TLR4、TLR9、Myd88和NFκB的蛋白表达 | 第41-43页 |
1.3.11 DC对脾脏T细胞的作用 | 第43-45页 |
1.3.12 统计方法 | 第45-46页 |
2 结果 | 第46-64页 |
2.1 原代培养的DC鉴定 | 第46-48页 |
2.1.1 光学倒置相差显微镜下不同培养时段DC的形态 | 第46页 |
2.1.2 电镜观察下的DC形态结构 | 第46-47页 |
2.1.3 DC的细胞表型分析 | 第47-48页 |
2.2 DC功能观察 | 第48-51页 |
2.2.1 不同培养时段的DC吞噬功能观察 | 第48-50页 |
2.2.2 不同培养时段的DC蛋白分泌水平 | 第50-51页 |
2.3 DC对SiO_2粉尘的吞噬作用 | 第51-52页 |
2.4 SiO_2粉尘对DC和AM活性的影响 | 第52-54页 |
2.5 SiO_2粉尘暴露对DC形态和功能的影响 | 第54-64页 |
2.5.1 SiO_2粉尘暴露对DC形态的影响 | 第54页 |
2.5.2 SiO_2粉尘暴露对DC吞噬功能的影响 | 第54-55页 |
2.5.3 SiO_2粉尘暴露对DC表型分子表达的影响 | 第55-57页 |
2.5.4 SiO_2粉尘暴露对DC IL-12 和IL-18 m RNA表达的影响 | 第57-59页 |
2.5.4.1 细胞总RNA质量检测 | 第57页 |
2.5.4.2 合成引物质量验证 | 第57-58页 |
2.5.4.3 qRT-PCR检测IL-12和IL-18mRNA的表达水平 | 第58-59页 |
2.5.5 SiO_2粉尘暴露对DCIL-12和IL-18蛋白表达的影响 | 第59-60页 |
2.5.6 SiO_2粉尘暴露对DC细胞TLR4、TLR9、Myd88、NFκB基因mRNA表达的影响 | 第60-61页 |
2.5.7 SiO_2粉尘暴露对DC细胞TLR4、TLR9、Myd88、NFκB蛋白表达的影响 | 第61-62页 |
2.5.8 SiO_2粉尘暴露后的DC对T细胞的作用 | 第62-64页 |
2.5.8.1 SiO_2粉尘暴露后的DC对T细胞具有清除作用 | 第62-63页 |
2.5.8.2 SiO_2粉尘暴露后的DC诱导T细胞的Th2偏移作用 | 第63-64页 |
3. 讨论 | 第64-69页 |
4. 小结 | 第69-70页 |
第三章 实验性大鼠矽肺发生发展中树突状细胞分布与效应的动态观察 | 第70-94页 |
1 实验材料和方法 | 第72-78页 |
1.1. 实验材料 | 第72-73页 |
1.1.1 实验动物 | 第72页 |
1.1.2 主要实验试剂 | 第72-73页 |
1.1.3 主要试剂的配制 | 第73页 |
1.2 主要实验仪器 | 第73页 |
1.3 实验方法 | 第73-78页 |
1.3.1 大鼠矽肺模型的建立 | 第73-74页 |
1.3.2 HE染色 | 第74页 |
1.3.3 polymer双染的步骤 | 第74-75页 |
1.3.4 流式细胞术 | 第75页 |
1.3.5 肺组织蛋白提取 | 第75-76页 |
1.3.6 肺泡灌洗液中Th1、Th2细胞分型检测 | 第76页 |
1.3.7 大鼠肺泡灌洗液提取 | 第76-77页 |
1.3.8 统计方法 | 第77-78页 |
2 结果 | 第78-89页 |
2.1 矽肺大鼠肺组织形态观察 | 第78-79页 |
2.2 矽肺大鼠肺泡灌洗液中DC数量的变化 | 第79-80页 |
2.3 矽肺大鼠外周血中DC数量的变化 | 第80-82页 |
2.4 矽肺大鼠肺组织中DC和AM的表达 | 第82-84页 |
2.5 矽肺大鼠肺泡灌洗液中Th1、Th2细胞的变化 | 第84-87页 |
2.6 矽肺染尘大鼠肺组织中IL-4、IFN-γ 的表达 | 第87-88页 |
2.7 SiO_2粉尘暴露诱导DC迁移的影响 | 第88-89页 |
3 讨论 | 第89-93页 |
4 小结 | 第93-94页 |
第四章 结论 | 第94-95页 |
下一步的研究计划 | 第95页 |
论文的创新点 | 第95-96页 |
参考文献 | 第96-104页 |
综述 树突状细胞免疫功能研究进展 | 第104-120页 |
1. DC的来源和功能 | 第104-105页 |
2. DC对T细胞的免疫调节作用 | 第105-106页 |
3. DC在自身免疫性疾病中的作用 | 第106-108页 |
4. DC在肿瘤免疫中的作用 | 第108-109页 |
5. DC在病毒感染免疫中的作用 | 第109-110页 |
6. DC在移植免疫中的作用 | 第110-111页 |
7. 展望 | 第111-112页 |
参考文献 | 第112-120页 |
致谢 | 第120-121页 |
个人简历 | 第121页 |