| 第一部分 基于核酸适配体的乳腺癌靶向治疗研究 | 第1-64页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-37页 |
| 1. 乳腺癌 | 第11-13页 |
| ·概述 | 第11-12页 |
| ·分子分型及临床意义 | 第12-13页 |
| 2. HER2过表达型乳腺癌 | 第13-18页 |
| ·Her-2/neu基因 | 第14页 |
| ·HER2过表达与乳腺癌的发生、发展和转移 | 第14-15页 |
| ·HER2过表达型乳腺癌的治疗抵抗 | 第15-18页 |
| ·化疗抵抗 | 第15-16页 |
| ·内分泌治疗抵抗 | 第16页 |
| ·靶向治疗抵抗 | 第16-18页 |
| 3. 适配体 | 第18-24页 |
| ·适配体与SELEX技术 | 第18-21页 |
| ·适配体 | 第18-19页 |
| ·SELEX技术 | 第19-21页 |
| ·适配体与肿瘤的诊断和治疗 | 第21-23页 |
| ·适配体与肿瘤诊断 | 第21页 |
| ·适配体与肿瘤治疗 | 第21-23页 |
| ·适配体vs.抗体 | 第23-24页 |
| 4. 选题依据及研究意义 | 第24-25页 |
| 5. 研究策略和技术路线 | 第25-27页 |
| ·拟解决的科学问题 | 第25页 |
| ·研究策略 | 第25-26页 |
| ·技术路线 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-37页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第37-44页 |
| 1. 实验材料和试剂 | 第37-39页 |
| ·细胞、细菌及其培养 | 第37页 |
| ·单链寡核苷酸文库和引物 | 第37页 |
| ·多肽和蛋白 | 第37-38页 |
| ·磁珠 | 第38页 |
| ·试剂盒 | 第38页 |
| ·试剂及配制方法 | 第38-39页 |
| ·培养用试剂 | 第38页 |
| ·化学试剂 | 第38页 |
| ·配制方法 | 第38-39页 |
| 2. 实验仪器和设备 | 第39-40页 |
| 3. 实验方法 | 第40-44页 |
| ·适配体的体外筛选过程 | 第40-41页 |
| ·HER2多肽与SLE磁珠耦联 | 第40页 |
| ·单链DNA文库筛选 | 第40-41页 |
| ·PCR扩增 | 第41页 |
| ·链酶亲和素磁珠分离单链DNA | 第41页 |
| ·适配体的克隆分析和测序 | 第41-42页 |
| ·流式细胞术检测 | 第42-43页 |
| ·筛选进程监测 | 第42页 |
| ·适配体和靶标的结合性 | 第42页 |
| ·适配体和细胞的结合性 | 第42-43页 |
| ·适配体HB5的结构预测 | 第43页 |
| ·适配体-阿霉素载药体系(Apt-Dox) | 第43-44页 |
| ·Apt-Dox的构建 | 第43页 |
| ·共聚焦显微镜实验 | 第43页 |
| ·流式细胞检测 | 第43-44页 |
| ·MTS检测 | 第44页 |
| ·统计分析 | 第44页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第44-56页 |
| 1. 体外筛选 | 第44-46页 |
| 2. 适配体性质分析 | 第46-51页 |
| ·适配体的序列与结构 | 第46页 |
| ·适配体的结合性质 | 第46-51页 |
| ·适配体选择性结合HER2结构 | 第46-48页 |
| ·适配体的亲和力 | 第48-49页 |
| ·适配体选择性结合HER2阳性乳腺癌细胞 | 第49-51页 |
| 3. 适配体-阿霉素载药体系(Apt-Dox) | 第51-56页 |
| ·Apt-Dox的特性 | 第51-52页 |
| ·Apt-Dox被选择性摄入HER2阳性乳腺癌细胞 | 第52-54页 |
| ·Apt-Dox的抗肿瘤效果 | 第54-56页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第56-60页 |
| 1. 讨论 | 第56-58页 |
| 2. 结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 第二部分 多壁碳纳米管间接毒性的体外研究 | 第64-99页 |
| 摘要 | 第64-65页 |
| Abstract | 第65-66页 |
| 第一章 绪论 | 第66-72页 |
| 1. 碳纳米管概述 | 第66页 |
| 2. 碳纳米管在生物医学领域的应用 | 第66-67页 |
| 3. 碳纳米管的毒性 | 第67-70页 |
| 4. 本论文的研究思路 | 第70-72页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第72-82页 |
| 1. 实验材料和试剂 | 第72页 |
| 2. 实验仪器和设备 | 第72-73页 |
| 3. 多壁碳纳米管(MWCNTs)水溶液的制备 | 第73页 |
| 4. 人肿瘤细胞和正常细胞的培养 | 第73-74页 |
| 5. 人外周血单个核细胞制备 | 第74页 |
| 6. 碳纳米管对淋巴细胞介导的细胞毒性研究 | 第74-81页 |
| ·MTS法 | 第74-76页 |
| ·检测不同浓度碳纳米管处理的淋巴细胞对靶细胞的影响 | 第75页 |
| ·检测不同E：T比的影响 | 第75-76页 |
| ·检测一定浓度碳纳米管处理的淋巴细胞对靶细胞的影响 | 第76页 |
| ·Annexin-Ⅴ/PI双染色法 | 第76-77页 |
| ·碳纳米管对靶细胞凋亡的影响 | 第76-77页 |
| ·碳纳米管对效应细胞凋亡的影响 | 第77页 |
| ·3H-TdR渗入法 | 第77页 |
| ·PI染色 | 第77-78页 |
| ·TNF-α和IFN-γ测定 | 第78页 |
| ·western blot实验 | 第78-81页 |
| ·PDTC抑制NF-KB实验 | 第81页 |
| 7. 统计分析 | 第81-82页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第82-91页 |
| 1. 功能化MWCNTs | 第82页 |
| 2. MWCNTs促进淋巴细胞介导的细胞毒性 | 第82-84页 |
| 3. MWCNTs不影响肿瘤细胞和正常细胞的活性 | 第84-86页 |
| ·MWCNTs不影响肿瘤细胞和正常细胞的增殖 | 第84-85页 |
| ·MWCNTs不诱导肿瘤细胞和正常细胞的凋亡 | 第85-86页 |
| 4. MWCNTs不影响淋巴细胞的增殖或凋亡 | 第86-88页 |
| 5. MWCNTs促进淋巴细胞分泌IFN-γ和TNF-α | 第88-89页 |
| 6. MWCNTs可能通过NF-кB通路影响淋巴细胞对靶细胞的杀伤 | 第89-91页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第91-93页 |
| 1. 讨论 | 第91-92页 |
| 2. 结论 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-99页 |
| 附录一 英文缩略词汇表 | 第99-101页 |
| 附录二 文章题录 | 第101-102页 |
| 附录三 非论文综述 | 第102-115页 |
| 参考文献 | 第111-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
