人角膜上皮细胞系的鉴定与组织工程人角膜上皮体外重建的研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-27页 |
| 1 组织工程角膜 | 第13-14页 |
| 2 组织工程角膜上皮的研究现状 | 第14-27页 |
| ·组织工程角膜上皮体外重建的种子细胞 | 第15-20页 |
| ·胚胎干细胞 | 第15-16页 |
| ·角膜缘干细胞 | 第16-17页 |
| ·表皮干细胞 | 第17-18页 |
| ·毛囊干细胞 | 第18页 |
| ·骨髓间充质干细胞 | 第18页 |
| ·口腔黏膜上皮细胞 | 第18-19页 |
| ·羊膜上皮细胞 | 第19-20页 |
| ·诱导多功能干细胞 | 第20页 |
| ·组织工程角膜上皮体外重建的载体材料 | 第20-24页 |
| ·胶原及其复合材料 | 第21页 |
| ·羊膜及其复合材料 | 第21-22页 |
| ·脱细胞角膜基质 | 第22-23页 |
| ·壳聚糖 | 第23页 |
| ·纤维蛋白 | 第23-24页 |
| ·聚异丙基丙烯酰胺凝胶 | 第24页 |
| ·组织工程角膜上皮的体外重建 | 第24-25页 |
| ·目前研究中存在的问题及其解决途径 | 第25-27页 |
| 第二章 人角膜上皮细胞系的鉴定 | 第27-41页 |
| 1 实验用品 | 第27-30页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·主要实验仪器 | 第27-28页 |
| ·实验耗材 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28-30页 |
| ·角膜上皮细胞培养液 | 第28页 |
| ·消化酶类 | 第28-29页 |
| ·D-Hanks平衡盐溶液 | 第29页 |
| ·人角膜上皮细胞系的鉴定所用试剂 | 第29-30页 |
| 2 实验方法 | 第30-32页 |
| ·人角膜上皮细胞体外培养方法 | 第30页 |
| ·人角膜上皮细胞系细胞生长特性 | 第30-31页 |
| ·人角膜上皮细胞系细胞染色体组型分析 | 第31-32页 |
| ·处理、收集细胞 | 第31页 |
| ·低渗处理细胞 | 第31页 |
| ·固定 | 第31页 |
| ·制片 | 第31页 |
| ·染色和观察 | 第31-32页 |
| ·人角膜上皮细胞系细胞免疫荧光检测 | 第32页 |
| ·人角膜上皮细胞系细胞的致瘤性检验 | 第32页 |
| 3 实验结果 | 第32-38页 |
| ·人角膜上皮细胞系细胞的生长特性 | 第32-34页 |
| ·人角膜上皮细胞系细胞的染色体计数与核型分析 | 第34-36页 |
| ·人角膜上皮细胞系细胞免疫荧光检测 | 第36页 |
| ·传代培养的角膜上皮细胞的致瘤性检验 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 5 本章小结 | 第40-41页 |
| 第三章 组织工程人角膜上皮的体外重建及鉴定 | 第41-58页 |
| 1 实验用品 | 第41-45页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·主要实验仪器 | 第41-42页 |
| ·实验耗材及试剂 | 第42-43页 |
| ·主要试剂配方 | 第43-45页 |
| 2 实验方法 | 第45-49页 |
| ·羊膜的取材以及去上皮层羊膜的制备 | 第45-46页 |
| ·羊膜的取材 | 第45页 |
| ·羊膜的保存 | 第45页 |
| ·去上皮羊膜的制备 | 第45-46页 |
| ·接种角膜上皮细胞前去上皮羊膜的处理 | 第46页 |
| ·以羊膜作为载体支架接种人角膜上皮细胞 | 第46页 |
| ·石蜡切片 | 第46-47页 |
| ·固定 | 第46页 |
| ·脱水 | 第46-47页 |
| ·透明 | 第47页 |
| ·浸蜡与包埋 | 第47页 |
| ·切片与烤片 | 第47页 |
| ·HE染色 | 第47-48页 |
| ·脱蜡及水化 | 第47页 |
| ·苏木精染色 | 第47页 |
| ·伊红染色 | 第47页 |
| ·封片 | 第47-48页 |
| ·重建组织工程角膜上皮光学透明度的体外观察 | 第48页 |
| ·免疫组织化学染色 | 第48页 |
| ·载玻片的处理 | 第48页 |
| ·取材及固定 | 第48页 |
| ·免疫荧光组织化学染色 | 第48页 |
| ·扫描电镜观察 | 第48-49页 |
| ·透射电镜观察 | 第49页 |
| 3 实验结果 | 第49-55页 |
| ·接种细胞的生长特性 | 第49页 |
| ·组织工程人角膜上皮HE染色 | 第49-52页 |
| ·重建组织工程角膜上皮光学透明度的体外观察 | 第52页 |
| ·免疫组织化学染色 | 第52-54页 |
| ·扫描电镜结果 | 第54页 |
| ·透射电镜结果 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-57页 |
| 5 本章小结 | 第57-58页 |
| 全文总结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 附录 | 第65-68页 |
| 个人简历 | 第68页 |
| 硕士期间发表论文及专利情况 | 第68页 |
