缩略语表 | 第6-9页 |
中文摘要 | 第9-13页 |
英文摘要 | 第13-17页 |
前言 | 第18-20页 |
文献回顾 | 第20-55页 |
第一部分 前列腺癌研究现状 | 第20-34页 |
第二部分 钾离子通道在肿瘤中的表达和作用 | 第34-45页 |
第三部分BKCa在肿瘤中的研究进展 | 第45-55页 |
第一部分 BKCa在前列腺癌细胞和组织中的表达 | 第55-69页 |
1 材料 | 第55-57页 |
1.1 细胞系 | 第55页 |
1.2 前列腺癌组织 | 第55页 |
1.3 仪器设备 | 第55-56页 |
1.4 主要试剂 | 第56-57页 |
2 方法 | 第57-63页 |
2.1 细胞培养 | 第57页 |
2.2 实时荧光定量PCR | 第57-59页 |
2.3 Western blot | 第59-61页 |
2.4 免疫组织化学 | 第61-62页 |
2.5 免疫荧光 | 第62-63页 |
2.6 统计分析 | 第63页 |
3 结果 | 第63-67页 |
3.1 BKCa在前列腺癌细胞和正常细胞系中的表达差异 | 第63-64页 |
3.2 BKCa在前列腺癌和癌旁良性组织中的表达差异 | 第64-65页 |
3.3 BKCa在前列腺癌组织中的表达与Ki67 的相关性 | 第65-66页 |
3.4 BKCa在前列腺癌组织中的表达与肿瘤分期的关系 | 第66-67页 |
4 讨论 | 第67-69页 |
第二部分 BKCa表达调节对前列腺癌生长和转移的影响 | 第69-85页 |
1 材料 | 第69-70页 |
1.1 病毒和质粒 | 第69页 |
1.2 仪器设备 | 第69页 |
1.3 主要试剂 | 第69-70页 |
2 方法 | 第70-75页 |
2.1 重组质粒p IRES-BKCa的转染 | 第70-71页 |
2.2 慢病毒转染 | 第71页 |
2.3 MTT实验 | 第71页 |
2.4 Ed U实验 | 第71-72页 |
2.5 平板克隆实验 | 第72页 |
2.6 细胞划痕实验 | 第72-73页 |
2.7 Transwell实验 | 第73-74页 |
2.8 荷瘤裸鼠体内实验 | 第74页 |
2.9 统计分析 | 第74-75页 |
3 结果 | 第75-82页 |
3.1 BKCa表达上调可促进前列腺癌细胞的增殖 | 第75-76页 |
3.2 BKCa表达上调可促进前列腺癌细胞的迁移和侵袭 | 第76-77页 |
3.3 慢病毒介导的BKCa-sh RNA下调效果验证 | 第77-78页 |
3.4 BKCa表达下调可抑制前列腺癌细胞的增殖 | 第78-80页 |
3.5 BKCa表达下调可抑制前列腺癌细胞的迁移和侵袭 | 第80-81页 |
3.6 BKCa表达下调可抑制前列腺癌裸鼠体内生长和转移 | 第81-82页 |
4 讨论 | 第82-85页 |
第三部分 BKCa调控前列腺癌生长和转移的分子机制 | 第85-99页 |
1 材料 | 第85-86页 |
1.1 细胞系 | 第85页 |
1.2 仪器设备 | 第85页 |
1.3 主要试剂 | 第85-86页 |
2 方法 | 第86-88页 |
2.1 细胞培养 | 第86页 |
2.2 激光共聚焦检测 | 第86页 |
2.3 免疫共沉淀 | 第86-87页 |
2.4 膜片钳实验 | 第87-88页 |
2.5 MTT实验 | 第88页 |
2.6 Transwell迁移实验 | 第88页 |
2.7 统计分析 | 第88页 |
3 结果 | 第88-94页 |
3.1 BKCa的离子通透功能在其促进前列腺癌细胞增殖和迁移中的作用 | 第88-90页 |
3.2 BKCa与整合素 αvβ3 在前列腺癌PC3 细胞中的共表达和定位 | 第90-91页 |
3.3 BKCa通过募集FAK至整合素 αvβ3 促进其磷酸化 | 第91-92页 |
3.4 阻断FAK信号通路可消除BKCa对细胞增殖和迁移的促进作用 | 第92-94页 |
3.5 BKCa和p-FAK在临床前列腺癌组织中的表达呈正相关 | 第94页 |
4 讨论 | 第94-99页 |
小结 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-121页 |
个人简历和研究成果 | 第121-122页 |
致谢 | 第122页 |