摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
缩略语表 | 第8-9页 |
第一章 引言 | 第9-14页 |
1.1 研究背景 | 第9页 |
1.2 皮肤 | 第9页 |
1.3 角蛋白 | 第9-11页 |
1.4 电离辐射损伤机制 | 第11-12页 |
1.5 紫外辐射损伤机制 | 第12页 |
1.6 研究内容与意义 | 第12-14页 |
1.6.1 研究主要内容 | 第12-13页 |
1.6.2 研究意义 | 第13-14页 |
第二章 实验材料与方法 | 第14-33页 |
2.1 实验仪器 | 第14页 |
2.2 实验材料和试剂配制 | 第14-21页 |
2.2.1 实验试剂 | 第14-15页 |
2.2.2 实验试剂盒 | 第15页 |
2.2.3 抗体 | 第15页 |
2.2.4 引物信息 | 第15-17页 |
2.2.5 试剂配制 | 第17-21页 |
2.3 实验方法 | 第21-33页 |
2.3.1 实验动物 | 第21-22页 |
2.3.1.1 电离辐射模型 | 第21页 |
2.3.1.2 紫外照射模型 | 第21-22页 |
2.3.1.3 老鼠基因型鉴定 | 第22页 |
2.3.2 Trizol法提RNA和总蛋白 | 第22-23页 |
2.3.2.1 RNA提取 | 第22页 |
2.3.2.2 提取蛋白质 | 第22-23页 |
2.3.3 RNA反转录 | 第23-24页 |
2.3.3.1 DNA消化 | 第23页 |
2.3.3.2 cDNA合成 | 第23-24页 |
2.3.3.3 Real-time RT PCR | 第24页 |
2.3.4 分子克隆实验 | 第24-26页 |
2.3.4.1 PCR | 第24-25页 |
2.3.4.2 Krt17启动子截断 | 第25页 |
2.3.4.3 shRNA设计 | 第25页 |
2.3.4.4 感受态细菌制备 | 第25页 |
2.3.4.5 转化 | 第25-26页 |
2.3.4.6 质粒抽提 | 第26页 |
2.3.5 Western blot | 第26-27页 |
2.3.6 细胞转染 | 第27-28页 |
2.3.6.1 质粒纯化 | 第27页 |
2.3.6.2 细胞转染 | 第27-28页 |
2.3.7 HE染色 | 第28页 |
2.3.8 石蜡切片免疫荧光及免疫组化 | 第28-29页 |
2.3.9 荧光素酶报告基因实验 | 第29页 |
2.3.10 凝胶迁移实验 | 第29-31页 |
2.3.11 CHIP实验 | 第31-33页 |
第三章 结果 | 第33-50页 |
3.1 电离辐射会引起皮肤脱屑 | 第33-34页 |
3.2 电离辐射会引起皮肤角蛋白Krt17基因的变化 | 第34-38页 |
3.3 p53抑制Krt17表达 | 第38-50页 |
3.3.1 电离辐射激活p53,p53抑制Krt17表达 | 第38-43页 |
3.3.2 紫外线辐射激活p53,p53抑制Krt17表达 | 第43-46页 |
3.3.3 Krt17是p53的直接下游基因 | 第46-50页 |
第四章 讨论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
个人简历 | 第58页 |