| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 0 前言 | 第13-25页 |
| 0.1 抗体制备研究进展 | 第13-18页 |
| 0.1.1 盐析法 | 第14页 |
| 0.1.2 辛酸沉淀法 | 第14页 |
| 0.1.3 聚乙二醇沉淀法(PEG) | 第14页 |
| 0.1.4 凝胶过滤层析法(GFC) | 第14-15页 |
| 0.1.5 疏水层析法(HIC) | 第15页 |
| 0.1.6 离子交换层析法(IEC) | 第15-16页 |
| 0.1.7 亲硫吸附色谱(TAC) | 第16页 |
| 0.1.8 聚焦层析法(FC) | 第16页 |
| 0.1.9 高效液相色谱法(HPLC) | 第16-17页 |
| 0.1.10 亲和层析技术(AC) | 第17-18页 |
| 0.1.10.1 生物亲和层析(BAC) | 第17-18页 |
| 0.1.10.2 金属鳌合亲和层析(McAFC) | 第18页 |
| 0.1.10.3 拟生物亲和层析(BMAC) | 第18页 |
| 0.2 免疫亲和层析技术研究进展 | 第18-21页 |
| 0.2.1 免疫亲和层析技术原理 | 第18-20页 |
| 0.2.2 免疫亲和层析技术的应用 | 第20页 |
| 0.2.3 CNBr-actived Sepharose 4B | 第20页 |
| 0.2.4 免疫亲和层析技术展望 | 第20-21页 |
| 0.3 卵黄抗体研究进展 | 第21-24页 |
| 0.3.1 卵黄免疫球蛋白概述 | 第21-22页 |
| 0.3.2 IgY的分子结构及理化性质 | 第22页 |
| 0.3.2.1 IgY的分子结构 | 第22页 |
| 0.3.2.2 IgY的性质 | 第22页 |
| 0.3.3 IgY的分离纯化方法 | 第22-23页 |
| 0.3.4 IgY的现状及其应用前景 | 第23-24页 |
| 0.3.4.1 IgY在免疫检测中的应用 | 第23页 |
| 0.3.4.2 在动物疾病免疫防治中的应用 | 第23-24页 |
| 0.3.4.3 食品和医学中的应用 | 第24页 |
| 0.4 本文意义 | 第24-25页 |
| 1 免疫亲和层析柱的制备 | 第25-42页 |
| 1.1 引言 | 第25页 |
| 1.2 实验材料 | 第25-27页 |
| 1.2.1 试剂 | 第25-26页 |
| 1.2.2 仪器与设备 | 第26-27页 |
| 1.3 实验方法 | 第27-31页 |
| 1.3.1 蛋白浓度测定 | 第27页 |
| 1.3.2 偶联条件的优化 | 第27-28页 |
| 1.3.2.1 配基浓度对偶联的影响 | 第28页 |
| 1.3.2.2 pH对偶联的影响 | 第28页 |
| 1.3.2.3 温度及时间对偶联的影响 | 第28页 |
| 1.3.2.4 正交实验 | 第28页 |
| 1.3.3 制备免疫亲和层析柱 | 第28-29页 |
| 1.3.4 免疫亲和层析柱的使用 | 第29-30页 |
| 1.3.5 免疫亲和柱结合特异性IgY量的研究 | 第30页 |
| 1.3.6 免疫亲和柱使用条件的优化 | 第30页 |
| 1.3.6.1 上样缓冲液体积的选择 | 第30页 |
| 1.3.6.2 上样缓冲液流速的选择 | 第30页 |
| 1.3.7 免疫亲和柱的性能鉴定 | 第30-31页 |
| 1.3.7.1 柱容量 | 第30-31页 |
| 1.3.7.2 重复性 | 第31页 |
| 1.3.7.3 稳定性 | 第31页 |
| 1.4 结果与分析 | 第31-40页 |
| 1.4.1 偶联条件单因素实验结果 | 第31-35页 |
| 1.4.1.1 配基浓度与偶联的关系 | 第31-33页 |
| 1.4.1.2 pH对配基偶联的影响 | 第33-34页 |
| 1.4.1.3 温度及时间对配基偶联的影响 | 第34-35页 |
| 1.4.2 三因素三水平偶联条件正交试验结果 | 第35-36页 |
| 1.4.3 上样条件的优化 | 第36-38页 |
| 1.4.4 免疫亲和柱性能评价 | 第38-40页 |
| 1.4.4.1 柱容量 | 第38页 |
| 1.4.4.2 柱重复利用率 | 第38-39页 |
| 1.4.4.3 柱稳定性 | 第39-40页 |
| 1.5 本章小结 | 第40-42页 |
| 2 酪氨酸酶卵黄抗体的制备 | 第42-55页 |
| 2.1 引言 | 第42页 |
| 2.2 实验材料及仪器 | 第42-44页 |
| 2.2.1 试剂 | 第42-43页 |
| 2.2.2 仪器与设备 | 第43-44页 |
| 2.3 实验方法 | 第44-47页 |
| 2.3.1 动物免疫 | 第44页 |
| 2.3.2 IgY的分离提取 | 第44页 |
| 2.3.3 蛋白含量的测定 | 第44-45页 |
| 2.3.4 间接酶联免疫吸附法测定IgY效价 | 第45-46页 |
| 2.3.5 IgY纯度鉴定 | 第46页 |
| 2.3.6 IgY的免疫应答 | 第46页 |
| 2.3.7 IgY对酪氨酸酶活性的影响 | 第46页 |
| 2.3.7.1 酪氨酸酶酶活力测定方法 | 第46页 |
| 2.3.7.2 IgY对酪氨酸酶活性的抑制 | 第46页 |
| 2.3.8 IgY化性质的研究 | 第46-47页 |
| 2.3.8.1 IgY的酸碱稳定性 | 第46-47页 |
| 2.3.8.2 IgY的热稳定性 | 第47页 |
| 2.4 结果与分析 | 第47-53页 |
| 2.4.1 卵黄抗体制备情况 | 第47-48页 |
| 2.4.2 SDS-PAGE纯度鉴定 | 第48-49页 |
| 2.4.3 IgY对酪氨酸酶活性的影响 | 第49-51页 |
| 2.4.4 IgY理化稳定性 | 第51-53页 |
| 2.5 本章小结 | 第53-55页 |
| 3 利用免疫亲和柱分离纯化特异性IgY及其性能的研究 | 第55-64页 |
| 3.1 引言 | 第55页 |
| 3.2 实验材料 | 第55-56页 |
| 3.2.1 试剂 | 第55-56页 |
| 3.2.2 仪器与设备 | 第56页 |
| 3.3 实验方法 | 第56-58页 |
| 3.3.1 特异性IgY的免疫亲和纯化 | 第56-57页 |
| 3.3.2 特异性IgY与粗提取IgY效价对比 | 第57页 |
| 3.3.3 特异性IgY酶活抑制 | 第57-58页 |
| 3.4 结果与分析 | 第58-63页 |
| 3.4.1 免疫亲和层析柱分离纯化特异性IgY | 第58-59页 |
| 3.4.2 特异性IgY与粗提取IgY效价对比 | 第59-60页 |
| 3.4.3 特异性IgY酶活抑制 | 第60-63页 |
| 3.5 本章小结 | 第63-64页 |
| 4 论文总结 | 第64-66页 |
| 5 论文创新点 | 第66-67页 |
| 6 下一步工作展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 个人简历 | 第73页 |
| 已发表的学术论文 | 第73页 |