| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第14-32页 |
| 1.1 胃癌 | 第14-15页 |
| 1.2 表观遗传学 | 第15-18页 |
| 1.2.1 表观遗传学的概念及机制 | 第15页 |
| 1.2.2 DNA甲基化 | 第15-16页 |
| 1.2.3 非编码RNA | 第16-17页 |
| 1.2.4 组蛋白修饰 | 第17-18页 |
| 1.3 LSD1 | 第18-20页 |
| 1.3.1 LSD1结构和功能 | 第18-20页 |
| 1.3.2 LSD1与肿瘤、EMT的关系 | 第20页 |
| 1.4 TGF-β1 | 第20-21页 |
| 1.4.1 TGF-β超家族 | 第20-21页 |
| 1.4.2 TGF-β1信号通路 | 第21页 |
| 1.5 Wnt信号通路 | 第21-24页 |
| 1.5.1 Wnt信号通路简介 | 第21-23页 |
| 1.5.2 Wnt拮抗剂 | 第23-24页 |
| 1.6 EMT | 第24-26页 |
| 1.6.1 EMT基本过程和标志蛋白 | 第24页 |
| 1.6.2 EMT与肿瘤 | 第24-25页 |
| 1.6.3 EMT与细胞内信号通路 | 第25-26页 |
| 1.7 本课题研究目的和内容 | 第26-28页 |
| 参考文献 | 第28-32页 |
| 2 胃癌细胞MGC-803和胃粘膜上皮细胞GES-1中LSD1对TGF-β1表达的作用 | 第32-54页 |
| 引言 | 第32页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-36页 |
| 2.1.1 实验仪器与试剂 | 第32-34页 |
| 2.1.2 ChIP溶液配制 | 第34-36页 |
| 2.2 实验方法 | 第36-48页 |
| 2.2.1 细胞培养与质粒转染 | 第36-37页 |
| 2.2.2 Western blot分析 | 第37-39页 |
| 2.2.3 Elisa实验检测TGF-β1 | 第39-41页 |
| 2.2.4 总RNA的提取与逆转录 | 第41-43页 |
| 2.2.5 RT-qPCR | 第43-44页 |
| 2.2.6 ChIP-qPCR实验 | 第44-48页 |
| 2.3 实验结果 | 第48-52页 |
| 2.3.1 LSD1过表达质粒pLVX-IRES-ZsGreenl-LSD1和低表达质粒pLVX-shRNA-LSD1分别上调和下调LSD1的表达量 | 第48-50页 |
| 2.3.2 LSD1的过表达和低表达分别上调和下调TGF-β1的表达量 | 第50-51页 |
| 2.3.3 LSD1调控TGF-β1与TGF-β1启动区周围的H3K4me2和H3K9me2蓄积水平相关 | 第51-52页 |
| 小结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-54页 |
| 3 LSD1对Wnt通路相关抑制因子和关键蛋白的表达影响 | 第54-63页 |
| 引言 | 第54页 |
| 3.1 实验材料 | 第54-55页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第54页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第54-55页 |
| 3.2 实验方法 | 第55-57页 |
| 3.2.1 利用病毒LV-KDM1A(PCA00252)建立LSD1 KD细胞系MGC-803和GES-1 | 第55-57页 |
| 3.2.2 ChIP-qPCR实验 | 第57页 |
| 3.2.3 Western Blot实验 | 第57页 |
| 3.3 实验结果 | 第57-60页 |
| 3.3.1 利用病毒LV-KDM1A(PCA00252)实现细胞系MGC-803和GES-1中LSD1的低表达 | 第57-58页 |
| 3.3.2 LSD1影响Wnt通路相关抑制因子的mRNA水平与基因启动区周围的H3K4和H3K9甲基化水平有关 | 第58-59页 |
| 3.3.3 LSD1低表达影响Wnt通路关键蛋白β-catenin的表达 | 第59-60页 |
| 小结 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-63页 |
| 4 LSD1对Wnt3a蛋白和Wnt/β-catenin通路的作用 | 第63-71页 |
| 引言 | 第63-64页 |
| 4.1 实验材料 | 第64页 |
| 4.1.1 实验仪器 | 第64页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第64页 |
| 4.2 实验方法 | 第64页 |
| 4.2.1 Western Blot实验 | 第64页 |
| 4.3 实验结果 | 第64-68页 |
| 4.3.1 LSD1低表达影响Wnt3a蛋白的分泌 | 第64-65页 |
| 4.3.2 LSD1低表达抑制Wnt3a/β-catenin通路 | 第65-68页 |
| 小结 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-71页 |
| 5 LSD1低表达后对EMT标志蛋白的作用 | 第71-75页 |
| 引言 | 第71页 |
| 5.1 实验材料 | 第71页 |
| 5.1.1 实验仪器 | 第71页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第71页 |
| 5.2 实验方法 | 第71页 |
| 5.2.1 Western Blot实验 | 第71页 |
| 5.3 实验结果 | 第71-72页 |
| 小结 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-75页 |
| 6 结论 | 第75-77页 |
| 个人简历与研究成果 | 第77-79页 |
| 个人简介 | 第77页 |
| 硕士在读期间的论文成果 | 第77-78页 |
| 会议论文摘要集 | 第78页 |
| 硕士期间的荣誉与奖励 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
