| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第1章 绪论 | 第15-37页 |
| 1.1 核酸分子探针简介 | 第15-16页 |
| 1.2 寡核苷酸分子探针 | 第16-20页 |
| 1.2.1 双链线性DNA探针 | 第16-17页 |
| 1.2.2 Taqman探针 | 第17页 |
| 1.2.3 分子信标探针 | 第17-18页 |
| 1.2.4 邻近杂交探针 | 第18-19页 |
| 1.2.5 锁式探针 | 第19-20页 |
| 1.3 功能核酸分子探针 | 第20-22页 |
| 1.3.1 核酸酶探针 | 第20-21页 |
| 1.3.2 核酸适配体探针 | 第21-22页 |
| 1.4 纳米-核酸分子探针 | 第22-26页 |
| 1.4.1 金纳米-核酸探针 | 第23-24页 |
| 1.4.2 石墨烯类-核酸探针 | 第24-25页 |
| 1.4.3 其他纳米-核酸探针 | 第25-26页 |
| 1.5 核酸信号放大技术 | 第26-30页 |
| 1.5.1 常见的酶辅助核酸信号放大方法 | 第26-28页 |
| 1.5.2 常见的无酶核酸信号放大方法 | 第28-30页 |
| 1.6 核酸分子探针在生物分析中的应用 | 第30-35页 |
| 1.6.1 DNA检测 | 第30-31页 |
| 1.6.2 DNA甲基化检测 | 第31页 |
| 1.6.3 mRNA和miRNA检测 | 第31-32页 |
| 1.6.4 单核苷酸多态性检测 | 第32-33页 |
| 1.6.5 蛋白和酶检测 | 第33-34页 |
| 1.6.6 小分子检测 | 第34-35页 |
| 1.6.7 金属离子检测 | 第35页 |
| 1.7 本研究论文的工作内容 | 第35-37页 |
| 第2章 基于T7核酸外切酶实现对单碱基错配的循环放大分析 | 第37-47页 |
| 2.1 前言 | 第37-38页 |
| 2.2 实验部分 | 第38-40页 |
| 2.2.1 试剂与仪器 | 第38页 |
| 2.2.2 实时荧光强度分析 | 第38-39页 |
| 2.2.3 单碱基多态性检测 | 第39页 |
| 2.2.4 凝胶电泳成像分析 | 第39页 |
| 2.2.5 人基因组实际样品分析 | 第39-40页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第40-46页 |
| 2.3.1 实验设计原理 | 第40页 |
| 2.3.2 实验原理的验证 | 第40-42页 |
| 2.3.3 实验设计可行性研究 | 第42-44页 |
| 2.3.4 人体实际样品检测 | 第44-46页 |
| 2.4 小结 | 第46-47页 |
| 第3章 基于DNAzyme-催化发夹组装探针对活细胞内源性金属离子的检测与成像 | 第47-65页 |
| 3.1 前言 | 第47-48页 |
| 3.2 实验部分 | 第48-53页 |
| 3.2.1 试剂与仪器 | 第48-49页 |
| 3.2.2 合成光保护的腺苷磷酰胺 | 第49-50页 |
| 3.2.3 荧光检测分析 | 第50页 |
| 3.2.4 实时荧光信号分析 | 第50-51页 |
| 3.2.5 凝胶电泳分析 | 第51页 |
| 3.2.6 细胞培养和DNA转染 | 第51页 |
| 3.2.7 共聚焦显微镜成像 | 第51-52页 |
| 3.2.8 流式细胞仪荧光分析 | 第52-53页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第53-64页 |
| 3.3.1 实验设计原理 | 第53-54页 |
| 3.3.2 实验可行性验证 | 第54-55页 |
| 3.3.3 探针灵敏度研究 | 第55页 |
| 3.3.4 探针选择性研究 | 第55-56页 |
| 3.3.5 实时荧光信号研究 | 第56-57页 |
| 3.3.6 光保护DzCHA探针性能研究 | 第57-58页 |
| 3.3.7 复杂环境性能研究 | 第58-59页 |
| 3.3.8 细胞内定位研究 | 第59-60页 |
| 3.3.9 内源性钠离子检测 | 第60-62页 |
| 3.3.10 细胞内钠离子定量检测 | 第62-64页 |
| 3.4 小结 | 第64-65页 |
| 第4章 荧光嵌段共轭高分子-DNA组装纳米探针对活细胞内多组分mRNA同时成像 | 第65-77页 |
| 4.1 前言 | 第65-66页 |
| 4.2 实验部分 | 第66-68页 |
| 4.2.1 试剂与仪器 | 第66页 |
| 4.2.2 荧光嵌段共轭高分子纳米粒子合成 | 第66页 |
| 4.2.3 荧光嵌段共轭高分子-DNA组装核酸纳米探针的制备 | 第66-67页 |
| 4.2.4 组装核酸纳米探针的选择性和灵敏度分析 | 第67页 |
| 4.2.5 细胞培养 | 第67页 |
| 4.2.6 核酸纳米探针的细胞毒性分析 | 第67页 |
| 4.2.7 共聚焦荧光显微镜成像 | 第67-68页 |
| 4.2.8 细胞内mRNA的相对定量分析 | 第68页 |
| 4.2.9 流式细胞仪分析 | 第68页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第68-76页 |
| 4.3.1 实验设计原理 | 第68-69页 |
| 4.3.2 纳米探针表针 | 第69-71页 |
| 4.3.3 实验可行性研究 | 第71-72页 |
| 4.3.4 纳米探针性能研究 | 第72-73页 |
| 4.3.5 纳米探针细胞毒性分析 | 第73页 |
| 4.3.6 活细胞内mRNA的多色成像 | 第73-74页 |
| 4.3.7 活细胞内mRNA浓度变化分析 | 第74-75页 |
| 4.3.8 流式细胞分析 | 第75-76页 |
| 4.4 小结 | 第76-77页 |
| 第5章 静电组装核酸纳米探针对细胞内端粒酶活性的可视化检测 | 第77-86页 |
| 5.1 前言 | 第77-78页 |
| 5.2 实验部分 | 第78-80页 |
| 5.2.1 试剂与仪器 | 第78页 |
| 5.2.2 CTAB包裹的金纳米合成 | 第78-79页 |
| 5.2.3 纳米探针的制备 | 第79页 |
| 5.2.4 细胞培养及端粒酶提取 | 第79页 |
| 5.2.5 荧光光谱分析 | 第79页 |
| 5.2.6 纳米探针的细胞毒性分析 | 第79页 |
| 5.2.7 共聚焦成像 | 第79-80页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第80-85页 |
| 5.3.1 实验设计原理 | 第80-81页 |
| 5.3.2 静电组装纳米探针表征 | 第81页 |
| 5.3.3 纳米探针的可行性分析 | 第81-82页 |
| 5.3.4 纳米探针的灵敏度分析 | 第82-83页 |
| 5.3.5 纳米探针稳定性分析 | 第83页 |
| 5.3.6 纳米探针细胞毒性分析 | 第83-84页 |
| 5.3.7 活细胞内端粒酶活性的成像分析 | 第84-85页 |
| 5.4 小结 | 第85-86页 |
| 结论 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-107页 |
| 附录A 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第107-108页 |
| 致谢 | 第108-109页 |
